Cox-2和P-21蛋白在子宮內膜癌中的表達及意義

韋瑞紅 伍麗群 任帶嬌

（深圳市福田人民醫(yī)院婦產科，廣東 深圳 518033）

Cox-2和P-21蛋白在子宮內膜癌中的表達及意義

韋瑞紅 伍麗群 任帶嬌

（深圳市福田人民醫(yī)院婦產科，廣東 深圳 518033）

目的 探討子宮內膜癌中P-21蛋白和環(huán)氧化酶-2 （Cyclooxygenase-2，COX-2）的表達和意義。方法 采用免疫組織化學中的SP法對對照組中20例正常的子宮內膜組織患者、非典型增生組中的7例子宮內膜出現(xiàn)非典型增生組織患者以及子宮內膜癌組中的55例子宮內膜癌組織患者中P-21蛋白及COX-2的表達情況進行檢測。結果 與非典型增生組和子宮內膜癌組相比，對照組中患者P-21蛋白的陽性表達率顯著較高（P＜0.05），而對照組中Cox-2的陽性表達率顯著較非典型增生組和子宮內膜癌組低（P＜0.05）；在手術-病理分期和分化程度，以及淋巴結出現(xiàn)轉移等宮內膜癌組織的相關方面，P-21蛋白的陽性率具有明顯差異（P＜0.05）；Cox-2陽性率在子宮內膜癌組織的手術-病理分期、分化程度、肌層浸潤方面差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），子宮內膜癌組織P-21蛋白陽性表達率與Cox-2陽性呈負相關（r=-0.498，P=0.000）。結論 P-21蛋白和Cox-2異常表達可能在子宮內膜癌的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。

子宮內膜癌；P-21蛋白；Cox-2

在婦科，子宮內膜癌屬于常見的惡性腫瘤之一，在女性全身的惡性腫瘤中約占7%，在女性生殖道的惡性腫瘤疾病中占20%～30%，其發(fā)病率近年來一直呈現(xiàn)出升高的趨勢[1]。腫瘤的出現(xiàn)是多基因且多步驟的，其過程十分復雜，正常子的宮內膜細胞出現(xiàn)惡性轉化，發(fā)生、發(fā)展成為子宮內膜癌可由多種因素早成，例如激活癌基因、細胞周期出現(xiàn)調節(jié)紊亂及抑癌基因的失活等[2-3]。近年研究發(fā)現(xiàn)，COX-2參與了多種腫瘤的細胞增殖、抗凋亡和血管生成，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和預后密切相關[4]。P21蛋白與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及生物學行為密切相關，并且在基因治療方面有著廣闊的應用前景。因此本研究探討環(huán)氧化酶-2 （Cyclooxygenase-2, COX-2）與P21蛋白表達在子宮內膜癌的發(fā)生、發(fā)展，對該病的治療及其預后之間的相關性，其結果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本文選擇了自2001年10月至2011年10月來我院婦產科治療的55例子宮內膜癌病人，將其作為子宮內膜癌組，其年齡為35～72 歲,平均為（52 ±8）歲，患者在術前未接受放、化療和激素治療，在術后經組織病理證實患有子宮內膜樣腺癌。20例患者為高分化腺癌，21例患者為中分化腺癌，14例患者為低分化腺癌；在手術-病理分期方面，40例患者為Ⅰ～Ⅱ期，15例為Ⅲ～Ⅳ期；癌組織的肌層浸潤深度：32例患者為肌層浸潤≤1/2，23例患者為肌層浸潤＞1/2。51例患者術中接受盆腔淋巴結清掃手術，42例未出現(xiàn)淋巴結轉移，7例出現(xiàn)淋巴轉移，未做盆腔淋巴清掃患者4例。選擇同期門診20 例正常子宮內膜行刮宮的患者作為對照組，其年齡為（50±5）歲；7例子宮內膜出現(xiàn)非典型增生患者作為非典型增生組，其平均年齡為（51±8）歲。本文中所選患者在年齡等其他相關因素方面存在的差異，不具有統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 對免疫組織的化學檢測：本次研究中COX 2為即用型鼠抗人單克隆抗體、SP試劑盒以及鼠抗p21蛋白均由福州邁新生物技術開發(fā)公司提供，全部樣品均用含量為10%的中性福爾馬林進行固定，將常規(guī)脫水石蠟進行包埋切片4μm，將載玻片涂上多聚賴氨酸并將切片貼上，常規(guī)進行烘片脫蠟，并梯度乙醇直至蒸餾水化,用免疫組織的化學微波對切片予以修復，操作參考試劑盒說明。將已知的陽性切片作為陽性對照，用PBS替代一亢作為陰性對照。

表1 3組 Cox-2和P21蛋白表達情況

表2 P21蛋白和Cox-2表達與子宮內膜癌的臨床病理關系

1.2.2 結果判定：當腫瘤細胞漿呈現(xiàn)出棕黃色顆粒時，則COX 2為陽性，當細胞漿內和膜上呈現(xiàn)出棕黃色細顆粒時，p21蛋白染色為陽性。

1.3 統(tǒng)計學處理

研究中所得數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計學軟件包SPSS15.0進行統(tǒng)計學方面的分析，所有組間數(shù)據(jù)應用χ2檢驗，相關數(shù)據(jù)以均數(shù)標準差（）表示。以P＜0.05代表差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 3組 Cox-2和P21 蛋白的表達情況

本次研究顯示，與非典型增生組和子宮內膜癌組相比，對照組中患者P-21蛋白的陽性表達率顯著較高（P＜0.05），而對照組中Cox-2的陽性表達率顯著較非典型增生組和子宮內膜癌組低（P＜0.05），如表1所示。

2.2 P21蛋白及Cox-2 表達與子宮內膜腺癌的臨床病理關系

在手術-病理分期和分化程度，以及淋巴結出現(xiàn)轉移等宮內膜癌組織的相關方面，P-21蛋白的陽性率具有明顯差異（P＜0.05）；Cox-2陽性率在子宮內膜癌組織的手術-病理分期、分化程度、肌層浸潤方面差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

2.3 P21 蛋白與 Cox-2關系

子宮內膜癌組P-21陽性中Cox-2蛋白表達陽性者為43%，P-21蛋白陰性中Cox-2表達陽性者92%，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。P-21蛋白陽性表達率與Cox-2陽性表達率呈負相關（r=-0.498，P=000）。

3 討 論

3.1 P21位于人6號染色體短臂上，均長約2.1kb，編碼區(qū)共有495個核昔酸，系由164個氨基酸組成的相對分子質量為21KD的蛋白質，故又稱P21基因，P21蛋白即為P21基因的表達產物。目前P21蛋白是臨床已知的激酶抑制活性最為廣泛的細胞周期性抑制蛋白，其主要是在細胞周期調節(jié)中起到參與作用，對異常細胞的增生起到抑制功效，協(xié)調細胞完成對DNA損傷的修復。有學者研究指出[5]P21表達在子宮內膜增生及在子宮內膜增生內會出現(xiàn)減少或不表達現(xiàn)象，羅雪慧等報道在正常外陰、外陰尖銳濕疣、外陰癌的P21表達分別為75%、27.5%、26.5%。[6]從本次研究中可看出，對照組中的P21 蛋白的陽性表達率顯著較非典型增生組和子宮內膜癌組高，其差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），與以上學者的研究一致。由此表明在子宮內膜自良性到惡性的發(fā)展過程中，P21蛋白表達在非典型增生這一階段很可能已出現(xiàn)了變化，如果是形態(tài)學意義上的非典型增生伴隨P21蛋白表達減少，很可能就會發(fā)展成為子宮內膜癌。P21蛋白陽性率在子宮內膜癌組織的手術-病理分期、分化程度等方面差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），但在肌層浸潤方面的差異不具有統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。腺癌的陽性表達率在患病早期和高分化時較高，但隨著分期的提高和分化程度的不斷降低，腺癌的陽性表達率隨之下降。王瓊書等[7]研究指出，子宮內膜癌的細胞分化和P21的表達具有密切關系，這說明基因表達減弱引起細胞增殖，進而失去了有效監(jiān)控，使得腫瘤生長迅速。

3.2 環(huán)氧化酶-2（COX-2）是炎癥過程中催化前列腺素合成的一個關鍵誘導酶。是前列腺素合成過程中的重要限速酶。COX-2在大多數(shù)正常組織中不表達，但在細胞受到各種刺激如炎癥因子、生長因子、促癌劑等的誘導下迅速合成，參與炎癥過程和腫瘤的發(fā)生，對照組中Cox-2的陽性表達率顯著較非典型增生組和子宮內膜癌組低（P＜0.05），這說明COX-2可能參與腫瘤發(fā)生的起始階段。Lambropoulou等[8]的研究發(fā)現(xiàn)，COX-2在子宮內膜癌中的表達與FIGO分期密切相關，Ⅲ、Ⅳ期顯著高于Ⅰ、Ⅱ期；中低分化者顯著高于高分化者，伴有深肌層浸潤者顯著高于無肌層浸潤或僅淺肌層浸潤者。本次研究結果指出，在手術-病理分期和分化程度，以及淋巴結出現(xiàn)轉移等宮內膜癌組織的相關方面，COX-2的陽性率具有明顯差異（P＜0.05）；與文獻相符。有淋巴結轉移與無淋巴結轉移者相比稍高，差異無統(tǒng)計學意義，（P＞0.05），也不能完全排除與淋巴結轉移陽性的病例數(shù)較少有關。本次研究結果顯示，P21蛋白和COX-2的表達出現(xiàn)異常和子宮內膜腺癌的產生關系密切，并在發(fā)展過程中始終存在。P21蛋白和COX-2的表達存在相關性，呈現(xiàn)出負相關的關系，P21蛋白表達低的患者COX-2的表達高，并且細胞增殖的能力也高；這說明腫瘤細胞的增殖能力較強，這可能是和缺少P21蛋白有關，后者經直接或是間接作用提高了癌細胞具有的增殖活性。所以對P21蛋白與COX-2表達的聯(lián)合檢測對掌握子宮內膜癌所具有的生物學行為和對預后的判斷具有重要的參考價值。

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Expression and significance of Cyclooxygenase-2 and p-21 protein in endometrial cancer

WEI Rui-hong, WU Li-qun, REN Dai-jiao
(Department of Obstetrics and Gynecology, Futian People’s Hospital, Shenzhan 518033, China)

Objective To explore the expression and significance of p-21 and Cyclooxygenase-2 protein in endometrial cancer. Methods Immunohistoche mical SP method was used to detect the expressions of p-21 and Cox-2 protein in 20 cases of normal endometrium (control group ), 9 cases of endometrial atypical hyperplasia (atypical hyperplasia group) and 57 cases of endometrial carcinoma (endometrial cancer group) Results The positive rate of p-21 protein was obviously higher in control group than that in the other group(P＜0.05). The positive rate of Cox-2 protein in control group was obviously lower than that in the other groups(P＜0.05).The positive rate of p-21 protein was significantly different in operation stage ,pathology stage, differentiation degree and lymph metastasis(P＜0.05).The positive rate of Cox-2 protein was significantly different in operation stage, pathology stage, differentiation degree and Myometrial invasion(P＜0.05)In endometrial carcinoma group, the positive rate of p-21 protein was negatively correlated with the high proliferation rate of Cox-2 (r=-0.498, P=0.000) Conclusion The abnormal expressions of p-21 and Cox-2 protein may play an important role in carcinogenesis and development of endometrial cancer.

Endometrial cancer ; p-21 protein ; Cyclooxygenase-2

R737.33

B

1671-8194（2013）22-0046-03