三葉木通的研究進(jìn)展

吳永朋，原雅玲，肖婭萍

（1.西安植物園，西安 710061；2.陜西師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，西安 710062）

三葉木通（Akebia trifoliate （Thunb.）Koidz）。俗名八月瓜、八月扎、炸瓜。落葉木質(zhì)藤本。莖皮灰褐色，有稀疏的皮孔及小疣點(diǎn)。掌狀復(fù)葉互生或在短枝上蔟生；紙質(zhì)或薄紙質(zhì)，卵形至闊卵形，邊緣具波狀齒或淺裂?？偁罨ㄐ蜃远讨Υ厣~中抽出，下部有紫褐色的雌花，上部有淡紫色的雄花。果長(zhǎng)圓形，直或稍彎，成熟時(shí)灰白略帶淡紫色；種子多數(shù)，扁卵形，種皮紅褐色或黑褐色［1］。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，三葉木通根、莖、葉、花、果具有多種用途，可食用、藥用、加工、觀賞，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和開(kāi)發(fā)價(jià)值。在藥用方面，三葉木通的根、莖有清熱利尿、通經(jīng)活絡(luò)、止血止帶作用；果實(shí)、果皮有疏肝補(bǔ)腎及理氣止痛的功效，中藥上配伍很廣，能治療很多疾病。三葉木通其莖蔓柔軟多姿，花紫紅色，花期長(zhǎng)達(dá)2個(gè)月之久，具有很好的觀賞和園林應(yīng)用價(jià)值。近年來(lái)國(guó)內(nèi)學(xué)者做了一些有關(guān)三葉木通研究，研究主要集中在藥用植物生態(tài)、扦插栽培、藥用成分和指紋圖譜研究方面。本文對(duì)以上研究方面做出綜述并對(duì)其發(fā)展方向提出了建議。

1 三葉木通的藥用植物生態(tài)學(xué)研究

藥用植物生態(tài)學(xué)是利用植物生態(tài)學(xué)的原理和方法，研究藥用植物的分布、產(chǎn)量、品質(zhì)與生態(tài)環(huán)境之間的關(guān)系，為提高藥用植物的產(chǎn)量和品質(zhì)提供理論依據(jù)。三葉木通生態(tài)學(xué)研究，多集中在其分布與生態(tài)因子、產(chǎn)量和生態(tài)因子的關(guān)系，三葉木通的品質(zhì)與生態(tài)因子的研究較少。李秀華等［2］對(duì)全國(guó)73份三葉木通種質(zhì)資源，進(jìn)行了研究，描述果實(shí)的各指標(biāo)變異幅度最大，各種質(zhì)間果實(shí)差異較大。主成分分析把16種形態(tài)學(xué)指標(biāo)歸結(jié)為果實(shí)因子、葉片因子、種子因子、果肉因子等4個(gè)主成分。聚類分析把全國(guó)的73 份種質(zhì)資源分為5大類。熊大勝等［3］進(jìn)行了三葉木通莖藤生長(zhǎng)性狀地理變異研究，結(jié)果表明：三葉木通地理變異的基本模式是以海拔垂直梯度變異為主，緯向漸變?yōu)檩o；溫度和光照差異，水熱因子的綜合選擇作用是三葉木通莖藤生長(zhǎng)性狀地理變異的重要原因，其中溫度和光照是主導(dǎo)因子。海拔和坡度也決定三葉木通群落的分布。謝嬌等［4］應(yīng)用聚類和PCA排序研究了陜西鎮(zhèn)安野生三葉木通群落的特征及與環(huán)境之間的關(guān)系，決定三葉木通群落分布格局的主要因子為海拔和坡度。熊大勝等［5］對(duì)湖南11個(gè)地區(qū)的三葉木通的5 個(gè)莖藤生長(zhǎng)性狀與5個(gè)氣候因子進(jìn)行了相關(guān)分析，溫度是影響三葉木通莖藤生長(zhǎng)的第一要素，月平均相對(duì)濕度和月日照是影響三葉木通莖藤生長(zhǎng)的第二要素。三葉木通分布、產(chǎn)量、品質(zhì)受生態(tài)因子的影響。未來(lái)應(yīng)開(kāi)展三葉木通品質(zhì)與生態(tài)因子的關(guān)系研究，為闡明三葉木通道地性奠定基礎(chǔ)。

2 三葉木通的繁殖栽培技術(shù)研究

2002年，關(guān)木通被國(guó)家禁用，三葉木通需求加大，人們采取掠奪性的采集，使得三葉木通野生資源逐年減少，市場(chǎng)供不應(yīng)求。因而對(duì)其扦插栽培技術(shù)研究具有重要意義。三葉木通的繁殖方法分為播種繁殖和扦插繁殖。

2.1.1 種子繁殖 三葉木通種子發(fā)芽率低，種皮內(nèi)油脂、天然膠及蠟質(zhì)化程度較高，用10%的茶葉、草木灰液浸種能提高種子發(fā)芽率［6］。據(jù)筆者觀察，野外很少有三葉木通小苗生長(zhǎng)，說(shuō)明三葉木通的野外繁殖方式不是靠種子繁殖。筆者于2009年9月對(duì)采回的新鮮三葉木通種子進(jìn)行沙藏發(fā)芽試驗(yàn)，沙藏后發(fā)芽率最高。反復(fù)搓洗的種子的發(fā)芽率明顯高于未搓洗的。未來(lái)可以從沙藏發(fā)芽的方面進(jìn)行研究，研究沙藏濕度和深度對(duì)種子發(fā)芽率的影響，篩選出最佳發(fā)芽條件。

2.1.2 扦插繁殖技術(shù) 田定科［7］研究了三葉木通的扦插，剪取30cm 帶有5～7 個(gè)芽的健壯枝條，再把枝條的兩端插入土中，中間部分暴露在地表，插后20d即可發(fā)芽。史敏華［8］選1年生和2年生健壯無(wú)病蟲(chóng)植株的中上部枝蔓作插穗。從節(jié)下1cm 處斜剪成馬蹄形，下端斜插，入土深度為穗長(zhǎng)的2／3，留1／3露出土面。扦插后約25d開(kāi)始生根。田大清等［9］進(jìn)行了三葉木通扦插育苗技術(shù)，成活率達(dá)到90%。冬季采集插條濕沙貯藏成活率明顯高于其它時(shí)間所采集的插條；中齡（3～4年生）插條的成活率最高，其中ABT（2 號(hào)）處理成活率最高；并以直徑5～8mm 的插條成活率最高；60%遮光度有利于扦插條的生根生長(zhǎng)［10］。楊青珍等［11］研究了外源激素及濃度、插穗部位對(duì)三葉木通硬枝扦插生根的影響。結(jié)果表明：三葉木通屬于皮部生根兼有愈傷組織生根的綜合生根類型；不同濃度的外源激素均能促進(jìn)插穗生根，以200mg／L ABT1處理效果最好。筆者于2009年7月底進(jìn)行了三葉木通的扦插，剪去1～3年生的帶三個(gè)節(jié)的枝條，枝條扦插在沙子里，1個(gè)月左右生根，成活率為50%。為了提高扦插效率，應(yīng)根據(jù)各地的實(shí)際，選擇不同的扦插方法。

2.2 栽培技術(shù)

熊大勝等［12］進(jìn)行了木通屬栽培技術(shù)和修剪技術(shù)比較研究，和五葉木通相比較，三葉木通不耐高密度栽培。曹嵐等［13］研究表明不同肥料對(duì)春梢生長(zhǎng)促進(jìn)效應(yīng)依次為鉀肥＞氮肥＞有機(jī)肥＞磷肥。田定科等［14］進(jìn)行了三葉木通的人工栽培，當(dāng)八月瓜樹(shù)藤長(zhǎng)達(dá)2.5m，分枝數(shù)10個(gè)以上時(shí)開(kāi)始掛果，每單株掛果可達(dá)30～80個(gè)，單果重70～90 g，產(chǎn)量可達(dá)7 500kg／hm2。羅克明等［15］對(duì)野生三葉木通進(jìn)行了人工馴化栽培，在人工栽培條件下最大單果重313.5g、最小97.7g。三葉木通的栽培技術(shù)研究主要是栽培密度、促進(jìn)春梢生長(zhǎng)、掛果時(shí)間、果實(shí)重量的研究。人工栽培條件下對(duì)三葉木通的有效成分和果實(shí)品質(zhì)的影響研究未見(jiàn)報(bào)道。

3 三葉木通的藥用成分和微量元素研究

3.1 三葉木通的藥用成分研究

三葉木通主要藥用其藤莖部位，但果實(shí)、種子、根以及葉片也都有藥用功效。國(guó)內(nèi)外學(xué)者已從木通屬植物中分離得到30多種皂苷類成分，王曄等［16］首次從三葉木通的藤莖中分離得到10個(gè)糖苷類化合物，其中3種首次在木通屬中發(fā)現(xiàn)；武曙紅等［17］測(cè)定了三葉木通的化學(xué)成分及含量，三葉木通的根莖含多種木通皂甙（Akbosideo），其甙元是常春藤甙元（Hederagenin，C30H48O4）或齊墩果酸（Oleanolic acid，C30H48O4），還含多量鉀鹽。葉含槲皮素咖啡酸對(duì)香豆酸（P－Cumaric acid）齊墩果酸和山柰醇Kaempferol）。種子含脂肪油，主要為油酸、亞油酸、棕櫚酸、并含少量醋酸。彭滌非等［18］研究了不同部位三葉木通的果實(shí)乙醇提取物對(duì)體外酪氨酸酶活性均有一定的抑制作用，其中果肉的抑制作用最佳。張孟琴等［19］探討三葉木通果皮果膠的抑菌和殺菌性能，結(jié)果表明三葉木通果皮果膠沒(méi)有抑菌及殺菌的作用，因此推測(cè)，可能是由于化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)差異導(dǎo)致了提取果膠的抑菌與殺菌效果不同。張孟琴等［20］做了酸解法從三葉木通果皮中提取果膠的研究，酸解法提取果膠的最佳工藝參數(shù)。左堅(jiān)等［21］采用紫外掃描法和聚類分析法分析了關(guān)木通、川木通、五葉木通、三葉木通和市售品種（6種），紫外譜線組法和改良后的聚類分析法可以快速鑒別和區(qū)分不同類型的木通品種。張錚等［22］用高效液相色譜法測(cè)定三葉木通各部位中有效成分齊墩果酸和常春藤皂苷元的含量：（1）常春藤皂苷元的平均含量：果皮＞種子＞莖＞葉＞根，齊墩果酸平均含量：根＞多年生莖＞葉＞果皮＞種子＞1年生莖；（2）三葉木通葉含有與藤莖相同的藥用成分，而且含量?jī)H次于莖，因此葉可作為三葉木通藥用資源開(kāi)發(fā)的一個(gè)新部位。李香等［23］確定三葉木通總黃酮的最佳水浴提取工藝條件，根中黃酮的提取效率較高。總黃酮含量為6.01%；平均回收率為99.66%。成曉霞等［24］測(cè)定了三葉木通中常春藤皂苷的最佳提取工藝條件：甲醇溶液80ml超聲提取90min，水飽和正丁醇萃取3次，36%鹽酸4ml，70℃水浴回流水水解4h，氯仿萃取2次，合并氯仿層，旋轉(zhuǎn)蒸干后甲醇溶解定容。

3.2 三葉木通微量元素研究

中藥材中含有豐富的人體必需微量元素，研究表明，中藥對(duì)于治療微量元素缺乏癥有很好的臨床價(jià)值，開(kāi)展三葉木通的微量元素研究具有重要意義。曹嵐［25］采用火焰原子吸收光譜法檢測(cè)了江西野生三葉木通和栽培三葉木通藥材中微量元素的組成及含量，野生與栽培的三葉木通均含有8種元素，三葉木通對(duì)Ca有明顯的富集能力。田定科［26］測(cè)量了三葉木通果實(shí)的經(jīng)濟(jì)性狀、營(yíng)養(yǎng)成分和微量元素，單果重一般為90g左右，高的可達(dá)150g；果肉包含果瓤和種子兩部分，食用果肉大約占20%～25%；果肉中可溶性糖含量為9.02%，有機(jī)酸含量為2.5%，并含有豐富的蛋白質(zhì)及微量元素等。對(duì)三葉木通的微量元素研究為三葉木通的藥效提供了有力的佐證。

3.3 三葉木通果實(shí)營(yíng)養(yǎng)成分研究

三葉木通是一種野生果樹(shù)，果實(shí)風(fēng)味獨(dú)特，鮮食味美香甜，果肉含多種營(yíng)養(yǎng)成分，并具有良好的醫(yī)療保健、抗癌、理氣散寒、舒筋活絡(luò)、安胎、除風(fēng)濕及疏肝等多種藥效和作用。高黎明等［27］從八月扎中分離了13個(gè)化合物，分別為1－monostearin（1），2－monoolein（2），1－monoolein（3），棕櫚酸（4）等。謝小霞等［28］以超臨界CO2萃取技術(shù)從三葉木通種子中萃取脂肪油，確定了最佳萃取工藝條件。李金光等［29］報(bào)道了成熟果實(shí)富含礦物質(zhì)，可溶性糖主要是果糖，有機(jī)酸主要是乳酸，蛋白質(zhì)氨基酸主要是谷氨酸、天門(mén)冬氨酸、賴氨酸和亮氨酸。脂肪酸主要是油酸和亞油酸，種子脂肪酸主要是油酸。萬(wàn)明長(zhǎng)等［30］研究了三葉木通栽培條件下果實(shí)性狀及營(yíng)養(yǎng)成分分析，測(cè)出果實(shí)的15種氨基酸平均總量達(dá)1 415.6 mg／100g。含有人體必需的8 種氨基酸，含量為921.0 mg／100g，占總氨基酸的65.06%，經(jīng)過(guò)人工栽培果實(shí)品質(zhì)有了較大的提高。三葉木通雖然營(yíng)養(yǎng)豐富，但是果實(shí)具有可食率低、容易炸開(kāi)等缺點(diǎn)。未來(lái)可以開(kāi)發(fā)可食率高、果實(shí)不容易炸開(kāi)的保健水果。日本的國(guó)華園公司通過(guò)篩選，已經(jīng)把野生三葉木通，開(kāi)發(fā)成水果了，并在超市銷售。

4 三葉木通指紋圖譜研究

關(guān)木通用藥標(biāo)準(zhǔn)被取消后，三葉木通作為藥材已在市場(chǎng)上逐漸恢復(fù)使用。因此，建立木通藥材有效的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法，對(duì)不同產(chǎn)地三葉木通的質(zhì)量進(jìn)行全面而系統(tǒng)的研究，確保其質(zhì)量的穩(wěn)定，直接關(guān)系到木通相關(guān)藥品和臨床處方的療效。近年來(lái)，指紋圖譜技術(shù)被用于中藥的質(zhì)量控制，其優(yōu)點(diǎn)在于可全面反映中藥復(fù)雜的化學(xué)成分及其相對(duì)比例，在大多數(shù)中藥有效成分尚未闡明的情況下，仍可有效地表征中藥質(zhì)量。梁永紅［31］首次對(duì)三葉木通進(jìn)行了指紋圖譜的初步研究，建立了HPLC－UV 指紋圖譜，標(biāo)定了14 個(gè)共有峰，指認(rèn)了一個(gè)化合物。劉衛(wèi)國(guó)等［32］應(yīng)用反相高效液相色譜（RPHPLC）建立了三葉木通指紋圖譜，方法Hypersil ODS 柱，H2O 與CH4梯度洗脫，流速1ml／min，柱溫20 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)215nm。結(jié)果建立了HPLC指紋圖譜共有模式，并應(yīng)用此共有模式對(duì)五葉木通和川木通進(jìn)行了相似度比較。

5 建議

三葉木通一般每667 m2產(chǎn)鮮果1 500～2 000kg，目前鮮果市場(chǎng)價(jià)高達(dá)8～10元每公斤。開(kāi)發(fā)三葉木通具有很大的經(jīng)濟(jì)效益。近年來(lái)，人們采取掠奪性的采集，使得三葉木通資源逐年減少，市場(chǎng)供不應(yīng)求。為此，一方面保護(hù)野生資源，另一方面，發(fā)揮科技優(yōu)勢(shì)，加大資金投入采用先進(jìn)的科學(xué)手段和技術(shù)，實(shí)施優(yōu)良品種選育，苗木培育繁殖。進(jìn)行規(guī)?；耘?，已成為三葉木通開(kāi)發(fā)利用，滿足市場(chǎng)需求的重要任務(wù)。針對(duì)目前三葉木通中存在的問(wèn)題，提出以下建議：

中藥材的藥效成分通常都是次生代謝產(chǎn)生的小分子化合物，不少研究證實(shí)了逆境會(huì)促進(jìn)這類植物次生代謝產(chǎn)物的增加。設(shè)定環(huán)境脅迫（如營(yíng)養(yǎng)匱乏、毒害、低溫、干旱、CO2濃度升高等），研究環(huán)境脅迫和三葉木通有效成分之間的關(guān)系；加強(qiáng)三葉木通的生態(tài)群落研究，包括種群數(shù)量的時(shí)空動(dòng)態(tài)、數(shù)量調(diào)節(jié)、生活史對(duì)策、種內(nèi)與種間關(guān)系。為持久地利用野生三葉木通提供理論支持；由于人工規(guī)模化栽培藥材，藥材的性狀和質(zhì)量明顯改變，所以加大三葉木通的野生撫育研究是解決藥源短缺的真正途徑。

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