Smyd1基因選擇性剪接的組蛋白修飾機制調(diào)控應(yīng)力刺激下骨骼肌肥大作用研究進展

王平 漆正堂 丁樹哲

1 杭州師范大學(xué)體育與健康學(xué)院（杭州311121）2 華東師范大學(xué)體育與健康學(xué)院

國內(nèi)外學(xué)者普遍認為，長期反復(fù)抗阻運動能夠?qū)е鹿趋兰》蚀?。成體骨骼肌肥大的特性是肌纖維直徑增加、體積增加，使骨骼肌收縮能力增強，導(dǎo)致骨骼肌質(zhì)量增加，而不是肌纖維數(shù)量的增多［1］。骨骼肌質(zhì)量在維持運動、呼吸和新陳代謝等功能獨立性方面具有舉足輕重的作用，因此，研究抗阻運動與骨骼肌肥大之間潛在的分子機制是非常重要的。已有研究顯示，整個機體功能的最大赤字出現(xiàn)在低到中等范圍的肌肉力量輸出。骨骼肌質(zhì)量的丟失具有閾值，如果超過此閾值，將會導(dǎo)致肌肉萎縮，肌肉功能獨立性衰退甚至喪失，故骨骼肌質(zhì)量發(fā)生微小變化可能對于骨骼肌功能的改變起著決定性作用［2］。因此，研究調(diào)控骨骼肌肥大機制對于長期傷殘患者預(yù)防骨骼肌發(fā)生萎縮至關(guān)重要，同時為治療與骨骼肌萎縮相關(guān)的其他疾病提供有效途徑。

早期階段關(guān)于骨骼肌肥大方面研究發(fā)現(xiàn)，骨骼肌總蛋白含量明顯增加，蛋白質(zhì)合成率也明顯增加，但是總RNA含量并沒有改變。隨后在Carson的研究中發(fā)現(xiàn)，總RNA含量發(fā)生明顯增加，只不過發(fā)生的時間明顯滯后，提示骨骼肌肥大機制中調(diào)控蛋白質(zhì)合成是至關(guān)重要的［3］。由于骨骼肌質(zhì)量變化是持續(xù)的，故我們可以這樣理解，基因翻譯促進了RNA含量的增加。

但最近Kawai等［4］的研究發(fā)現(xiàn)，抗阻運動性骨骼肌肥大過程中肌衛(wèi)星細胞起著關(guān)鍵作用，提示其機制之一與肌衛(wèi)星細胞的激活密切相關(guān)。

肌衛(wèi)星細胞是在出生后的骨骼肌中發(fā)現(xiàn)的，在成體骨骼肌中，肌衛(wèi)星細胞基本處于安靜狀態(tài)，屬于肌源性干細胞［5］。最初，衛(wèi)星細胞是通過電子顯微鏡觀察鑒別出來的，其呈獨特的衛(wèi)星形狀，以楔形位于相鄰成熟肌纖維基底層和肌漿之間［6］。已有研究顯示，在成人肌肉中，衛(wèi)星細胞絕大多數(shù)時間處于新陳代謝休眠期或靜止?fàn)顟B(tài)，但是當(dāng)肌肉受到抗阻運動刺激后，靜息的衛(wèi)星細胞被激活，從延長的G1態(tài)（經(jīng)常被稱為G0）進入細胞周期，進行DNA復(fù)制、增殖、分化，與周圍的肌纖維發(fā)生融合或形成新的肌纖維［7］。通過這個過程，許多肌細胞核聚集在肌纖維中，為蛋白質(zhì)合成的增加提供原料，為骨骼肌肥大核再生提供生物學(xué)基礎(chǔ)。因此，衛(wèi)星細胞的激活（即衛(wèi)星細胞從休止?fàn)顟B(tài)進入G1期和隨后DNA復(fù)制）是肌肉生成的第一步，也是關(guān)鍵的一步，同時為肌肉增長和再生提供了非常重要的依據(jù)［8］。已有研究表明，抗阻運動激活衛(wèi)星細胞，隨后衛(wèi)星細胞發(fā)生如細胞膨脹、細胞數(shù)量增加、細胞核明顯增加等形態(tài)學(xué)改變，最終導(dǎo)致骨骼肌肥大［9］。那么抗阻運動是如何激活衛(wèi)星細胞的呢？已有研究顯示，衛(wèi)星細胞激活過程中受到諸多肌細胞生成基因的調(diào)控，其中Smyd1基因起著核心作用［10］。故通過研究衛(wèi)星細胞激活如何被調(diào)控，將有助于設(shè)計出更好的促進骨骼肌肥大和發(fā)育及康復(fù)的方案，對于提高運動骨骼肌機能和促進肌萎縮的輔助治療等方面具有重要的作用。

1 Smyd1的生物學(xué)特性

1.1 Smyd1的生物學(xué)作用

骨骼肌肥大過程是一個嚴格程序化過程，目前研究表明，衛(wèi)星細胞的激活提供新的肌細胞核，是肌纖維肥大的第一步，也是關(guān)鍵的一步。其具體過程是衛(wèi)星細胞激活、增殖，變?yōu)槌杉〖毎蠓只蔀榧〖毎缓笕诤铣啥嗪思」?，最后形成與肌肉收縮密切相關(guān)的成熟的多核肌纖維［11］。在上述過程中，衛(wèi)星細胞除了提供新的肌細胞核外，還強化肌肉特異性基因的表達。

Smyd1（也稱肌肉特異性BOP基因）是近年來發(fā)現(xiàn)只在骨骼肌和心肌細胞特異表達的蛋白，它包括MYND和SET結(jié)構(gòu)域。其中SET結(jié)構(gòu)域高度保守，約含130個氨基酸，具有組蛋白賴氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶的活性。同其它甲基轉(zhuǎn)移酶相比較，含有保守的SET結(jié)構(gòu)域的組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶具有一個獨特的折疊結(jié)構(gòu)，一系列連續(xù)的β折疊插入3個非連續(xù)的片層中，環(huán)繞圍成一個類似于繩結(jié)的三級結(jié)構(gòu)［12］。如此與眾不同的結(jié)構(gòu)是SET結(jié)構(gòu)域C末端片段插入蛋白末端序列向前延伸圍成的環(huán)狀結(jié)構(gòu)形成的，C末端片狀和環(huán)狀結(jié)構(gòu)包含了SET結(jié)構(gòu)域中最保守的兩個基序，分別是ELXF/YDY和NHS/CXXPN（X代表任意氨基酸）［12］。哺乳動物組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶的SET結(jié)構(gòu)域主要由核心 SET結(jié)構(gòu)域，pre-SET和 post-SET結(jié)構(gòu)域組成，核心SET結(jié)構(gòu)域的側(cè)面與 pre-SET和post-SET結(jié)構(gòu)域相連接，pre-SET結(jié)構(gòu)的主要作用是維持整個蛋白結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性，post-SET結(jié)構(gòu)則提供一個芳香基團形成疏水通道，參與構(gòu)成部分酶活化位點［13］。另外，SET結(jié)構(gòu)域還含有一個稱為iSET的插入結(jié)構(gòu)，特異性識別甲基轉(zhuǎn)移酶的底物和輔助因子［14］，其主要功能是調(diào)節(jié)基因活性，但具體機制尚不清楚。另外，MYND結(jié)構(gòu)域也高度保守，帶有鋅指結(jié)構(gòu)，含有 7個高度保守的半胱氨酸殘基，唯一的組氨酸殘基穿插于其中，此結(jié)構(gòu)與DNA粘合在一起，與組蛋白脫乙酰酶發(fā)生作用。這兩個功能結(jié)構(gòu)域在肌細胞激活、分化、成熟的調(diào)控中起著關(guān)鍵性作用，同時與組蛋白甲基化修飾密切相關(guān)［15］。已有研究在敲除小鼠Smyd1基因后發(fā)現(xiàn)，小鼠心肌的成熟和右心室的形成受到影響，突變小鼠死于胚胎期10.5天［16］。有研究利用Morpholino反義寡核苷酸技術(shù)特異性下調(diào)斑馬魚Smyd1蛋白，結(jié)果發(fā)現(xiàn)胚胎肌纖維發(fā)育不成熟，肌肉收縮障礙［17］。體外分子生物學(xué)實驗證明Smyd1基因具有甲基轉(zhuǎn)移酶活性，催化的H3-K4甲基化，激活靶基因的表達［18］。

1.2 Smyd1基因選擇性剪接

科學(xué)家于2001年宣布完成了人類基因組框架圖后，即注意到一個有趣的事實，人類基因為什么不是原來預(yù)計的8萬到10萬個，而是3萬個左右？而于2004年完成的人類基因組常染色質(zhì)區(qū)測序進一步表明，人類的基因只有2—2.5萬個左右［19］。人類基因組計劃首席科學(xué)家Collins認為，人類基因數(shù)比預(yù)計的要少得多，說明高等生物在使用基因上的簡約性。與過去一個基因編碼一種蛋白的假設(shè)相比，現(xiàn)在是每個基因負責(zé)制造三種蛋白質(zhì)，高等生物不單純靠增加新基因來獲取新功能，還可以通過重新編碼擴充已有的可靠資源達到創(chuàng)新的目的。選擇性剪接的存在正是人類節(jié)約使用基因的最好例證［20］。已知可增加蛋白質(zhì)種類和數(shù)量的方式有DNA重組、RNA編輯和選擇性剪接等，而Pre-mRNA的選擇性剪接是產(chǎn)生如此眾多蛋白質(zhì)的主要機制［20］。實際上，mRNA的選擇性剪接發(fā)生的頻率很高。根據(jù)深層次的測序研究，目前估計，人類基因有90%以上都經(jīng)歷了選擇性剪接［21］。其中70%～88%的選擇性剪接產(chǎn)生了不同的蛋白質(zhì)產(chǎn)物，大多數(shù)都涉及功能的改變，如通過蛋白質(zhì)的氨基端或羧基端，或者增刪了某個功能域而使其功能發(fā)生改變。

選擇性剪接是高等真核細胞在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因表達以及產(chǎn)生蛋白質(zhì)組多樣性的重要機制。傳統(tǒng)意義上認為，選擇性剪接主要受剪接增強子和沉默子的調(diào)控［22］，它們屬于比較保守的RNA序列，大約10 nt的長度，可位于外顯子也可位于內(nèi)含子上，與剪接調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合從而調(diào)控選擇性剪接［23］。而最近研究表明，組蛋白修飾與選擇性剪接有密切關(guān)系。例如，加入組蛋白脫乙酰基酶抑制劑TSA后，可引起纖維結(jié)合蛋白的外顯子33被切除，還有神經(jīng)細胞粘附分子的外顯子18也可被切除［24］。 Andrea 等［25］的研究也發(fā)現(xiàn)，使用組蛋白脫乙?；敢种苿?TSA或 DNA甲基化酶抑制劑 5-5azadC-dC都可以誘導(dǎo)Shc基因的選擇性剪接產(chǎn)物 p66在平時不表達的組織中出現(xiàn)。這些研究說明組蛋白修飾在不同基因的選擇性剪接中起著重要作用。

Tan等［26］研究通過使用不同的引物（RT-PCR分析）證實Smyd1基因存在選擇性剪接，其選擇性剪接產(chǎn)物是Smyd1a和Smyd1b（Smyd1-△Exon5）。 Smyd1a為編碼486個氨基酸殘基的蛋白質(zhì)，而Smyd1b（Smyd1-△Exon5）為編碼473個氨基酸殘基的蛋白質(zhì)，Smyd1a包含一個額外的13個氨基酸插入序列，插入位置在215-227，這13個氨基酸的插入是由Smyd1a的第5外顯子編碼的，它們的區(qū)別是Smyd1b缺乏第5外顯子（Smyd1-△Exon5），可能影響其生物學(xué)作用。Smyd1a和Smyd1b（Smyd1-△Exon5）是Smyd1家族高度保守的成員，它們都包括SET結(jié)構(gòu)域和MYND結(jié)構(gòu)域。Smyd1基因發(fā)生選擇性剪接產(chǎn)物分別為Smyd1a和Smyd1b（Smyd1-△Exon5）。 Tan等通過RT-PCR分析證實，Smyd1a和Smyd1b（Smyd1-△Exon5）在時間和空間上的表達方式完全不同，Smyd1a轉(zhuǎn)錄發(fā)生于骨骼肌發(fā)育過程中第6個小時，而Smyd1b（Smyd1-△Exon5）的轉(zhuǎn)錄晚于前者5小時才出現(xiàn)，提示通過選擇性剪接產(chǎn)生的Smyd1a和Smyd1b（Smyd1-△Exon5）表達具有時序性。他們?yōu)榱诉M一步證實Smyd1a和Smyd1b（Smyd1-△Exon5）在骨骼肌發(fā)育中的作用，分別進行了將Smyd1a和Smyd1b（Smyd1-△Exon5）基因同時敲除，和只將Smyd1a敲除的實驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，如果將二者均敲除，發(fā)育肌肉具有形態(tài)學(xué)特征，但不能游泳，進行刺激時也沒有任何反應(yīng)；如果只敲除Smyd1a基因，對肌肉發(fā)育沒有任何影響，動物能進行游泳，也能進行正常收縮活動。免疫組化研究結(jié)果顯示，肌原纖維排列正常，提示Smyd1a和Smyd1b（Smyd1-△Exon5）也許有更多的生物學(xué)功能，Smyd1b（Smyd1-△Exon5）對于肌肉發(fā)育起著重要作用。Smyd1基因的選擇性剪接體Smyd1a和Smyd1b（Smyd1-△Exon5）在人類、嚙齒類動物和斑馬魚等動物的心肌和骨骼肌組織中特異性表達且含量豐富，這與已經(jīng)證實了的Smyd1在心肌組織和骨骼肌組織中發(fā)揮重要作用是相對應(yīng)的［27］。此外，在嚙齒類和斑馬魚的肌肉組織中Smyd1a和Smyd1b（Smyd1-△Exon5）的表達與人的高度一致，這說明了Smyd1基因在進化上的保守［28］。通過實驗發(fā)現(xiàn)，該基因受到血清反應(yīng)因子（SRF）和成肌素（myogenin）的直接調(diào)控，在C2C12細胞培養(yǎng)中，SRF和myogenin的過度表達明顯增加了Smyd1基因的表達，如果將SRF基因敲除后發(fā)現(xiàn)，Smyd1mRNA表達明顯減少［29］。但是關(guān)于Smyd1a和Smyd1b（Smyd1-△Exon5）表達調(diào)控和生物學(xué)作用的區(qū)別是什么，還需進一步研究。Smyd1基因在抗阻運動性骨骼肌肥大過程中是否發(fā)生了剪接，剪接性產(chǎn)物是否是Smyd1a和Smyd1b（Smyd1-△Exon5），且其分別起著怎樣的作用，仍需探索。

2 組蛋白修飾機制對S my d1基因選擇性剪接的調(diào)控作用

2.1 組蛋白修飾

DNA和組蛋白H2A、H2B、H（3、H4、H1）以及一些其他蛋白質(zhì)組合在一起，反復(fù)折疊纏繞，形成濃集的染色體。而組蛋白修飾可影響組蛋白與DNA的親和性而改變?nèi)旧|(zhì)的狀態(tài)，影響轉(zhuǎn)錄因子和DNA序列的結(jié)合，對基因表達進行調(diào)控［30］。組蛋白修飾包括組蛋白磷酸化、乙?；?、甲基化、泛素化、SUMO化、ADP-核糖基化［31］。他們通常發(fā)生在組蛋白氨基末端，影響基因轉(zhuǎn)錄、翻譯和細胞調(diào)控。組蛋白氨基末端修飾的方式和數(shù)量不同可產(chǎn)生不同的表觀遺傳學(xué)信息。在這些組蛋白修飾中，研究較早和較詳細的是組蛋白乙?；陙韺M蛋白甲基化修飾的研究也進展迅速。組蛋白甲基化修飾比乙酰化修飾復(fù)雜得多。一般來說，組蛋白乙?；揎検菚簳r的，能選擇性地使某些染色質(zhì)區(qū)域的結(jié)構(gòu)從緊密變得松散，為某些基因的轉(zhuǎn)錄提供前提，增強其表達水平；而組蛋白甲基化修飾比較穩(wěn)固，特別是三甲基化修飾，他被認為影響長期表觀遺傳學(xué)記憶。在所有組蛋白甲基化修飾中，某些可抑制基因表達，而某些可增強基因表達，乙?；揎椇图谆揎椡窍嗷ヒ种频模?1］。組蛋白甲基化是指發(fā)生在H3和H4組蛋白N端精氨酸或賴氨酸殘基上的甲基化，由組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶催化［32］。

2.2 Smyd1作用位點及其轉(zhuǎn)錄調(diào)控

甲基化發(fā)生在組蛋白的精氨酸和賴氨酸殘基上，目前發(fā)現(xiàn)24個組蛋白甲基化位點，其中7個位于精氨酸，17個位于賴氨酸。目前，數(shù)十種組蛋白賴氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶（histone lysine methyltransferase，HLMT）已被證實。其中Smyd1及其它的選擇性剪接體均為組蛋白賴氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶。其作用位點可能是組蛋白H3-K4和H3-K36位賴氨酸發(fā)生甲基化，從而激活基因的轉(zhuǎn)錄，其中H3-K4的甲基化必須是在H2B的123位賴氨酸泛素化狀態(tài)下進行，H2B-K123在泛素化狀態(tài)時可以募集H3-K4甲基轉(zhuǎn)移酶Set1，Set1進而募集PAF1（RNA polymeraseⅡassociated factor 1，RNA聚合酶Ⅱ相關(guān)因子1）延長復(fù)合物，當(dāng)RNA聚合酶ⅡC端呈現(xiàn)磷酸化狀態(tài)時，就可與延長復(fù)合物作用開啟基因轉(zhuǎn)錄［32］。研究還發(fā)現(xiàn)，Ubp8作為SAGA復(fù)合體中的一個成員，發(fā)揮去泛素化作用，使得H3K4甲基化后呈現(xiàn)去泛素化狀態(tài)，這樣可以募集H3-K36甲基轉(zhuǎn)移酶Set2，當(dāng)H3-K36甲基化與RNA聚合酶Ⅱ的C端結(jié)構(gòu)域中的第2位絲氨酸磷酸化同時發(fā)生時即可激活轉(zhuǎn)錄。

3 抗阻運動適應(yīng)中Smyd1基因選擇性剪接的組蛋白修飾調(diào)控

從Smyd1對組蛋白修飾的調(diào)控來看，Smyd1及其2種選擇性剪接異構(gòu)體均為組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶，它們均與組蛋白上的H3和H4位點結(jié)合，調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄激活， 而它們與組蛋白H3-K4、H3-K36、H3-K79、H3-K7、H3-K27、H3-K20等位點結(jié)合時會發(fā)生基因沉默，從而抑制基因表達，反過來，組蛋白修飾對于基因選擇性剪接具有反饋作用。它的反饋證據(jù)是通過研究人成纖維細胞生長因子受體2（FGFR）基因得到的［33］。

骨骼肌在抗阻運動作用下發(fā)生肥大，由于肌纖維響應(yīng)應(yīng)力刺激，肌細胞賴以生存的基質(zhì)發(fā)生改變，應(yīng)變會引起選擇性剪接。迄今為止，已經(jīng)報道的由應(yīng)變引起的選擇性剪接的基因有胰島素樣生長因子1基因和VEGF基因［34］。 但關(guān)于Smyd1基因在應(yīng)力作用下發(fā)生剪接的報道很少。已有的研究發(fā)現(xiàn)，在拉伸的應(yīng)力作用下，Smyd1基因發(fā)生了選擇性剪接，產(chǎn)生2種重要的剪接體，分別是Smyd1a和Smyd1b（Smyd1-△Exon5），這2種剪接體涉及到信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的調(diào)控［35］。因此推測，在正常轉(zhuǎn)錄條件下，組蛋白甲基化修飾即組蛋白H3K9乙?；潭?，H3K36甲基化水平，H3K9、H3K27甲基化水平等的變化，決定著 RNA聚合酶Ⅱ延伸速率變化，可對不同的剪接位點進行剪接，由此分別產(chǎn)生以Smyd1a或Smyd1b（Smyd1-△Exon5）為主的產(chǎn)物。簡言之，組蛋白修飾機制可能在Smyd1基因選擇性剪接中發(fā)揮重要作用。

同樣，運動機械刺激可能通過組蛋白修飾機制影響Smyd1基因的選擇性剪接使Smyd1a或Smyd1b（Smyd1-△Exon5）的量產(chǎn)生變化。 而Smyd1a或Smyd1b（Smyd1-△Exon5）一方面是選擇性剪接的產(chǎn)物，同時還兼有組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶的作用，從而反過來影響Smyd1基因的組蛋白甲基化修飾，由此改變?nèi)旧w結(jié)構(gòu)及選擇性剪接格局，從而使RNA聚合酶Ⅱ延伸速率發(fā)生改變，對Smyd1基因選擇性剪接產(chǎn)生影響。由此可知，當(dāng)肌肉受到力學(xué)刺激時，Smyd1基因發(fā)生選擇性剪接，首先快速剪接表達Smyd1a，然后剪接轉(zhuǎn)換表達Smyd1b（Smyd1-△Exon5），通過轉(zhuǎn)換表達，能夠使Smyd1a和Smyd1b（Smyd1-△Exon5）保持相當(dāng)長時間的生物學(xué)作用，它們均可激活衛(wèi)星細胞并促進其增殖［26］。衛(wèi)星細胞一旦被激活，就會增殖、分化，然后與已存在的肌纖維融合，通過這樣的過程為肌纖維提供新的細胞核，并使各種基因的表達發(fā)生改變，實現(xiàn)肌纖維所需纖維蛋白含量的比率，使肌肉衛(wèi)星（干）細胞庫得到更新，對肌肉質(zhì)量和功能的持續(xù)維持和增加起到重要作用。

4 小結(jié)

綜上所述，應(yīng)力運動刺激能通過適度上調(diào)Smyd1基因選擇性剪接從而對骨骼肌生長和肥大發(fā)揮積極作用，并在預(yù)防與治療骨骼肌萎縮及其相關(guān)疾病方面具有重要作用。但目前關(guān)于抗阻運動性骨骼肌肥大過程中，由于運動刺激，Smyd1如何進行組蛋白修飾，又如何指導(dǎo)基因轉(zhuǎn)錄的激活或抑制；反之，組蛋白修飾如何對基因的剪接位點進行選擇，實現(xiàn)與骨骼肌肥大密切相關(guān)的肌纖維和肌衛(wèi)星細胞的發(fā)生，從而穩(wěn)定骨骼肌在抗阻運動下發(fā)生適應(yīng)性肥大，增強其收縮功能，維持骨骼肌質(zhì)量等方面的問題還需要進一步研究。這些問題的解決將有助于更加充分的認知抗阻運動刺激下骨骼肌發(fā)生肥大的分子機制，并為今后抗阻運動預(yù)防和減輕各種骨骼肌萎縮相關(guān)疾病提供理論依據(jù)。

［1］Glass D.PI3 kinase regulation of skeletal muscle hypertrophy and atrophy.CurrTop MicrobiolImmunol，2010，346（78）：267-278.

［2］Sandri M，Barberi L，Bijlsma A，et al.Signalling pathways regulating muscle mass in ageing skeletal muscle：the role of the IGF1-Akt-mTOR-Foxo pathway.Biogerontology，2013，5（19）：9432-9439.

［3］Carson J，Nettleton D，Reecy J.Differential gene expres-sion in the rat soleus muscle during early work overloadinduced hypertrophy.Faseb J，2002，16（2）:207-209.

［4］Kawai M，Aida H，Hiraga A，et al.Muscle satellite cell

s are activated afterexercise to exhaustion in thoroughbred horses.Equine Vet J，2013，45（4）:512-517.

［5］Rhoads RP，F(xiàn)ernyhough ME，Liu X，et al.Extrinsic regulation of domestic animal-derived myogenic satellite cells II.Domest Anim Endocrinol，2009，36（3）：111-126.

［6］Mauro A.Satellite cell of skeletal muscle fibers.J Biophys Biochem Cytol，1961，2（9）：493-495.

［7］Bischoff R.The satellite cell and muscle regeneration.Engel AG Franzini-Armstrong C Myology，1994，2 （3）：97-118.

［8］Ryuichi T.Mechano-biology of skeletal muscle hypertrophy and regeneration：Possible mechanism of stretch-inducedactivation of resident myogenic stem cellsa.Anim Sci J，2010，81（1）：11-20.

［9］Sartorelli V，F(xiàn)ulco M.Molecular and cellular determinants of skeletal muscle atrophy and hypertrophy.Sci STKE，2004，244（27）：2411-2417.

［10］Just S，Meder B，Berger I，et al.The myosin-interacting protein SMYD1 is essential for sarcomere organization.J Cell Sci，2011，124（Pt 18）：3127-3136.

［11］Buckingham M，Bajard L，Chang T，et al.The formation of skeletalmuscle：from smitten lime.JAnat，2003，202（24）：59-68.

［12］Taylor W，Xiao B，Gamblin S，et al.A knot or not a knot?SETing the record straight on proteins.Comput Biol Chem，2003，27（1）：11-15.

［13］Zhang X，Tamaru H，Khan S，et al.Structure of the neurospora SET domain protein DIM-5，a histone H3lysine methyltransferase.Cell，2002，111（1）：117-127.

［14］Zhang X，Yang Z，Khan SI，et al.Structural basis for the product specificity of histone lysine methyltransferase.Mol Cell，2003，12（1）：177-185.

［15］Gottlieb PD，Pierce SA，Sims RJ，et al.Bop encodes a muscle-restricted protein containing MYND and SET domains and is essential for cardiac differentiation and morphogenesis.Nat Genet，2002，31（1）：25-32.

［16］Qian C，Zhou M.SET domain protein lysine methyltransferase：Structure，specificity and catalysis.Cell Mol Life Sci，2006，63（23）：2755-2763.

［17］Seligson D，Horvash S，Shi T.Global histone modification patterns predict risk of prostate cancer recurrence.Nature，2005，435（7046）：1262-1266.

［18］Tan X，Rotllant J，Li H，et al.A histone methyltransferase，is required for myofibril organization and muscle contraction in zebrafish embryos.Proc Natl Acad Sci U S A，2006，103（8），2713-2718.

［19］InternationalHuman GenomeSequencingConsortium.Finishing the euchromatic sequence of the human genome.Nature，2004，431（7011）：931-945.

［20］Zhang C，Marek GJ.Group III metabotropic glutamate receptor agonists selectively suppress excitatory synaptic currents in the rat prefrontal cortex induced by 5-hydroxytryptamine2A receptor activation.J Pharmacol Exp Ther，2007，320（1）：437-447.

［21］Zhang C，Marek GJ.AMPA receptor involvement in 5-hydroxytryptamine 2A receptor-mediated pre-frontal cortical excitatory synaptic currents and DOI-induced head shakes.Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry，2008， 32（1）：62-71.

［22］Chasin LA.Searching for splicing motifs.Adv Exp Med Biol，2007，623（1）：85-106.

［23］Han SP，TangYH，Smith R.Functional diversity of the hn-RNPs：past，present and perspectives.Biochem J，2010，430（3）：379-392.

［24］Allo M，Buggiano V，F(xiàn)ededa JP，et al.Control of alternative splicing through siRNA-mediated transcriptional gene silencing.Nat Struct Mol Biol，2009，16（7）：717-724.

［25］Schor IE，Rascovan N，Pelisch F，et al.Neuronal cell depolarization induces intragenic chromatinmodifications affecting NCAM alternative splicing.Proc Natl Acad Sci U S A，2009，106（11）：4325-4330.

［26］Tan X，Rotllant J，Li H，et al.Smyd1，a histone methyltransferase is required for myofibril organization and muscle contraction in zebrafish embryos.PNAS，2006，103（8）：2713-2718.

［27］Just S，Meder B，Berger I，et al.The myosin-interacting protein SMYD1 is essential for sarcomere organization.J Cell Sci，2011，124（Pt 18）：3127-3136.

［28］Li D，Niu Z，Yu W，et al.Smyd1 the myogenic activator，is a direct target of serum response factor and myogenin.Nucleic Acids Research，2009，37（21）：7059-7067.

［29］Jenuwein T，Allis CD.Translating the histone code.Science，2001，293（5532）：1074-1080.

［30］Sui X，Price C，Li Z，et al.Crosstalk between DNA and histones：Tet’s new role in embryonic stem Cells.Curr Ge-nomics，2012，13（8）：603-608.

［31］梁琳，盧光琇.組蛋白甲基化的研究進展.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展，2009，9（10）：1964-1966.

［32］謝萍，田春燕，張令強，等.組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶研究進展.遺傳，2007，29（9）：1035-1041.

［33］李大力.心臟與肌肉組織特異表達基因Smyd1及其他發(fā)育相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究.湖南師范大學(xué)博士學(xué)位論文，2007：18-65.

［34］Hameed M，Orrell RW，Cobbold M，et al.Expression of IGF-1 splice variants in young and old human skeletal muscle after high resistance exercise.J Physiol，2003，547（1）：247-254.

［35］Li D，Niu Z，Yu W，et al.SMYD1，the myogenic activator，is a direct target of serum response factor and myogenin.Nucleic Acids Res，2009，37（21）：7059-7071.