對(duì)糖化血紅蛋白測(cè)定方法比較的分析

陳玉梅

（河南焦作市中醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 焦作 454150）

對(duì)糖化血紅蛋白測(cè)定方法比較的分析

陳玉梅

（河南焦作市中醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 焦作 454150）

目的 比較不同方法測(cè)定糖化血紅蛋白（HbA1c）的差異。方法 采集所有患者空腹 EDTA 抗凝全血 3mL，慢慢的將樣品混勻，取 10μL 的 EDTA 抗凝血加入 500μL 的溶血素進(jìn)行處理，靜置 15min，HbA1c、Hb 測(cè)定分別采用免疫抑制比濁法及離子交換層析法。結(jié)果 三組采用不同方法測(cè)定 HbA1c 結(jié)果及回歸方程比較均無明顯差異性，P＞ 0.05，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。145 份測(cè)定結(jié)果回歸方程：Y=0.9458X+0.3825，相關(guān)系數(shù)分別為 0.8052、0.9523、0.9685。本組 HbA1c 結(jié)果的系統(tǒng)誤差均在臨床可接受水平范圍內(nèi)。結(jié)論 HbA1c 測(cè)定采用免疫抑制比濁法及離子交換層析法，均能滿足臨床糖尿病患者的監(jiān)測(cè)需求。

糖化血紅蛋白

糖尿病患者在過去2～3個(gè)月內(nèi)的平均血糖濃度可由糖化血紅蛋白（HbA1c）準(zhǔn)確的反映出來，測(cè)定HbA1c是糖尿病患者長期監(jiān)控、避免發(fā)生并發(fā)癥或并發(fā)癥加重的重要方法之一，比血糖測(cè)定更具有準(zhǔn)確的臨床治療依據(jù)[1]。筆者通過免疫抑制比濁法及離子交換層析法兩種不同的方法對(duì)HbA1c進(jìn)行測(cè)定，并對(duì)測(cè)定結(jié)果比較與分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2012年1月至2012年10月新鮮的乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝全血標(biāo)本145份。HbA1c、Hb試劑、標(biāo)準(zhǔn)、質(zhì)控品均由北京利德曼公司提供，儀器為Backman全自動(dòng)生化分析儀LX-20型，Bio-Rad全自動(dòng)血紅蛋白分析儀及配套試劑

1.2 方法

采集患者空腹EDTA抗凝全血3mL，慢慢的將樣品混勻，取10μL的EDTA抗凝血加入500μL的溶血素進(jìn)行處理，靜置15min，HbA1c、血紅蛋白（Hb）測(cè)定分別采用免疫抑制比濁法及離子交換層析法，免疫比濁法計(jì)算HbA1c結(jié)果，而層析法采用全自動(dòng)血紅蛋白分析儀可直接對(duì)HbA1c結(jié)果進(jìn)行測(cè)定。根據(jù)HbA1c測(cè)定結(jié)果分為正常組、異常組、對(duì)照組，其中正常組為3%～6.0%，異常組為6.1%～14%，對(duì)照組為3%～14%。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS13.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)數(shù)資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)量型數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（χ—±s）檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用χ2檢驗(yàn)，如果P＜0.05，為有明顯差異性，提示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩種測(cè)定方法測(cè)定HbA1c結(jié)果比較，見表1。正常組、異常組、對(duì)照組采用免疫抑制比濁法、離子交換層析法測(cè)定HbA1c結(jié)果無明顯差異性，P＞0.05，不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 兩種測(cè)定方法測(cè)定HbA1c結(jié)果情況（χ—±s）

2.2 兩種方法測(cè)定HbA1c結(jié)果回歸分析情況，見表2。三組兩種方法結(jié)果的回歸方程比較均無顯著差異性，P＞0.05，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。145份測(cè)定結(jié)果回歸方程：Y=0.9458X+0.3825，相關(guān)系數(shù)分別為0.8052、0.9523、0.9685。

表2 兩種方法測(cè)定HbA1c結(jié)果回歸分析比較

2.3 臨床結(jié)果可接受性能：依據(jù)臨床使用要求，通過醫(yī)學(xué)決定水平的系統(tǒng)誤差對(duì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行判斷是否為可接受范圍，本組HbA1c結(jié)果的系統(tǒng)誤差均在臨床可接受水平范圍內(nèi)。

3 討 論

HbA1c是Hb與糖類通過非酶反應(yīng)結(jié)合而成，合成過程具有緩慢、不可逆的特點(diǎn)，血糖水平暫時(shí)性波動(dòng)也不會(huì)對(duì)其造影響[2]。人體形成的HbA1c含量隨著血液中葡萄糖水平的升高而提高，人體血液中HbA1c含量在紅細(xì)胞死亡前也會(huì)保持相對(duì)穩(wěn)定，所以，HbA1c的水平不受抽血時(shí)間、是否空腹、是否使用胰島素等因素的影響，是判定糖尿病患者長期控制的重要指標(biāo)[3]。HbA1c對(duì)早期糖尿病患者有重要的篩查意義，可作為輕度糖尿病、2型糖尿病及隱形糖尿病的早期診斷指標(biāo)；HbA1c在糖尿病治療中可準(zhǔn)確評(píng)價(jià)血糖控制情況，糖尿病未得到良好控制時(shí)，HbA1c水平會(huì)明顯升高；HbA1c是鑒別、診斷微小血管并發(fā)癥的重要指標(biāo)，可對(duì)糖尿病出現(xiàn)慢性并發(fā)癥及其發(fā)展?fàn)顩r進(jìn)行準(zhǔn)確評(píng)估。

臨床上微柱法離子交換層析法、免疫凝集法、親和層法及高分離度液相法等多種方法均可對(duì)HbA1c進(jìn)行測(cè)定方法較多[4]。高分離度液相色譜法是臨床檢測(cè)的參考方法，但所需儀器價(jià)格極高。Bio-Rad全自動(dòng)血紅蛋白分析儀采用的是非多孔陽離子交換液相色譜測(cè)定原理，分析儀通過三種不同濃度的緩沖液，可將Hb中的HbA1c等六種組成成分進(jìn)行分離與測(cè)定。全自動(dòng)血紅蛋白分析儀具有快速、簡便、準(zhǔn)確及精巧等優(yōu)點(diǎn)，確保了測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性與可信性，能從全血試管中自動(dòng)吸取標(biāo)本，隨后進(jìn)行稀釋與分析，3min內(nèi)可完成每個(gè)樣本的檢測(cè)，比其他分析儀較先進(jìn)。免疫抑制比濁法基本原理為當(dāng)抗原、抗體在特殊稀釋下以合適的比例進(jìn)行反應(yīng)時(shí)，自液相吸出形成的可溶性免疫復(fù)合物，形成微粒，造成反應(yīng)液發(fā)生濁度，從而經(jīng)檢測(cè)反應(yīng)液濁度與一系列標(biāo)準(zhǔn)品比對(duì)，計(jì)算出血液中HbA1c的含量，其方法具有檢測(cè)速度快、易操作性、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，可在全自動(dòng)生化分析儀上進(jìn)行自動(dòng)化分析。本組結(jié)果顯示，以上兩種方法測(cè)定HbA1c結(jié)果無明顯差異，回歸方程相關(guān)系數(shù)＞0.95，提示X的分布范圍適宜，可采用回歸統(tǒng)計(jì)的方法對(duì)二者間的系統(tǒng)誤差進(jìn)行分析與比較，本組HbA1c結(jié)果的系統(tǒng)誤差均在臨床可接受水平范圍內(nèi)。綜上所述，免疫抑制比濁法、離子交換層析法進(jìn)行HbA1c測(cè)定，均能滿足臨床糖尿病患者的監(jiān)測(cè)需求，各具優(yōu)點(diǎn)，測(cè)定結(jié)果具有可比性，適合臨床廣泛推廣應(yīng)用。

[1] 索艷,李強(qiáng).糖化血紅蛋白測(cè)定方法及影響因素的研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào),2010,23(2):104-107.

[2] 王瑤,譚煒.分析前標(biāo)本不同處理方式對(duì)糖化血紅蛋白檢測(cè)結(jié)果的影響[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2010,7(20) :46-48.

[3] 胡進(jìn)訪,吳雁.糖化血紅蛋白檢測(cè)方法學(xué)的研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)綜述,2010,16(13):133-136.

[4] 李曉莉.2型糖尿病患者血清糖化血紅蛋白檢測(cè)與分析[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥,2010,17(26):82-83.

R587.1；R446.1

：B

：1671-8194（2013）06-0212-02