小劑量羅紅霉素對(duì)吸煙哮喘患者氣道炎癥的影響＊

鄭小珍，劉積鋒，鐘 蔚，吳文斌，檀月芳，黃玉仕

（廣西醫(yī)科大學(xué)第十附屬醫(yī)院／欽州市第一人民醫(yī)院呼吸科，廣西欽州 535000）

吸煙在成人支氣管哮喘患者中很常見，近年來的研究表明吸煙所致哮喘患者氣道炎癥的改變對(duì)糖皮質(zhì)激素治療不敏感，這部分戒煙不成功的支氣管哮喘吸煙患者的致殘率和病死率相當(dāng)高［1，2］；羅紅霉素可通過抑制 NF－кB的活化而降低白細(xì)胞介素－8（IL－8）的表達(dá)從而減少中性粒細(xì)胞在支氣管腔內(nèi)募集，且羅紅霉素可能通過對(duì)其促進(jìn)細(xì)胞膜的穩(wěn)定性及對(duì)中性粒細(xì)胞中NF－кB的抑制作用而減少中性粒細(xì)胞釋放活性氧［3］。本文采用在給予常規(guī)吸入沙美特羅替卡松粉的基礎(chǔ)上給予口服小劑量的羅紅霉素，以觀察小劑量的羅紅霉素聯(lián)合吸入沙美特羅替卡松粉對(duì)成人支氣管哮喘吸煙患者氣道炎癥及其療效的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 46例2008年10月至2010年6月在本院呼吸內(nèi)科門診及住院的輕度至中度非急性發(fā)作期支氣管哮喘吸煙患者為研究對(duì)象，均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)制定的支氣管哮喘的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且分級(jí)均符合輕度至中度非急性發(fā)作期支氣管哮喘［4］。就診前2個(gè)月內(nèi)均未使用過糖皮質(zhì)激素（包括吸入或全身使用），僅按需吸入支氣管擴(kuò)張劑（沙丁胺醇?xì)忪F劑）。所有患者隨機(jī)分為對(duì)照組（A組，23例，其中男20例，女3例）和治療組（B組，23例，其中男21例，女2例）。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

1.2 方法

1.2.1 觀察方法 吸煙指數(shù)的計(jì)算為：吸煙指數(shù)＝每天吸煙支數(shù)×吸煙年數(shù)。所有患者第1次就診時(shí)用意大利科時(shí)邁QUARK PFT1肺測(cè)試儀測(cè)定最大呼氣流量（peak expiratory flow，PEF）、第一秒用力呼氣容積占預(yù)計(jì)值百分比（FEV1%）及吸入支氣管擴(kuò)張劑后進(jìn)行氣道舒張?jiān)囼?yàn)（均為3次吹氣后取平均值），以氣道舒張?jiān)囼?yàn)的FEV1%提高大于或等于15%確定為支氣管哮喘患者。確定診斷后所有患者進(jìn)行肺功能及取誘導(dǎo)痰檢測(cè)，檢測(cè)均在早上8：00～11：00。對(duì)照組給予吸入沙美特羅替卡松粉吸入劑50／250μg（葛蘭素史克公司生產(chǎn)）治療，用法為1吸／次，每天2次。治療組在對(duì)照組的治療基礎(chǔ)上給予口服羅紅霉素分散片（江蘇省連云港市恒瑞醫(yī)藥公司生產(chǎn)），用法為每次0.15g，每天1次。4周后復(fù)查所有患者進(jìn)行肺功能測(cè)定及取誘導(dǎo)痰檢測(cè)。兩組患者在治療期間均未采取戒煙措施。

表1 兩組患者治療前的一般資料

1.2.2 誘導(dǎo)痰及處理 誘導(dǎo)痰方法為射流霧化吸入200g沙丁胺醇后逐級(jí)吸入高濃度鹽水（3%，4%，5%）刺激咳痰，每次5分鐘［5］?？忍档脚囵B(yǎng)皿，合格的痰標(biāo)本為涂片檢查每低倍鏡視野白細(xì)胞大于25個(gè)，鱗狀上皮細(xì)胞小于10個(gè)。向痰液內(nèi)加入4倍體積的0.1%的二硫蘇糖醇（DTT），購(gòu)自Sigma公司，冰浴下吹打至痰液黏稠度降低，再加入等量的磷酸鹽緩沖液（PBS）吹打，790r／min離心10min，分裝上清液于－20℃凍存待檢［6］，將沉淀的細(xì)胞懸浮于磷酸緩沖鹽液中2h內(nèi)送檢驗(yàn)科采用自動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀進(jìn)行細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。

1.2.3 痰上清液中IL－8蛋白質(zhì)濃度的測(cè)定 采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定痰上清液中IL－8水平。IL－8試劑盒（由上海依科賽生物制品有限公司生產(chǎn)），嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用的SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料用表示，同一組治療前后比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)，兩組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用行×列χ2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

兩組支氣管哮喘吸煙患者均完成4周的療程及隨訪，在治療過程中無不良反應(yīng)。兩組治療前早上的PEF及FEV1%比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），且兩組治療前誘導(dǎo)痰的嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞及IL－8比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。兩組患者經(jīng)過4周的治療后，兩組患者的PEF及FEV1%均提高（P＜0.01），嗜酸性粒細(xì)胞減少（P＜0.01）。但A組患者氣道內(nèi)中性粒細(xì)胞及IL－8減少差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。B組患者經(jīng)治療后氣道內(nèi)中性粒細(xì)胞及IL－8明顯減少且比A組治療后顯著減少（P＜0.01），且B組患者經(jīng)治療后氣道內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞比A組治療后減少（P＜0.05），同時(shí)B組患者經(jīng)治療后PEF及FEV1%顯著改善且均比A組患者經(jīng)治療后明顯提高（P＜0.01）。見表2。相關(guān)分析顯示吸煙指數(shù)與氣道內(nèi)中性粒細(xì)胞、IL－8水平及嗜酸性粒細(xì)胞呈正相關(guān)（r＝0.433，P＜0.01；r＝0.610，P＜0.01；r＝0.441，P＜0.01），而氣道內(nèi)中性粒細(xì)胞、IL－8水平及嗜酸性粒細(xì)胞與第一秒用力呼氣流量呈負(fù)相關(guān)（r＝－0.660，P＜0.01；r＝－0.906，P＜0.01；r＝－0.699，P＜0.01），氣道內(nèi)中性粒細(xì)胞與PEF呈負(fù)相關(guān)（r＝－0.303，P＜0.01）。線性回歸分析顯示氣道內(nèi)IL－8的表達(dá)對(duì)第一秒用力呼氣流量影響較大（β＝－0.621，P＜0.01），氣道內(nèi)中性粒細(xì)胞對(duì)第一秒用力呼氣流量也有影響（β＝－0.167，P＜0.05）。

表2 兩組氣道炎癥指標(biāo)及肺功能比較（，n＝23）

表2 兩組氣道炎癥指標(biāo)及肺功能比較（，n＝23）

指標(biāo) 組別 治療前 治療后 治療前后組內(nèi)比較P值治療前組間比較P值治療后組間比較P值420.30±39.83439.03±37.51 0.001 0.118 0.000 B組 404.42±26.47497.62±33.24 0.000 FEV1（%） A組 73.29±4.13 76.27±4.11 0.000 0.882 0.000 B組 73.46±3.72 80.30±2.94 0.000中性粒細(xì)胞（106／mL） A組 2.93±0.55 2.92±0.54 0.167 0.127 0.000 B組 3.17±0.47 2.23±0.50 0.000嗜酸性粒細(xì)胞（106／mL） A組 0.18±0.03 0.15±0.03 0.000 0.509 0.028 B組 0.19±0.04 0.13±0.03 0.000 IL－8（μg／L） A組 1.47±0.34 1.43±0.37 0.631 0.707 0.000 B組PEF（L／min） A組1.51±0.36 0.42±0.30 0.000

3 討 論

通過本臨床研究顯示，吸煙均可引起支氣管哮喘患者氣道中中性粒細(xì)胞、IL－8及嗜酸粒細(xì)胞增多，支氣管哮喘患者氣道中中性粒細(xì)胞、IL－8及嗜酸粒細(xì)胞增多均與FEV1%呈負(fù)相關(guān)；僅支氣管哮喘患者氣道中中性粒細(xì)胞與PEF呈負(fù)相關(guān)外，支氣管哮喘患者氣道中中性粒細(xì)胞、IL－8與PEF無明顯相關(guān)關(guān)系。表明支氣管哮喘吸煙者氣道中中性粒細(xì)胞、IL－8及嗜酸粒細(xì)胞增多可引起氣道阻塞加重。Jang等［1］研究證實(shí)PEF、FEV1（%）均比支氣管哮喘不吸煙者降低，張莉等［7］也報(bào)道吸煙組哮喘患者誘導(dǎo)痰中中性粒細(xì)胞及IL－8濃度高于非吸煙組哮喘患者，且經(jīng)吸入糖皮質(zhì)激素治療后也難以改善，這些可能與吸煙引起組蛋白去乙?；D(zhuǎn)移酶（HDAC）的活性降低而導(dǎo)致其對(duì)糖皮質(zhì)激素不敏感有關(guān)［8］。

A組患者吸入沙美特羅／替卡松粉吸入劑50／250μg治療4周后PEF、FEV1%及誘導(dǎo)痰中嗜酯性粒細(xì)胞明顯改善，沙美特羅／替卡松可提高吸煙或不吸煙支氣管哮喘患者的PEF、FEV1%［9］。但在本研究中吸入沙美特羅／替卡松氣道中中性粒細(xì)胞、IL－8無明顯降低，而B組患者在吸入沙美特羅／替卡松并口服小劑量羅紅霉素分散片4周后氣道內(nèi)中性粒細(xì)胞及IL－8明顯減少且比A組治療后顯著減少，同時(shí)B組患者經(jīng)治療后PEF及FEV1%顯著改善且均比A組患者經(jīng)治療后明顯提高。表明羅紅霉素聯(lián)合吸入沙美特羅／替卡松比單純吸入沙美特羅／替卡松更好改善患者的早晨PEF、FEV1（%）與羅紅霉素聯(lián)合吸入沙美特羅／替卡松減少患者氣道中的中性粒細(xì)胞及降低IL－8表達(dá)有關(guān)。近來的研究表明與羅紅霉素同屬于十四元大環(huán)內(nèi)酯類紅霉素可減輕煙草提取物引起巨噬細(xì)胞中HDAC的活性降低而抑制IL－8的表達(dá)［3，10］，因此認(rèn)為羅紅霉素可減輕支氣管哮喘吸煙患者氣道中IL－8表達(dá)及中性粒細(xì)胞相關(guān)的炎癥可能與其通過逆轉(zhuǎn)因吸煙引起HDAC的活性而降低IL－8表達(dá)水平有關(guān)。支氣管哮喘吸煙患者在戒煙后炎癥、肺功能及癥狀也可得到改善，首先應(yīng)積極地提倡哮喘患者戒煙使支氣管哮喘得到有效治療［2，11－12］。吸煙導(dǎo)致支氣管哮喘患者糖皮質(zhì)激素不敏感的相關(guān)機(jī)制及羅紅霉素在其中的作用機(jī)制尚有待進(jìn)一步研究。

通過本研究顯示，口服小劑量羅紅霉素聯(lián)合吸入沙美特羅／替卡松比單純吸入沙美特羅／替卡松減少支氣管哮喘患者氣道內(nèi)中性粒細(xì)胞、IL－8及嗜酸粒細(xì)胞，且PEF及FEV1%均比單純吸入沙美特羅／替卡松治療后顯著改善。

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