林玉甜,陳斌鋒(廣東省惠州市中心人民醫(yī)院輸血科 516001)
ABO血型抗體的減弱或消失多見于新生兒、老年人、免疫抑制疾病或免疫低下的患者[1]。日前作者發(fā)現(xiàn)1例因“支氣管擴張癥并雙肺感染”O(jiān)型患者因大量輸注抗生素導(dǎo)致抗-A、抗-B嚴(yán)重減弱并暫時消失,停止靜脈輸液3d后重抽標(biāo)本檢測,用傳統(tǒng)試管法抗體加強試驗4℃下30min后觀察結(jié)果,抗-A(+)、抗-B(+),現(xiàn)報道如下。
1.1 一般資料 患者,女,14歲,無月經(jīng)及輸血史?;颊哂?年前出現(xiàn)無明顯誘因反復(fù)咳嗽,曾多次在當(dāng)?shù)卦\所及本院治療,CT示“支氣管擴張癥并發(fā)雙肺感染”,1周前受涼后“因反復(fù)咳嗽、咳痰1年余,伴發(fā)熱1周”于2012年4月1日入住本院呼吸內(nèi)科,實驗室檢查白細(xì)胞:25.7×109/L,IgG含量降低,給予吸氧、經(jīng)驗性抗感染(噻嗎靈)解痙、平喘等治療14d后轉(zhuǎn)心胸外科擬“左下肺葉切除術(shù)”手術(shù)治療,術(shù)前行血型鑒定交叉配血時發(fā)現(xiàn)患者ABO血型正、反定型不符,正定型為O型,反定型為AB型。
1.2 儀器與試劑 Labofuge 300離心機(德國索福-賀利)、ID-Centrifuge 12sⅡ 離心 機、ID-lncabator37SI孵育 器、Liss/coombs、ID-DiaCell ABO及ABO正反定型卡/RhD定型卡(瑞士達(dá)亞美),ABO、RhD血型定型檢測卡及配套的離心機(長春博訊),單克隆抗-A、抗-B、抗-H血清(上海血液生物醫(yī)藥有限公司),放散試驗用6%牛血清清蛋白(上海澤龍生物工程有限公司),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ抗篩細(xì)胞(瑞士達(dá)亞美),Oc本科室自制。
1.3 方法 (1)微柱凝膠法采用達(dá)亞美卡和博訊卡兩種血型卡檢測。達(dá)亞美卡血型鑒定:50μL、0.8%A1、B反定細(xì)胞加入A1、B管中,再分別加入50μL血漿到A1、B管中;正定-A、-B、-D、clt4孔分別各加入10μL、5%紅細(xì)胞懸液,離心10min后判讀結(jié)果;博訊卡血型鑒定:50μL、0.8%A1、B反定細(xì)胞加入A1、B管中,再分別加入50μL血漿到A1、B管中;正定-A、-B、-D、clt4孔分別各加入50μL、1%紅細(xì)胞懸液,離心10min判讀結(jié)果。(2)試管法試驗:分別在4℃、室溫、37℃3種條件下同時進(jìn)行試驗。
2.1 患者ABO血型正、反定型結(jié)果顯示,正定O型,反定AB型,結(jié)果見表1、2。
表1 微柱凝膠法ABO正、反定型結(jié)果
2.2 由于血型正、反定型不相符,不能確定患者血型,繼續(xù)做吸收放散試驗,方法按文獻(xiàn)[2]操作。經(jīng)吸收放散試驗后,結(jié)果患者紅細(xì)胞上未檢出A、B抗原,正定為O型。
表2 試管法ABO正、反定型結(jié)果
2.3 考慮患者因疾病用藥而導(dǎo)致免疫低下的特殊性,建議患者停止靜脈補液3d后再重抽標(biāo)本。3d后重抽患者乙二胺四乙酸二鉀抗凝血3mL重復(fù)上述表1、2的試驗,微柱凝膠試驗(即卡式法)結(jié)果無改變,試管法4℃下抗體加強30min觀察結(jié)果,反定抗-A(+),抗-B(+),根據(jù)以上血清學(xué)試驗結(jié)果,患者血型正、反相符定為O型,與O型紅細(xì)胞4U行微柱凝膠交叉配血主次均無凝集,抗篩Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ全陰性。
ABO血型鑒定會受到多種因素的干擾,當(dāng)出現(xiàn)正、反不一致時,應(yīng)當(dāng)排除人為或試劑因素的干擾,再考慮以下幾種情況:(1)生理性因素;(2)臨床治療的影響;(3)疾病影響引起的血漿抗體異常[3]。從本例的血型血清學(xué)檢查及放散試驗結(jié)果分析,患者應(yīng)為抗體減弱,造成這一結(jié)果的原因在于:(1)感染本身會加重免疫抑制,IgG含量降低,而患者因感染每天大量使用抗生素(噻嗎靈),引起機體免疫力下降,干擾ABO反定型;(2)患者每天大量輸液,造成ABO抗體稀釋,結(jié)果造成抗體嚴(yán)重減弱并暫時消失,這一結(jié)論可以從患者停止補液和使用抗生素3d后抗體出現(xiàn)得出。從以上試驗方法可以看出,微柱凝膠技術(shù)血型正定型具有檢測敏感性高,特異性強,結(jié)果準(zhǔn)確、易于觀察、影響因素少等特點,特別是對抗原性較弱的嬰兒紅細(xì)胞抗原檢測更表現(xiàn)其優(yōu)越性[4],尤其是瑞士達(dá)亞美的血型卡,對ABO亞型更有它的優(yōu)越性。而在檢查抗體減弱方面與傳統(tǒng)的試管法有它的局限性,因其方法所用的血漿量少,即時離心看結(jié)果,當(dāng)出現(xiàn)抗原/抗體水平減弱時,就容易造成假陰性,表1結(jié)果證明了這一點。因此,當(dāng)出現(xiàn)上述情況時,可以用經(jīng)典的試管法,通過延長樣本反應(yīng)時間,增加劑量和降低反應(yīng)溫度的方法做進(jìn)一步鑒定,但一定要同時做Oc和自身C對照。因本例患者是擇期手術(shù)備血,有充裕的時間去鑒定最終的血型。如在搶救用血的情況下,患者因病情危急不能等待血型結(jié)果配血,則啟用緊急用血程序及規(guī)定,由臨床醫(yī)生申請,輸O型紅細(xì)胞,在血漿制品上,選擇AB型血漿、冷沉淀、冰凍機采血小板。
[1] 鄧永福,楊明清.臨床輸血實用技術(shù)[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,200726.
[2] 李勇,楊貴貞.人類紅細(xì)胞血型學(xué)實用理論與實驗技術(shù)[M].北京:中國科學(xué)技術(shù)出版社,1999:267-270.
[3] 蘭炯采,贠中橋,陳靜嫻.輸血免疫血液學(xué)實驗技術(shù)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2011:132-135.4 楊志誠,羅光禮,李萌.微柱凝膠技術(shù)在臨床血型鑒定和交叉配血中的應(yīng)用[J].浙江臨床醫(yī)學(xué),2008,10(12):1612-1613.