唐聞濤黎文藝謝新英陳明德
(1 廣東省珠海市香洲區(qū)灣仔社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心, 廣東 珠海 519030;2 廣東省珠海市香洲區(qū)人民醫(yī)院,廣東 珠海 519000)
正交試驗法優(yōu)選復方阿莫西林包合物工藝條件
唐聞濤1黎文藝2謝新英1陳明德1
(1 廣東省珠海市香洲區(qū)灣仔社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心, 廣東 珠海 519030;2 廣東省珠海市香洲區(qū)人民醫(yī)院,廣東 珠海 519000)
目的優(yōu)選復方阿莫西β-環(huán)糊精包合物的最佳制備工藝。方法以主藥與β-環(huán)糊精的摩爾投料比、包合溫度、攪拌時間為考察因素,包合率為指標,采用正交試驗法優(yōu)選復方阿莫西林包合的最佳工藝。結(jié)果復方阿莫西林最佳提取工藝的摩爾投料比為1∶1,包合溫度為20°C,攪拌時間為120min,包合次數(shù)為3次。結(jié)論該包合物工藝條件簡便可靠,質(zhì)量可控,對進一步工藝開發(fā)有較好的參考價值。
復方阿莫西林;β-環(huán)糊精;包合物;正交試驗
自從20世紀90年代世界胃腸病學會推薦應(yīng)用三聯(lián)14d療法根除幽門螺旋桿菌以來,出現(xiàn)其副作用高達30%且依以性差的特點[1]。近年來,我中心臨床醫(yī)師使用經(jīng)驗方復方阿莫西林(處方由阿莫西林、呋喃唑酮、雷尼替丁組成)治療慢性胃潰瘍患者,療效顯著且副作用輕微,臨床用量參照《新編藥物學》第15版,各組分最佳比例為:阿莫西林:呋喃唑酮:雷尼替丁=5∶1∶1[2,3],但患者服藥依從性差。為了延長復方阿莫西林在胃內(nèi)的滯留時間,提高幽門螺旋桿菌的消除率,達到增強藥效,減少藥物耐藥性,提高患者服藥依從性,筆者采用研磨法優(yōu)將復方阿莫西林β-環(huán)糊精最佳包合工藝進行初步探討。
環(huán)糊精(簡稱CD)系環(huán)糊精聚糖轉(zhuǎn)位酶作用于淀粉后經(jīng)水解環(huán)合而成的產(chǎn)物。為水溶性、非還原性的白色結(jié)晶粉沫,常見的有α、β、γ三種,分別由6、7、8個葡萄糖分子構(gòu)成。見圖1。
圖1 β-環(huán)糊精
β-CD呈筒狀結(jié)構(gòu),其兩端與外部為親水性,而筒的內(nèi)部為疏水性,借范德華力將一些大小和形狀合適的藥物分子(如鹵素、揮發(fā)油等)包含于環(huán)狀結(jié)構(gòu)中,形成超微囊狀包合物外層的大分子(如β-CD、膽酸、淀粉、纖維素等)稱為“主分子”,被包合于主分子之內(nèi)的小分子物質(zhì)稱為“客分子”。其中以β-CD在水中溶解度最小,最易從水中析出結(jié)晶,故最為常用。β-環(huán)糊精包合的作用:①可增加藥物的溶解度,如薄荷油、桉葉油的β-CD包合物,其溶解度可增加30倍;②增加藥物的穩(wěn)定性,特別是一些易氧化、水解、揮發(fā)的藥物形成包合物后,藥物分子得到保護;③液體藥物粉末化,便于加工成其他劑型,如紅花油、牡荊油β-CD包合物均呈粉末狀;④減少刺激性,降低毒副作用,如5-氟尿嘧啶與β-CD包合后可基本惡心、嘔吐狀等反應(yīng);⑤掩蓋不良氣味,如大蒜油包合物可掩蓋大蒜的嗅味;⑥可調(diào)節(jié)釋藥速度,提高生物利用度[4]。
800B臺式離心機(上海安亭儀器廠);JB-2型恒溫磁力攪拌器(上海新涇儀器有限公司);UV-2401型紫外分光光度計(日本島津);XW-80型旋渦混合器(上海醫(yī)科大學儀器廠);1100型高效液相色譜儀(美國HP公司);CKS倒置顯微鏡(日本OLXMPUS公司);Rs-232型精密電子天平(上海恒平科學儀器公司);阿莫西林、呋喃唑酮、雷尼替丁均為分析純β-環(huán)糊精(味精總廠產(chǎn)品)。
2.1 考察指標
復方阿莫西林包合率%=包合物中阿莫西林/投藥量×100%。
2.2 線性關(guān)系考察
色譜柱:十八烷基硅烷鍵合硅膠;流動相:磷酸鹽緩沖液(pH=5.0)-乙晴(97.5∶2.5);檢測波長:254nm;柱溫:室溫;進樣量:20μL;流速:1mL/min,精密稱取復方阿莫西林50.26mg,置于50mL容量瓶中,用流動相制成每1mL含0.1mg的溶液,搖勻;精密吸取上述對照品溶液1、2、3、4、5 mL,分別置于10mL容量瓶中,加流動相稀釋至刻度,搖勻;分別進樣20μL,以峰面積(Y)對濃度(C)繪制標準曲線,得回歸方程為Y=5.582C+5.278 (r=0.9998),可見,復方阿莫西林在0.2001~0.5026mg/mL范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。
2.3 技術(shù)路線
取β-環(huán)糊精加適量蒸溜水,在磁力攪拌器上加熱至80°С,溶解后攪拌到室溫,分別加入阿莫西林、呋喃唑酮、雷尼替?。ū壤秊?∶1∶1),攪拌2h,制得的包合物溶液置冰箱中冷藏12h,再抽濾并洗滌,所得沉淀物于60°С干燥,即得復方阿莫西林β-環(huán)糊精包合物。
2.4 包合物工藝條件篩選
2.4.1 因素水平選擇
根據(jù)“2.1”項下試驗結(jié)果,選擇主藥與β-環(huán)糊精的投料比、包合溫度、攪拌時間為考察因素,選用L9(34)進行正交試驗[5,6.7],因素水平見表1。
表1 因素水平表
2.4.2 評價指標
以復方阿莫西林包合率為指標、按照“2.1”技術(shù)路線操作,求出包合物的百分率,百分率越大,包合就越好。
2.4.3 正交試驗結(jié)果見表2,方差結(jié)果見表3。
表2 正交實驗表及實驗結(jié)果
由表2、表3可知,各因素水平對實驗結(jié)果都有一定的影響,水平優(yōu)劣依次為A3>A2>A1,B3>B2>B1,C2>C1>C3。因素主次為A>B>C,包合物的最佳工藝條件下為A3B3C2。
2.4.4 加樣回收率測定
精密稱取復方阿莫西林供試品6份,分別加入精密稱取的對照品阿莫西林,再按“2.2”項下方法制備樣品液,分別精密量取20μL注入色譜儀,計算阿莫西林的回收率,結(jié)果見表4。
表3 方差分析
表4 阿莫西林回收率試驗結(jié)果(n=6)
2.5 包合物的驗證試驗
選用顯微鏡法。觀察到含藥的包合物和β-環(huán)糊精形狀不同,主要是。晶格排列發(fā)生變化所致。
由于阿莫西林水解率隨溫度升高而加速,因此,在包合過程中,我們采用的包合溫度較低、攪拌時間也較短,以防止阿莫西林水解[4]。
β-環(huán)糊精口服無毒,且可作為碳水化合物易被人體吸收。還特有無頂園錐體狀空腔結(jié)構(gòu),易與藥物分子形成復合物,在醫(yī)藥上的應(yīng)用就充分體現(xiàn)出其出色的“包埋”作用,防止藥物揮發(fā)、水解,增加溶解度,提高生物利用度,提高藥效,降低藥物刺激性、毒性,掩蓋無良氣味,制成顆粒劑、片劑、膠囊劑等[5-6]。
實驗中,包合物溶液置冰箱中冷藏12h,原因是β-環(huán)糊精在包合過程中沒有完全被利用,而β-環(huán)糊精的飽和水溶液在溫度降低時,β-環(huán)糊精會慢慢析出晶體,抽濾并洗滌目的是使未包合的β-環(huán)糊精部分溶解,從而提高包合物的純度。
從試驗得出,復方阿莫西林β-環(huán)糊精包合物的最佳包合條件為:復方阿莫西林與β-環(huán)糊精的摩爾比例為1∶1,包合溫度為25°С,攪拌時間為2h,本實驗采用研磨法制備復方阿莫西林β-環(huán)糊精包合物,普遍、通用,工藝簡單,重現(xiàn)性好,具有推廣應(yīng)用。
[1] 蕭樹東.消化系疾病基礎(chǔ)與臨床進展[M].上海:上??茖W技術(shù)文獻出版社,2005:135.
[2] 朱盛山.藥物新劑型[M].北京:化學工業(yè)出版社,2003:36-95.
[3] 師磊,王芳,魏耀周,等.四聯(lián)短程療法治療消化性潰瘍120例[J].臨床軍醫(yī)雜志,2001,29(3):40-41.
[4] 屠錫德,陳鈞壽,朱家璧.藥劑學[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2002: 366-382.
[5] 李海英,楊帆.正交試驗優(yōu)選復方草豆蔻合劑提取工藝[J].中國醫(yī)藥指南,2012,10(3):477-479.
[6] 陳中文.田丹滴丸的成型工藝研究[J].中國醫(yī)藥指南,2012, 10(12):418-420.
[7] Xu XL,Zhang ZR,He ZX.Srudy on preparation of betacyclodextrin inclusion complex of volatile oil in xiongdan xiaoyan capsules[J].Zhongguo Zhong Yao Za Zhi,2004,29(7):644-646.
R978.1
B
1671-8194(2013)16-0112-02
珠海市醫(yī)學科研基金立項課題(編號:2006009)