黃秀珍,呂賽平,劉琴,鄒學(xué)森
(江西省腫瘤醫(yī)院檢驗科,江西 南昌 330029)
校準(zhǔn)是生化檢驗過程中最常用的操作程序之一,多種情況下需要對項目進行重新校準(zhǔn),如更換試劑批號;儀器重要部件如電極、光源燈被更換;對儀器進行了比較大的維護,如清洗樣本針、試劑針、比色杯等[1]。值得注意的是,當(dāng)某個生化項目被校準(zhǔn)后,即使上述情況均未發(fā)生,由于試劑有效成分的穩(wěn)定性較差、試劑中某些成分與空氣發(fā)生化學(xué)反應(yīng)、試劑揮發(fā)導(dǎo)致有效成分濃縮等因素的存在[2],有必要對該項目進行再次校準(zhǔn),從而保證檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。由于不同項目的試劑成分各不相同,因此不同項目亦各有其獨自的校準(zhǔn)周期,本研究即旨在建立本科室自建檢測系統(tǒng)24個生化項目的校準(zhǔn)周期,現(xiàn)報道如下。
1.1 儀器及試劑 (1)儀器:日本東芝公司生產(chǎn)的TBA-120FR全自動生化分析儀。(2)試劑:電解質(zhì)項目Na+、K+、Cl-等3個項目的稀釋液、參比液均由日本東芝公司生產(chǎn),其余21個項目的試劑均由上海執(zhí)誠生物科技股份有限公司生產(chǎn),在本研究過程中,需保證所有試劑的批號維持不變。(3)校準(zhǔn)品:所有校準(zhǔn)品均由英國朗道實驗診斷有限公司生產(chǎn)。(4)質(zhì)控品:所有項目質(zhì)控品均由英國朗道實驗診斷有限公司生產(chǎn),由于試驗過程中需要使用低值濃度水平的質(zhì)控品,因此TP、ALB、Pche等3個項目采用異常值質(zhì)控品,批號為498UN,其余21個項目采用正常值質(zhì)控品,批號為790UN。
1.2 各項目測定方法 TP、ALB測定分別采用雙縮脲法、BCG法,TBIL、DBIL測定均采用釩酸鹽氧化法,ALT、AST、ALP、GGT、Pche、CK、LDH、HBDH 測定均采用速率法,UA、Cr、BUN、GLU、TG、TC、Ca2+、Mg2+、P3-測定分別采用尿酸酶-過氧化物酶偶聯(lián)法、肌氨酸氧化酶法、酶偶聯(lián)速率法、GOD法、GPOPAP法、COD-PAP法,Ca(甲基麝香草酚藍比色法)、Mg(染料比色法)、P(紫外分光光度法),K+、Na+、Cl-測定采用電極法。
1.3 校準(zhǔn)周期判斷方法 步驟如下:(1)更換研究項目的試劑,對研究項目進行校準(zhǔn)。(2)在距離校準(zhǔn)時間0h、4h、8h、24h測定低值濃度水平質(zhì)控品4次,此后每24h測定1次,連續(xù)測定至第30d。(3)在研究過程中,定期對儀器進行保養(yǎng),同時監(jiān)測實驗用水、實驗室溫度及濕度,并保證上述指標(biāo)符合實驗室相關(guān)要求。(4)剔除離群點,本研究以13s、R4s作為離群點的判斷標(biāo)準(zhǔn)。(5)當(dāng)TEa以相對數(shù)表示時,計算第n天以及此前所有質(zhì)控結(jié)果的CCVn(n的取值范圍為1~30);當(dāng)TEa以絕對數(shù)表示時,計算第n天所有質(zhì)控結(jié)果均值與第1天所有質(zhì)控結(jié)果均值之差QCn-QC1(n的取值范圍為2~30)。(5)以1/6TEa作為校準(zhǔn)周期的判斷閾值[3,4],當(dāng)某項目第n天的CCVn或QCn-QC1超過其判斷閾值時,該項目的校準(zhǔn)周期即為(n-1)天。
TP、ALB、TBIL、DBIL、ALT、AST、ALP、GGT、Pche、UA、Cr、CK、HBDH、GLU、TG、K+、Cl-、Mg、P 的校準(zhǔn)周期≥30d,Na+、TC、Ca、LDH、BUN 的校準(zhǔn)周期分別為 12d、9d、7d、7d、1d,結(jié)果見表 1。
表1 本科室自建檢測系統(tǒng)不同項目的校準(zhǔn)周期
建立合適的校準(zhǔn)方案是保證實驗室檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的重要前提,這項工作包括選擇合適的校準(zhǔn)品、確定適宜的校準(zhǔn)周期等兩個方面[5,6],前者要求校準(zhǔn)品應(yīng)盡可能溯源至參考物質(zhì)和(或)參考方法,而后者則要求根據(jù)檢測項目的原理、試劑、TEa等因素確定其獨自的校準(zhǔn)周期。
在本研究中,我們確定各項目校準(zhǔn)周期的方法已經(jīng)在國內(nèi)得到了廣泛應(yīng)用[3,4,7],但是在選擇實驗樣本方面,本研究有著其獨自的特點。由于質(zhì)控品濃度越高,試驗得到的CCVn或QCn-QC1就越小,故選擇高值質(zhì)控血清作為實驗樣本得到的校準(zhǔn)周期極有可能假性偏高,因此本研究只需選擇一個低值濃度水平質(zhì)控品作為實驗樣本即可。值得注意的是,TP、ALB、Pche等3個項目異常值質(zhì)控品的濃度水平低于正常值質(zhì)控品,而其他21個項目正常值質(zhì)控品的濃度水平低于異常值質(zhì)控品,因此本研究選擇異常值質(zhì)控品用于TP、ALB、Pche校準(zhǔn)周期的研究,而選擇正常值質(zhì)控品用于其他21個項目校準(zhǔn)周期的研究。此外,在本研究過程中,我們還對試驗數(shù)據(jù)進行了離群點檢查,離群點判斷標(biāo)準(zhǔn)主要是13s、R4s這兩個質(zhì)控規(guī)則,因為這兩個規(guī)則檢測偶然誤差的靈敏度較高,如果偶然誤差數(shù)據(jù)保留在整個數(shù)據(jù)中,那么該項目的CCVn或QCn-QC1易得到大幅度提高,得到校準(zhǔn)周期假性偏低。當(dāng)偶然誤差數(shù)據(jù)被剔除以后,當(dāng)CCVn或QCn-QC1超過判斷閾值時即判斷校準(zhǔn)周期的結(jié)束。
由本研究結(jié)果可知,本科室電解質(zhì)項目的校準(zhǔn)周期顯著長于其他文獻[3~5]報道,這可能是由于我們在進行本研究之前更換了新電極所致。此外,本研究結(jié)果還顯示我科BUN該項目的校準(zhǔn)周期較短,這主要是由試劑的穩(wěn)定性所決定。BUN試劑穩(wěn)定性差的原因是由于BUN試劑中存在NADH,該成分易被氧化,導(dǎo)致吸光度下降,且目前尚無好的方法以維持BUN試劑中的NADH的穩(wěn)定性[8]。從本研究結(jié)果與其他文獻報道的結(jié)果可知,不同文獻報道之間生化項目的校準(zhǔn)周期存在一定的區(qū)別,為保證臨床實驗室檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,有必要建立自己實驗室的校準(zhǔn)周期。
[1]周琦,謝偉,徐建平.全自動生化分析儀檢測血糖的校準(zhǔn)驗證[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2012,35(4):317-321.
[2]馮強.血清酶類項目在日立7180生化分析儀的校準(zhǔn)應(yīng)用[J].實用醫(yī)技雜志,2009,16(9):741-742.
[3]邰文靜.利用校準(zhǔn)周期圖建立日立7600生化儀檢測系統(tǒng)校準(zhǔn)周期[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2011,8(21):2571-2572.
[4]羅富銀,宋宗琴.全自動生化分析儀生化檢測項目校準(zhǔn)周期的建立[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2010,7(14):1471-1472.
[5]李劍珉,顏簫,李南華,等.Sysmex KX-21血液分析系統(tǒng)校準(zhǔn)周期的建立及其應(yīng)用[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2010,28(6):565-566.
[6]陳唐勇,章登珊,萬臘根.生化儀檢測系統(tǒng)精密度的評估方法與結(jié)果分析[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2009,27(5):461-462.
[7]鄢斌.生物化學(xué)常規(guī)項目校準(zhǔn)時限周期的探討[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2008,5(8):469-470.
[8]Berent AC,Murakami T,Scroggin RD.Reliability of using reagent test strips to estimate blood urea nitrogen concentration in dogs and cats[J].J Am Vet Med Assoc,2005,227(8):1253-1256.