類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎與EB病毒、巨細(xì)胞病毒的相關(guān)性分析

梁 鋼 張艮娟 梁玉霞

（廣東省肇慶市第一人民醫(yī)院，廣東 肇慶 526000）

類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎與EB病毒、巨細(xì)胞病毒的相關(guān)性分析

梁 鋼 張艮娟 梁玉霞

（廣東省肇慶市第一人民醫(yī)院，廣東 肇慶 526000）

目的 探討類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎與EB病毒、巨細(xì)胞病毒感染的相關(guān)聯(lián)系。方法 選取臨床已確診的82例類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者（RA組），與80例體檢健康者作為對(duì)照（對(duì)照組），檢測(cè)兩組人群血清中EB病毒抗體、巨細(xì)胞病毒抗體，樣本血清中游離的EB病毒DNA、巨細(xì)胞病毒DNA含量。結(jié)果 82例類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者中VCA-IgA、CMV-IgM的陽(yáng)性率分別為91.5%、45.1%，與之相應(yīng)的對(duì)照組陽(yáng)性率分別為4.9%、3.8%；然而在RA組患者血清中檢測(cè)到的EB病毒DNA、巨細(xì)胞病毒DNA陽(yáng)性率分別為8.5%、6.1%，與之相應(yīng)的對(duì)照組陽(yáng)性率分別為4.9%、3.8%。結(jié)論 EB病毒、巨細(xì)胞病毒與類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎相關(guān)，但其感染與類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)病無(wú)直接因果關(guān)系。

類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；EB病毒；巨細(xì)胞病毒

類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）是以對(duì)稱(chēng)性多關(guān)節(jié)炎為主要臨床表現(xiàn)的異質(zhì)性、系統(tǒng)性、自身免疫性疾病。在我國(guó)該病的患病率為0.32%～0.36%，略低于0.5%～1%的世界平均水平。RA的病因研究迄今尚無(wú)定論，MHC-Ⅱ抗原以及各種炎癥介質(zhì)、細(xì)胞因子、趨化因子在RA發(fā)病過(guò)程中的作用都被深入研究過(guò)，目前認(rèn)為一些感染因素（可能有細(xì)菌、支原體和病毒等）可能通過(guò)某些途徑影響RA的發(fā)病和病情進(jìn)展[1]。近年來(lái)，不斷有研究表明EB病毒、巨細(xì)胞病毒的感染與類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病情發(fā)展轉(zhuǎn)歸有一定的相關(guān)性。為此，我們選取本地區(qū)82例類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者作為研究對(duì)象，探究EB病毒、巨細(xì)胞病毒在RA的發(fā)病和病情進(jìn)展中的作用[2]?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

選擇2009年2月至2011年9月我院收治的類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者82例，其中男24例，女58例；年齡2l～78歲。根據(jù)相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)：①關(guān)節(jié)內(nèi)或周?chē)霈F(xiàn)晨僵超過(guò)60min；②2個(gè)以上關(guān)節(jié)區(qū)出現(xiàn)積液或軟組織腫；③腕、掌指、近端指間任意關(guān)節(jié)區(qū)出現(xiàn)關(guān)節(jié)區(qū)腫脹；④對(duì)稱(chēng)性關(guān)節(jié)炎及類(lèi)風(fēng)濕結(jié)節(jié)；⑤血清類(lèi)風(fēng)濕因子（rheumatoid factor，RF）呈陽(yáng)性；⑥X線片改變（至少有骨質(zhì)疏松和關(guān)節(jié)間隙狹窄）。出現(xiàn)上述幾項(xiàng)中的4項(xiàng)者即可診斷為RA。對(duì)照組為體檢健康者80人，年齡18～65歲，中位年齡48歲。

1.2 方法

采集患者5ml靜脈血，采集試管須干燥、潔凈，將樣本放入離心機(jī)中，取血清樣本并低溫保存，建議溫度為-20℃。采用IBL公司（德）所產(chǎn)試劑，采取ELISA（酶聯(lián)免疫吸附法）對(duì)血清VCA-IgA、CMV-IgM進(jìn)行檢測(cè)。血清游離EB病毒DNA、巨細(xì)胞病毒DNA檢測(cè)用PCR法進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒為上海雅吉生化試劑六廠生產(chǎn)，根據(jù)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)進(jìn)行相關(guān)操作。以熒光強(qiáng)度曲線為判斷標(biāo)準(zhǔn)，確定樣本達(dá)到臨界值的循環(huán)數(shù)值（Ct值）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，采用χ2檢驗(yàn)差異。

2 結(jié) 果

82例類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者中VCA-IgA、CMV-IgM的陽(yáng)性率分別為91.5%、45.1%，而對(duì)照組則分別為4.9%、3.8%，兩組患者的陽(yáng)性率差異顯著（P＜0.05）。詳見(jiàn)表1。

在RA組患者血清中檢測(cè)到的EB病毒DNA、巨細(xì)胞病毒DNA陽(yáng)性率分別為8.5%、6.1%，而對(duì)照組陽(yáng)性率分別為4.9%、3.8%，兩者的差異無(wú)顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表2。

表1 EB抗體、巨細(xì)胞病毒抗體陽(yáng)性率

表2 EB病毒、巨細(xì)胞病毒DNA陽(yáng)性率檢測(cè)結(jié)果對(duì)比

3 討 論

類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者因多次反復(fù)于炎癥的緩解和加劇的交替之間，常常會(huì)導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨及關(guān)節(jié)囊受到損傷，嚴(yán)重者可能引發(fā)關(guān)節(jié)強(qiáng)直畸形。目前醫(yī)學(xué)界普遍認(rèn)為RA發(fā)病與環(huán)境因數(shù)、遺傳易感性及免疫紊亂有關(guān)。研究結(jié)果表明，活化的CD4+Th細(xì)胞是病變滑膜中被浸潤(rùn)的淋巴細(xì)胞的主體[3]。另一方面，CD4+Th細(xì)胞有能夠產(chǎn)生多重生長(zhǎng)因子及細(xì)胞因子，從而使B細(xì)胞、各類(lèi)T細(xì)胞等免疫細(xì)胞及巨噬細(xì)胞被激活，這些被激活的細(xì)胞有能夠生成各類(lèi)引發(fā)炎癥或?qū)е陆M織降解的物質(zhì)。其中，IL-1和TGF-β會(huì)導(dǎo)致纖維母細(xì)胞及滑膜細(xì)胞的增殖，刺激滑膜組織和軟骨細(xì)胞分泌蛋白水解酶和基質(zhì)降解酶，使得關(guān)節(jié)軟骨及滑膜受損。

EB病毒，又稱(chēng)人類(lèi)皰疹病毒，引起傳染性單核細(xì)胞增多癥，并與伯基特淋巴瘤、鼻咽癌以及多種淋巴瘤的發(fā)生有密切關(guān)系，人類(lèi)普遍易感。由于EB病毒在感染人體后，就終生停留在B淋巴細(xì)胞中，多處在靜止期，偶有再次激活和復(fù)制。EB病毒感染人體后產(chǎn)生的VCA-IgG抗體將長(zhǎng)期存在于機(jī)體內(nèi)，故檢測(cè)此抗體無(wú)臨床診斷意義。而VCAIgA抗體是一種較特殊的抗體，研究發(fā)現(xiàn)在鼻咽癌和傳染性單核細(xì)胞增多癥患者血清中有較高的陽(yáng)性率，分別為82%和94%，在正常人中陽(yáng)性率僅為0%～6%，故認(rèn)為VCA-IgA抗體具有診斷價(jià)值。在上述實(shí)驗(yàn)中，可見(jiàn)RA患者VCA-IgA抗體陽(yáng)性率與對(duì)照組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明EB病毒感染與RA有相關(guān)性[4]。

巨細(xì)胞病毒（即CMV）分布極其廣泛，人畜都存在被其感染的風(fēng)險(xiǎn)。感染的常見(jiàn)區(qū)域?yàn)橹袠猩窠?jīng)系統(tǒng)、生殖泌尿系統(tǒng)及肝臟疾患等，感染程度也差異很大，有得為輕微無(wú)癥狀，而嚴(yán)重者可能會(huì)導(dǎo)致死亡。成人感染多為隱性感染，隱性感染巨細(xì)胞病毒在有害因素的刺激下，可被激活引起多系統(tǒng)、多臟器病變。在上述實(shí)驗(yàn)中，RA患者CMV-IgM抗體陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組，說(shuō)明巨細(xì)胞病毒的感染與RA也有相關(guān)性[5]。

但上述血清學(xué)檢測(cè)不能直接反映EB病毒、巨細(xì)胞病毒在人體內(nèi)的狀況。實(shí)時(shí)熒光定量PCR法是檢測(cè)EB病毒、巨細(xì)胞病毒DNA載量非常敏感的方法，用此法檢測(cè)該兩種病毒DNA載量，為我們分析兩種病毒在RA中的作用提供幫助。在上述兩組數(shù)據(jù)中，我們發(fā)現(xiàn)兩組血清游離EB病毒DNA、巨細(xì)胞病毒DNA陽(yáng)性檢出率無(wú)差異，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說(shuō)明EB病毒、巨細(xì)胞病毒的感染與類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)病無(wú)直接因果聯(lián)系。

[1] 莊健海,張勁豐,吳英,等.EB病毒感染與類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的相關(guān)性[J].廣東醫(yī)學(xué),2010,48(10):1277-1278..

[2] 張悅,王惠萱,楊光輝,等.類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者EB病毒感染及Th細(xì)胞激活的免疫學(xué)分析[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2006,21(1):66-67.

[3] 尹志華,葉志中,羅秀霞,等.EB病毒與類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的相關(guān)性分析[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2009,9(17):3294-3296.

[4] 劉金祿,王蕾,何曉峰,等.類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血清EB病毒衣殼抗原IgA抗體的臨床應(yīng)用[J].臨床薈萃,2011,26(23):2068-2069.

[5] 劉金祿,王蕾,何曉峰,等.EB病毒、巨細(xì)胞病毒與類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的相關(guān)性研究[J].河北醫(yī)藥,2011,40(24):3754-3755.

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1671-8194（2013）01-0189-02