探討酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）診斷梅毒螺旋體（TP）感染中的臨床應用

王娟娟 朱 坤

（1.山東省萊蕪中心血站 山東 萊蕪 271100；2.山東省萊蕪市衛(wèi)生職工中等專業(yè)學校 山東 萊蕪 271100）

血清學檢測是診斷梅毒的常用實驗室檢測方法［1］。其特異性較差，常用于大樣本的初步篩選。本文采用ELISA方法對我院2010年1月至2012年9月就診的梅毒患者68例進行檢測，，探討其在TP感染診斷中臨床應用價值，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：我院2010年1月至2012年9月性病?？平涍^臨床診斷和血清學檢測診斷梅毒患者68例，其中Ⅰ期10例、Ⅱ期50例、Ⅲ期6例、潛伏期2例。同期內，我院接收自身免疫性疾病患者30例，均采用臨床診斷和自身血清抗體檢測，排除了梅毒陽性患者。

1.2 血清樣本采集：采集梅毒患者68例和自身免疫性疾病患者30例的靜脈血清樣本6ml，冷藏備用。

1.3 儀器與試劑：奧地利TECAN生產的全自動酶標儀、美國BIO-RAD洗板機、恒溫水浴箱、上海榮盛生物技術有限公司的TRUST試劑盒（批號20100907）、廣州中山生物公司的ELISA試劑盒（批號20100713）、日本富士會社TPPA試劑盒（批號20101006）。

1.4 檢測方法：采用TRUST和ELISA試劑分別檢測研究對象血清樣本，具體操作步驟嚴格按照試劑盒說明書要求進行檢測。

1.5 統(tǒng)計學處理：采用SPSS18.0統(tǒng)計軟件進行分析。

2 結果

血清TRUST、ELISA、TPPA檢測結果TRUST試驗檢測陽性50例、陰性48例，其中潛伏期2例、Ⅰ期梅毒2例、Ⅱ期梅毒4例，以及已經治愈的患者10檢測結果均是陰性。TRUST假陽性率、假陰性率分別為16.67%（5／30）、26.47%（18／68）。與TPPA檢測結果比較，TRUST假陽性率、假陰性率與TPPA有明顯差異（χ2＝6.37，P＜0.05）。TP-ELISA試驗檢測陽性68例、陰性30例，TP-ELISA的假陽性率、假陰性率均為0。TPELISA與TPPA檢測結果完全一致，無假陽性和假陰性結果。TP-ELISA方法檢測的假陽性率和假陰性率分別顯著性低于TRUST（χ2＝7.19，P＜0.05）。見表1、表2。

3 討論

梅毒是一種受到TP感染的傳播性疾病，在臨床備血、產前檢查時對血清中TP的檢測意義很大，提高TP正確診斷率是有效防止疾病傳播的主要手段之一。TPPA減少了TPHA出現(xiàn)的假陽性和假陰性現(xiàn)象，檢測結果更準確可靠，且特異性強，操作方便，但是價格較昂貴，不適合大樣本及療效觀察應用。

表1 TRUST、TP-ELISA方法與TPPA的一致性（例數(shù)）

表2 TRUST、TP-ELISA方法的假陽性率和假陰性率

Zrein等在1995年合成了TpN47和TpN15，將其用于梅毒檢測，發(fā)現(xiàn)ELISA方法的正確診斷率是99.8%，敏感性99.9%［2］。人體受到TP感染后4周～8周在血清中才能檢測到一定數(shù)量的抗體［3］，特異性抗體較非特異性抗體早出現(xiàn)。本研究中發(fā)現(xiàn)，TRUST的假陽性率、假陰性率分別為16.67%（5／30）、26.47%（18／68）。表明 TRUST用于梅毒螺旋體感染的初步篩查也不適用。TP-ELISA方法采用酶聯(lián)免疫吸附技術檢測血清中存在的特異性抗體，可以作為梅毒螺旋體感染的單一篩選方法。本研究中發(fā)現(xiàn)，TP-ELISA試驗檢測陽性68例、陰性30例，TP-ELISA的假陽性率、假陰性率均為0。

有文獻報道［4］，在孵育過程中適當振蕩可以消除溝狀效應。TP-ELISA方法利用了基因重組工程合成抗原，檢測血清中特異性抗體，特異性強、靈敏度高，與TPPA檢測結果保持一致。TP-ELISA方法檢測結果可靠，可以作為篩選和確認梅毒的首選方法，值得臨床推廣應用。

［1］馬聰，王芳，徐武夷.梅毒螺旋體實驗室檢測技術的研究進展［J］.中華醫(yī)院感染學雜志，2002，12（12）：958-950

［2］叢憲玲，姜日花 ，朱明姬，等.580例梅毒患者實驗室檢測結果分析［J］.中國實驗診斷學，2003，7（3）：264-265

［3］Castro R，Prieto ES，Santo I，et al.Evaluation of an enzyme immunoassay technique for detection of antibodies against Treponema pallidum［J］.J ClinMicrobiol，2003，41（1）：250-253

［4］楊建蘭，郎亦波.不同血清學診斷方法檢測梅毒螺旋體的結果分析［J］.臨床研究雜志，2009，8（5）：90-91