犢牦牛腐敗梭菌病診斷

張西云，李生慶，胡國(guó)元

（青海省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院獸醫(yī)研究所，青海 西寧 810006）

1 發(fā)病情況

本病呈散發(fā)?；寂I(yíng)養(yǎng)不良，30多頭牛中有18頭出現(xiàn)咳嗽癥狀，6頭出現(xiàn)腹瀉癥狀?；寂？人猿跗?，用青、鏈霉素治療，6頭好轉(zhuǎn)，另12頭仍有咳嗽癥狀，并死亡2頭。

2 癥狀及剖檢變化

病牛精神萎頓，食欲不振，咳嗽，體溫達(dá)40～41℃。剖檢見(jiàn)咽喉部和氣管周?chē)械S色的水腫液，氣管黏膜充血，心包內(nèi)有滲出液，肺氣腫，大面積瘀血，小葉邊緣呈黑色，表面呈灰白色或白色，部分組織充血，肺門(mén)淋巴結(jié)形態(tài)、色澤、質(zhì)地?zé)o變化，其他器官無(wú)眼觀變化。

3 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)

3.1 臟器觸片 無(wú)菌取病死牛肝、脾、肺觸片，瑞特氏染色，鏡檢，結(jié)果見(jiàn)粗大桿菌和雙球菌。

3.2 臟器培養(yǎng) 無(wú)菌取病死牛肝、脾、肺接種于鮮血斜面和厭氣肝湯中，37℃培養(yǎng)24h，結(jié)果鮮血斜面和厭氣肝湯培養(yǎng)基中均有細(xì)菌生長(zhǎng)。對(duì)培養(yǎng)物進(jìn)行抹片，沙黃染色，鏡檢，結(jié)果見(jiàn)鮮血斜面培養(yǎng)物以雙球菌為主，厭氣肝湯培養(yǎng)物以大桿菌為主。鮮血斜面培養(yǎng)物經(jīng)劃平板接種得到雙球菌，厭氣肝湯培養(yǎng)物經(jīng)加熱得到梭狀芽孢桿菌。

3.3 動(dòng)物接種 無(wú)菌取病死牛肺臟剪碎、研磨，按1∶5加入無(wú)菌生理鹽水混勻后靜置，取靜置后的上清液，以0.2 mL/只的量，皮下注射于2只小白鼠，結(jié)果，2只小白鼠分別于注后15h、17h死亡。剖檢小鼠，其皮下充血，有膠凍樣滲出，腹腔滲出物較多，消化道漿膜充血，肝、脾、腎腫脹，心、肺無(wú)眼觀變化。肝被膜觸片，染色，鏡檢，見(jiàn)長(zhǎng)絲狀、短鏈狀或單個(gè)存在的大桿菌。接種小白鼠肝臟于厭氣肝湯后鏡檢，見(jiàn)與病死牛臟器鏡檢相同的結(jié)果，厭氣肝湯培養(yǎng)物培養(yǎng)至48 h開(kāi)始形成芽孢，芽孢呈檸檬狀，培養(yǎng)至72h，幾乎全部形成芽孢體。

3.4 動(dòng)物試驗(yàn) 分別將雙球菌和大桿菌接種于普通肉湯和厭氣肝湯中，37℃培養(yǎng)24h。

將雙球菌培養(yǎng)物分別以0.2～0.4 mL/只的量皮下注射于2只小白鼠，結(jié)果，2只小白鼠一周后仍健活。

將大桿菌培養(yǎng)物原液以0.2 mL/只的量皮下注射于2只小白鼠后，觀察其發(fā)病死亡情況，同時(shí)將該培養(yǎng)物用生理鹽水稀釋后，在毒力范圍內(nèi)皮下注射于小白鼠，并測(cè)定最小致死劑量。結(jié)果，注射原液的小白鼠在注射后12h左右死亡，同時(shí)測(cè)得該菌的最小致死劑量為500MLD/mL。剖檢死亡小白鼠，其皮下及腹腔病變與前述接種小白鼠相同。

4 診斷

臨床癥狀和實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果表明犢牦牛死亡是由腐敗梭菌引起的。

5 小結(jié)

5.1 腐敗梭菌為土壤常在菌，氣溫多變、多雨潮濕季節(jié)及轉(zhuǎn)群造成犢牦牛體質(zhì)下降時(shí)，其可引起發(fā)病。適時(shí)接種疫苗，尤其在牦牛轉(zhuǎn)群或進(jìn)入換季草場(chǎng)前進(jìn)行加強(qiáng)免疫是預(yù)防本病的有效方法。

5.2 病牛死亡后應(yīng)及時(shí)采取病料送檢，因?yàn)楦瘮∷缶４嬖谟趧?dòng)物消化道內(nèi)，其可在動(dòng)物死后的數(shù)小時(shí)內(nèi)大量繁殖并進(jìn)入臟器，若不及時(shí)送檢則可造成誤診從死亡動(dòng)物臟器分離到的腐敗梭菌必須通過(guò)接種試驗(yàn)才能確定其致病性。

5.3 腐敗梭菌培養(yǎng)物離心上清液皮下和靜脈注射小白鼠時(shí)毒力較弱，表明其代謝產(chǎn)物中的抗原成分較少，故只有采用菌液制備滅活菌苗進(jìn)行免疫才能保證免疫效果。