不同生長階段馬齒莧水分及總黃酮含量分析

董海勝, 朱景濤, 張淑靜, 陳 斌

(中國航天員科研訓(xùn)練中心航天醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)與應(yīng)用國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100094)

馬齒莧(Portulaca oleracea L.)是一種藥食同源的植物,馬齒莧科一年生草本植物,別名五行草、酸莧、豬母菜、地馬菜、馬蛇子菜及長壽菜等.其功能據(jù)《本草綱目》記載:“散血消腫,利腸滑胎,解毒通淋,治產(chǎn)后虛汗”[1-3].據(jù)《本草拾遺》記載:“破痃癖,止消渴,又主馬惡瘡蟲”.馬齒莧味酸、性寒,具有清熱解毒、益氣生津、涼血止血、散血消腫等作用,主治熱痢膿血、熱淋、帶下、癰腫惡瘡、丹毒等.馬齒莧資源豐富、物美價(jià)廉,在我國民間已有幾千年的應(yīng)用歷史.多項(xiàng)研究表明馬齒莧中黃酮類成分是其降血糖作用的有效成分之一[4-5].

本文對(duì)馬齒莧生長過程中全草總黃酮含量的動(dòng)態(tài)變化以及不同部位總黃酮的分布狀況進(jìn)行分析,為確定馬齒莧的適宜采收時(shí)間和采收部位提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù).

1 材料與方法

1.1 馬齒莧

馬齒莧全草采自北京唐家?guī)X村菜園,如圖1.

圖1 馬齒莧全草Fig.1 Whole plant of purslane

1.2 儀器及試劑

紫外可見分光光度計(jì);鼓風(fēng)干燥箱;電子天平;離心機(jī),研缽及玻璃器皿;蕓香苷(蘆丁)對(duì)照品,中國藥品生物制品檢定所;硝酸鋁,亞硝酸鈉,氫氧化鈉及其他試劑均為分析純,北京化學(xué)試劑公司.

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 水分含量的測(cè)定,烘箱干燥法[6]

平行測(cè)定2次,計(jì)算樣品水分的平均含量.

1.3.2 總黃酮含量的測(cè)定,亞硝酸鈉-硝酸鋁比色法[7]

1.3.2.1 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

精密稱取蘆丁(蕓香葉苷)對(duì)照品40 mg,置100 mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀釋到刻度,搖勻,即得.蘆丁對(duì)照品溶液的濃度為0.41 mg/mL.精密吸取蘆丁對(duì)照品溶液和供試品溶液0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 mL,分別置10 mL刻度試管中,加水1 mL,加5%亞硝酸鈉溶液1 mL,放置6 min(不斷振搖),加10%硝酸鋁溶液1 mL,放置6 min(不斷振搖),加4%氫氧化鈉溶液4 mL,搖勻,用蒸餾水定溶至10 mL,放置15 min.在分光光度計(jì)上500 nm處測(cè)定.

1.3.2.2 樣品溶液的制備及含量測(cè)定

選擇干凈馬齒莧,洗去塵土污跡.攤晾過夜,陰干表面水分.精密稱取經(jīng)洗凈、陰干的馬齒莧樣品15 g,再加入70%乙醇50 mL,置研缽中研磨,定溶至100 mL待測(cè).取定溶后的樣品液1 mL,按照1.3.2.1步驟在500 nm波長處測(cè)定吸光度.平行測(cè)定2次,計(jì)算樣品中總黃酮的平均含量.

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

黃酮類化合物主要有槲皮苷、楊梅樹素、香橙素、山柰素等.這些成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)中都含有—OH、—-==C-O等供電子體,在亞硝酸鈉的堿性溶液中,可與Al3+反應(yīng)產(chǎn)生高靈敏度的橙紅色配合物,具有特定的紫外吸收峰.按照2005版中國藥典中黃酮類成分的含量測(cè)定顯色系統(tǒng)NaNO2-Al(NO3)3-NaOH來進(jìn)行含量測(cè)定.經(jīng)擬合,蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為:y=12.069x+0.018 6,R2=0.999.在0.009～0.088 mg/mL范圍內(nèi),蘆丁質(zhì)量與吸光值呈良好的線性關(guān)系,可作為馬齒莧總黃酮含量測(cè)定計(jì)算依據(jù),見圖2.

2.2 不同生長階段馬齒莧全草、莖、葉中水分含量

不同生長階段馬齒莧全草、莖、葉中水分含量如圖3.由圖3可見,馬齒莧全草隨著生長期的延長水分含量逐漸降低,變化不明顯;馬齒莧莖隨著生長期的延長水分含量先升高后降低,變化不明顯;馬齒莧葉隨著生長期的延長水分含量逐漸降低.

2.3 不同生長階段馬齒莧全草、莖、葉中總黃酮含量

圖2 總黃酮定量標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.2 Standard curve of total flavonoids

圖3 不同生長階段馬齒莧全草、莖及葉中水分含量Fig.3 Water content of whole purslane,stems and leaves at different growth stages

不同生長階段馬齒莧全草、莖及葉中總黃酮含量見圖4.由圖4可見,馬齒莧全草、莖及葉中總黃酮含量隨著生長期的延長均逐漸降低,其中馬齒莧生長后期莖中總黃酮含量最低,馬齒莧生長前中期總黃酮含量差異不大.不同生長階段馬齒莧總黃酮含量的分布規(guī)律有一定的差異,生長初期的馬齒莧莖總黃酮含量比葉高,馬齒莧生長的中后期莖中總黃酮含量低于葉中總黃酮含量.

圖4 不同生長階段馬齒莧全草、莖及葉中總黃酮含量Fig.4 Total flavonoids content of whole purslane,stems and leaves at different growth stages

2.4 不同生長階段馬齒莧全草總黃酮含量與其他植物的比較

不同生長階段馬齒莧全草總黃酮含量與其他植物對(duì)比情況見表1.表1中,馬齒莧總黃酮百分含量p(以干物質(zhì)計(jì))計(jì)算公式如下:

式(1)中,m為不同生長階段馬齒莧鮮草總黃酮含量g/100 g,如圖4;w為水分含量,如圖3.

表1 不同植物品種總黃酮含量比較Tab.1 Comparison of total flavonoids content of different plant varieties

由表1可見,馬齒莧全草生長初期及中期的總黃酮含量均高于鎖陽、槐枝、杭白菊及側(cè)柏葉,生長后期總黃酮含量高于鎖陽而低于其他3種植物品種[8-11].由此可見,馬齒莧采收期以生長初期及中期為宜,此期間其有效成分總黃酮含量較高.文中報(bào)道的為總黃酮含量,由于黃酮類物質(zhì)有多種形式,不同形式對(duì)應(yīng)不同的藥效,因此有必要進(jìn)一步分析馬齒莧黃酮類物質(zhì)的具體形式[12].

3 討論和結(jié)論

不同生長階段馬齒莧總黃酮含量有差異,在生長初期馬齒莧肉質(zhì)鮮嫩多汁,總黃酮含量最高,生理活性最佳.不同植物體內(nèi)的總黃酮分布情況已有大量文獻(xiàn)報(bào)道,多數(shù)研究結(jié)果顯示,植物葉片中的總黃酮含量最高,推測(cè)葉片可能是合成或蓄積黃酮類物質(zhì)的主要組織[13-15].通過對(duì)不同生長階段馬齒莧全草、莖及葉中總黃酮含量進(jìn)行分析,葉片中的總黃酮含量在生長的中后期均高于莖的總黃酮含量,與文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)果基本一致.因此,在以總黃酮含量為指標(biāo)時(shí),宜采收馬齒莧生長前中期的全草、葉片及莖,采收各生長階段的馬齒莧葉可以制成馬齒莧葉保健茶等,進(jìn)行進(jìn)一步深加工.

參考文獻(xiàn):

[1] 解思友,逢美芳,孫艷,等.馬齒莧的化學(xué)成分與藥理作用最新研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代藥物與臨床,2011,26(3):212-215.

[2] 郭長江,徐靜,韋京豫,等.我國常見水果類黃酮物質(zhì)的含量[J].營養(yǎng)學(xué)報(bào),2008,30(2):130-135.

[3] 胡忠澤,楊久峰,譚志靜.柿葉黃酮對(duì)糖尿病小鼠降血糖作用及機(jī)制探討[J].營養(yǎng)學(xué)報(bào),2006,28(6):540-541.

[4] 楊武英,上官新晨,徐明生,等.青錢柳黃酮對(duì)α--葡萄糖苷酶活性及小鼠血糖的影響[J].營養(yǎng)學(xué)報(bào),2007,29(5):507-509.

[5] 曹群華,瞿偉菁,牛偉,等.沙棘黃酮對(duì)鏈脲佐菌素致糖尿病大鼠降糖作用[J].營養(yǎng)學(xué)報(bào),2005,27(2):151-154.

[6] 中華人民共和國衛(wèi)生部.GB 5009.3—2010食品中水分的測(cè)定[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2010.

[7] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:22.

[8] 趙超,陳華國,靳鳳云,等.槐枝中總黃酮的含量測(cè)定[J].光譜實(shí)驗(yàn)室,2010,27(1):190-191.

[9] 張立明,鄭傳莉,李思.紫外分光光度法測(cè)定鎖陽中總黃酮含量[J].科協(xié)論壇,2009,12:73-74.

[10] 盛煒煒,朱云龍.分光光度法測(cè)定杭白菊中總黃酮的含量[J].海峽藥學(xué),2009,21(12):99.

[11] 于生,單鳴秋,丁安偉,等.側(cè)柏葉炮制前后總黃酮的含量變化[J].現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐,2010,24(1):52-53.

[12] 劉榮華,邵峰,馬志林,等.山楂葉中總黃酮的含量測(cè)定方法研究[J].江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2007,19(6):37-40.

[13] 吳菊蘭,李維林,汪洪江,等.紅鳳菜和白子菜總黃酮含量的動(dòng)態(tài)變化[J].植物資源與環(huán)境學(xué)報(bào),2009,18(4):79-81.

[14] 任愛農(nóng),鞠建明.野菊不同部位的總黃酮含量測(cè)定[J].中草藥,1999,30(8):589--590.

[15] 金則新,李鈞敏,朱小燕.夏蠟梅總黃酮、總綠原酸含量及其環(huán)境因子相關(guān)性分析[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào):理學(xué)版,2007,34(4):459-464.