大棗對(duì)呼吸道黏膜免疫分子sIgA調(diào)節(jié)作用的實(shí)驗(yàn)研究

徐艷琴

（南陽醫(yī)專第一附屬醫(yī)院，河南 南陽 473000）

大棗對(duì)呼吸道黏膜免疫分子sIgA調(diào)節(jié)作用的實(shí)驗(yàn)研究

徐艷琴

（南陽醫(yī)專第一附屬醫(yī)院，河南 南陽 473000）

目的觀察大棗對(duì)呼吸道黏膜免疫分子sIgA的調(diào)節(jié)作用，進(jìn)一步探討大棗補(bǔ)氣的機(jī)理，為研發(fā)增強(qiáng)呼吸道黏膜免疫功能，防治呼吸道感染的中藥制劑提供依據(jù)。方法通過灌胃給予小鼠不同劑量的大棗10d后，檢測小鼠支氣管肺泡灌洗液（BALF)中免疫分子sIgA的含量。結(jié)果大棗對(duì)小鼠呼吸道黏膜免疫分子sIgA的分泌有一定促進(jìn)作用，大棗低劑量組對(duì)sIgA的調(diào)節(jié)作用優(yōu)于中、高劑量組。結(jié)論大棗補(bǔ)氣的機(jī)制之一是促進(jìn)呼吸道黏膜免疫分子sIgA分泌，可作為臨床對(duì)易感人群防治呼吸道感染的中藥免疫增強(qiáng)劑。

大棗；呼吸道；黏膜免疫分子sIgA；實(shí)驗(yàn)研究

呼吸道感染是臨床的常見、多發(fā)疾病，臨床治療以抗生素為主，抗生素治療后引起菌群失調(diào)、二重感染、致病菌的耐藥性逐漸提高及產(chǎn)生對(duì)抗生素不敏感的耐藥菌已成為當(dāng)今醫(yī)療界關(guān)注的重大問題之一。目前治療呼吸道感染已從單純的抑菌、殺菌轉(zhuǎn)換到促進(jìn)人體黏膜免疫系統(tǒng)功能，通過激活或刺激各種免疫活性細(xì)胞的功能，產(chǎn)生免疫分子，達(dá)到局部防治感染的目的。研究發(fā)現(xiàn)呼吸道感染的發(fā)生與黏膜免疫主要效應(yīng)分子sIgA分泌量減少密切相關(guān)[1，2]。黏膜免疫主要效應(yīng)分子sIgA能夠阻止病原性微生物在局部粘附，溶解細(xì)菌，調(diào)理吞噬，抗毒素，抗病毒，又稱局部抗體。因此，尋找促進(jìn)sIgA分泌的藥物，提高局部黏膜系統(tǒng)的免疫功能，為臨床防治呼吸道感染提供新的思路和有效的防治方法。

大棗又稱紅棗，甘溫歸脾胃經(jīng)，具有補(bǔ)中益氣、養(yǎng)血安神、緩和藥性的作用，用于治療中氣不足血虛等癥。大棗中主要含有糖類、維生素類、氨基酸、礦質(zhì)元素、環(huán)核苷酸、蘆丁多糖等。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)大棗多糖對(duì)機(jī)體非特異免疫、細(xì)胞免疫和體液免疫均有顯著的興奮作用，可以提高免疫抑制小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能，促進(jìn)溶血素溶血空斑的形成，提高淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率和外周T淋巴細(xì)胞的百分率[3]。大棗多糖能促進(jìn)免疫低下小鼠腹腔巨噬細(xì)胞分泌產(chǎn)生IL-1、提高IL-1的活性，促進(jìn)體外ConA及LPS誘導(dǎo)的脾細(xì)胞增殖，促進(jìn)機(jī)體的免疫功能[4]。張慶等[5]實(shí)驗(yàn)證明大棗粗多糖亦具有促進(jìn)小鼠淋巴細(xì)胞增殖作用，但作用方式略有不同，一般多糖的作用在體外均隨濃度增大而增強(qiáng)，而大棗多糖為10μg/mL時(shí)便可觀察到明顯促增殖作用，在100μg/mL達(dá)最高水平，之后隨濃度增大而作用減弱。大棗還具有抗炎、抗癌、抗過敏等作用。因此本研究選用大棗作為研究對(duì)象。

1 材料與方法

1.1 材料

①實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：昆明種小鼠（SPF級(jí)），雌雄各半，體質(zhì)量：18～22g。②藥液制備：大棗購自本院中藥房，且為 《中國藥典》所載品種，由中藥鑒定教研室鑒定其品種和質(zhì)量，采用水煎法進(jìn)行煎煮并滅菌，冷卻后將所得藥液密封放入4℃冰箱保存。③試劑及儀器：0.9%生理鹽水、泛福舒 、ELISA小鼠用sIgA定量試劑盒、SpectraMax 340PC型酶標(biāo)儀、離心小管、微量移液器、眼科剪、眼科鑷、穿刺針或4號(hào)半頭等。

1.2 方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組

將50只昆明種小鼠隨機(jī)分組，陽性對(duì)照組10只，陰性對(duì)照組10只，大棗低、中、高組每組10只，均雌雄各半。

1.2.2 給藥方法

①陽性對(duì)照組：實(shí)驗(yàn)選取臨床常用于防治呼吸道感染的生物制劑細(xì)菌溶解產(chǎn)物為陽性對(duì)照藥物，給予臨床給藥劑量的細(xì)菌溶解產(chǎn)物水溶液灌胃，連續(xù)10d。②陰性對(duì)照組：給予0.9%生理鹽水灌胃，連續(xù)10d。③大棗低、中、高劑量組：分別給予各組小鼠低、中、高濃度的大棗水煎劑灌胃，連續(xù)10d（甘草中組為臨床等效劑量，三組給藥濃度的比例為1∶5∶25）。

1.2.3 測定sIgA的含量

給藥10d后，處死小鼠，行頸部解剖，用穿刺針插入氣管上端，0.8mL生理鹽水反復(fù)沖洗3遍，回收灌洗液，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法（雙抗體夾心法）檢測支氣管肺泡灌洗液（BALF）中sIgA的含量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

正態(tài)分布的計(jì)量資料進(jìn)行l(wèi)evene方差齊性檢驗(yàn)，滿足方差齊性的用單因素的方差分析，兩兩比較采用最小顯著差異t檢驗(yàn)（least significant difference，LSD）。所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件和2003 Excel進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析處理。

2 結(jié) 果

大棗不同劑量組對(duì)小鼠呼吸道黏膜免疫分子sIgA的分泌均有一定的促進(jìn)作用，低、中、高劑量組sIgA的含量明顯高于與陰性對(duì)照組，且P＜0.05差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與陽性對(duì)照組比較，大棗對(duì)sIgA的調(diào)節(jié)作用低于陽性對(duì)照組（P＜0.05）；大棗低中高劑量組比較，低劑量組sIgA的含量高于中、高劑量組，表明大棗低劑量組對(duì)呼吸道黏膜免疫分子sIgA的調(diào)節(jié)作用優(yōu)于中高劑量組。見表1。

表1 大棗不同劑量對(duì)小鼠呼吸道黏膜免疫中sIgA的調(diào)節(jié)作用（μg/mL，χ—±s）

3 討 論

目前臨床用于防治反復(fù)發(fā)作的呼吸道感染已從單純的抑菌、殺菌，轉(zhuǎn)換為換到促進(jìn)人體黏膜免疫系統(tǒng)功能，通過激活或刺激各種免疫活性細(xì)胞的功能，產(chǎn)生免疫分子，達(dá)到局部防治感染的目的。臨床常用的有瑞士歐姆制藥廠生產(chǎn)的泛福舒（bacterial lysates，細(xì)菌溶解產(chǎn)物）、白葡奈氏菌片等。泛福舒是由8種常見細(xì)菌溶解物（流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、卡他奈瑟氏菌、草綠色鏈球菌、化膿性鏈球菌、肺炎克雷白菌、臭鼻克雷白菌）組成，白葡奈氏菌片是由白色葡萄球菌、奈瑟卡他球菌、枯草芽孢桿菌以20:20:1的比例構(gòu)成。它們以抗原的形式經(jīng)口服進(jìn)入腸道，刺激腸道黏膜免疫系統(tǒng)發(fā)生免疫反應(yīng)，腸道黏膜免疫系統(tǒng)前體IgA B細(xì)胞和Th細(xì)胞傳播到遠(yuǎn)端效應(yīng)部位上呼吸道，產(chǎn)生免疫分子，達(dá)到局部防治感染的目的。國外學(xué)者對(duì)泛福舒治療呼吸道感染性疾病進(jìn)行了研究，Lusuardi等[6]的雙盲對(duì)照實(shí)驗(yàn)顯示，支氣管肺泡灌洗液中IgA的水平較治療前明顯升高，Zielnik-Jurkiewicz等[7]的研究也提示，泛福舒可以使血清內(nèi)細(xì)胞活素向有益于機(jī)體的方向發(fā)生變化，從而預(yù)防反復(fù)呼吸道感染。Steurer-Stey等[8]的研究提示，使用泛福舒治療反復(fù)呼吸道感染可以減少感染發(fā)作次數(shù)，減輕再次發(fā)作程度，同時(shí)減少抗菌素的反復(fù)使用。綜上研究表明泛福舒作為抗原刺激黏膜免疫系統(tǒng)，激活免疫細(xì)胞的活性，促進(jìn)sIgA的分泌，達(dá)到防治上呼吸道感染的目的。

泛福舒雖由八種滅活的細(xì)菌溶解產(chǎn)物構(gòu)成，但在臨床使用的過程中仍有不良反應(yīng)的報(bào)道[9]，且對(duì)于免疫系統(tǒng)發(fā)育不完善的6個(gè)月以內(nèi)嬰兒禁用。大棗為臨床中常用的中藥，本實(shí)驗(yàn)研究表明大棗能夠促進(jìn)黏膜免疫分子sIgA的分泌，增強(qiáng)黏膜免疫的功能。中藥作為我國特有的資源，對(duì)免疫功能具有雙向調(diào)節(jié)的作用，與生物免疫制劑比較具有安全性較高、生產(chǎn)、來源容易的優(yōu)勢。因此從中藥中選取增強(qiáng)黏膜免疫功能、促進(jìn)黏膜免疫效應(yīng)分子sIgA的分泌，是今后研發(fā)防治感染性疾病免疫制劑的一個(gè)方向。

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1671-8194（2013）15-0096-02