異丙腎上腺素防治失神經(jīng)骨骼肌萎縮機(jī)制的分析

劉磊

陜西省西安市西咸新區(qū)世紀(jì)大道陜西中醫(yī)學(xué)院 712046

在最近幾年中，研究防治失神經(jīng)肌萎縮機(jī)制的學(xué)者越來越 多，已經(jīng)成為一個(gè)熱點(diǎn)問題。有學(xué)者表明，異丙腎上腺素在防治失神經(jīng)骨骼肌萎縮病癥方面效果較好，為了進(jìn)一步證實(shí)它的效果，現(xiàn)選取雄性成年wista大鼠60只作為研究的對象，具體研究情況如下。

資料與方法

一般資料:本組資料共計(jì)60例，均為雄性成年wista大鼠，體重180±10g，隨機(jī)分成觀察組30只(失神經(jīng)型)和對照組30只(藥物型)。試劑:ECL化學(xué)發(fā)光試劑、C4單抗(B－Actin)、MuRF 1(H－145)多抗、蛋白提取試劑、蛋白marker和DNA、Trizol試劑、單抗RT－PCR試劑盒、NF－JB P65(F－6)，將辣根酶標(biāo)記為山羊抗兔二抗。藥物:異丙腎上腺素。

方法:對兩組wista大鼠進(jìn)行麻醉，而后將其雙側(cè)的坐骨神經(jīng)暴露，在左側(cè)進(jìn)行假手術(shù)，將右側(cè)的坐骨神經(jīng)斷離，長度為1cm，將組織與近端縫合，隨之做成右下肢失神經(jīng)骨骼肌萎縮的模型。手術(shù)過后在尚未清醒下將雙側(cè)腓腸肌取下標(biāo)記為0天組，剩下的每組均在術(shù)后0、7、14、28天時(shí)隨機(jī)取出6只鼠，在麻醉后將雙側(cè)腓腸肌分離，依次稱量肌濕重，提取蛋白質(zhì)和RNA。

藥物干預(yù):予以腹腔注射異丙腎上腺素，1天1次，1次5mg/kg。肌濕重測定:雙側(cè)腓腸肌要全部取下，再用電子天平程準(zhǔn)，分別計(jì)算左右兩側(cè)的肌濕重比值。引物設(shè)計(jì):NF－JB P65，上游引物:TC3c GAG AGC GTC GA AGA 5cGACC，下游引物:3c GT CTT GCT ACA GGG AGA 5cTCC，擴(kuò)增長度為176bp;MuRF1上游引物:GA3c GAG CAG GAG CAG ACT 5cATC，下游引物:GG3c GAA GAG ACTCAA 5cCTTGGC，擴(kuò)增長度為150bp;GAPDH上游引物:G3c CTG TCA AGCGGA ACG 5cTGA，下游引物:3c TA CTG TTG CTG ACC 5cTCC，擴(kuò)增長度為 307bp［1］。

統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:數(shù)據(jù)采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用 X2檢驗(yàn)，組間比較采用 t檢驗(yàn)，差異具有顯著性為P ＜0.05。

結(jié) 果

兩組在肌濕重維持率、NF－JB P65、MuRF1等方面相比差異均具有顯著性(P＜0.05)，見表1－表3。

表1 肌濕重維持率

表2 NF－JB P65的表達(dá)變化

表3 MuRF1的表達(dá)變化

討 論

經(jīng)臨床研究證明，失神經(jīng)肌萎縮是因?yàn)槭窠?jīng)后水解和蛋白在合成上失調(diào)所引發(fā)的。骨骼肌萎縮多半是由于禁食、廢用、癥狀等因素引起的。MuRF1能夠有效地表示上調(diào)，如表達(dá)能力較低，那么說明它能夠有效抵抗肌萎縮。MuRF1與肌聯(lián)蛋白有一定的聯(lián)系，如果MuRF1上調(diào)，那么會(huì)給肌聯(lián)蛋白造成影響，然而它還能夠有效地維持肌聯(lián)蛋白的穩(wěn)定性。NF－JB還被稱作核因子JB，它屬于是一種核轉(zhuǎn)錄因子，廣泛存在于機(jī)體的各種細(xì)胞內(nèi)，在調(diào)控多種基因、細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳遞、炎性和免疫反應(yīng)方面效果較好。TNF在癌癥等惡病疾病中，表達(dá)的水平上調(diào)，在與受體結(jié)合后會(huì)激活Rel/NF－KB家族的轉(zhuǎn)錄因子，最終喪失肌肉蛋白，導(dǎo)致肌萎縮［2］。迄今為止，在失神經(jīng)骨骼肌萎縮機(jī)制方面的研究越來越多，也取得了一定的成果，但是并沒有明確的定論。失神經(jīng)骨骼肌萎縮不僅是廢用性萎縮，還是失營養(yǎng)性萎縮，最根本的解決方法就是再次獲得神經(jīng)支配，然而再生神經(jīng)速度慢以及距離長引發(fā)嚴(yán)重的骨骼肌肉萎縮。經(jīng)過臨床研究發(fā)現(xiàn)，異丙腎上腺素在抑制NF－JB/MuRF1通路中成效顯著，能夠達(dá)到防治失神經(jīng)骨骼肌萎縮的目的。

1 侯志儒，梁炳生，梁勇，張文輝.經(jīng)皮電刺激大鼠骨骼肌失神經(jīng)肌萎縮時(shí)成肌調(diào)節(jié)因子基因的表達(dá)［J］.中國組織工程研究與臨床康復(fù)，2009，22(33):121－122.

2 楊斌，李士通.失神經(jīng)后骨骼肌萎縮機(jī)制及治療研究進(jìn)展［J］.實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2009，12(4):91－92.