腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子與抑郁癥及其執(zhí)行功能的關(guān)聯(lián)研究＊

吉 峰 戴媛媛 馮 玉 楊志寅

（1濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院山東省高校行為與健康人文社科基地，山東 濟(jì)寧272067；2新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院研究生院，河南 新鄉(xiāng)453003）

抑郁癥是精神科常見(jiàn)疾病之一，Song等［1］對(duì)北京大學(xué)及香港大學(xué)在校學(xué)生的一項(xiàng)調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)，抑郁癥的患病率為43.9%。我國(guó)學(xué)者在2010年對(duì)年齡在11～22歲的中國(guó)人口調(diào)查研究也發(fā)現(xiàn)，高達(dá)44.2%的人患有抑郁癥［2］。另外，大約1／3的抑郁癥患者對(duì)藥物治療不敏感，這不但增加了患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，也嚴(yán)重影響了患者的生活質(zhì)量。

目前的研究文獻(xiàn)顯示，抑郁癥普遍存在注意、短時(shí)記憶、執(zhí)行等認(rèn)知功能的損害［3－4］，而其中以執(zhí)行功能損害最為明顯。如一些研究結(jié)果證實(shí)成年重度抑郁障礙患者（Major Depression Disorder，MDD）急性階段存在執(zhí)行功能的損害［5］，并且這種損害在非用藥的抑郁癥患者中同樣存在［6］。而抑郁癥的認(rèn)知功能障礙會(huì)直接影響到臨床療效及疾病復(fù)發(fā)率，可能是患者神經(jīng)生物學(xué)異常的主要原因及對(duì)藥物治療不敏感的主要指標(biāo)［7］。如Burdick KE等研究也發(fā)現(xiàn)［8］，采用韋氏成人智力測(cè)驗(yàn)（Wechsler Adult Intelligence Scale，WAIS），在數(shù)字符號(hào)測(cè)驗(yàn)中，抑郁癥患者信息處理速度功能與社會(huì)功能明顯相關(guān)。因此，探討抑郁癥認(rèn)知損害的發(fā)病機(jī)制具有重要的理論及臨床價(jià)值。

腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（brain－derived neurotrophic factor，BDNF）廣泛表達(dá)于成人大腦中，在神經(jīng)元的分化、生長(zhǎng)、存活及損傷后的修復(fù)過(guò)程中均起著重要的作用。近年來(lái)，BDNF與抑郁癥及其認(rèn)知損害之間的關(guān)系越來(lái)越受到人們的關(guān)注。本研究旨在探討B(tài)DNF對(duì)抑郁癥及其執(zhí)行功能的影響，為研究抑郁癥執(zhí)行功能損害的發(fā)病機(jī)制提供一定的理論依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

病例組：選取2011年10月1日至2012年5月1日期間在山東省安康醫(yī)院住院的68例抑郁癥患者。其中，男性35人，女性33人；平均年齡（34.28±12.39）歲；平均受教育年限（8.75±3.53）年。入組標(biāo)準(zhǔn)：1）符合國(guó)際疾病傷害及死因分類標(biāo)準(zhǔn)第十版抑郁癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)一名精神科主治及以上職稱的醫(yī)師面談確診；首發(fā)、復(fù)發(fā)均可，吃藥者需經(jīng)過(guò)2周的藥物洗脫期；2）性別不限，年齡：16～60歲；3）小學(xué)及以上文化程度；4）血象、心、肝、腎功能正常；5）既往無(wú)腦外傷史，無(wú)酗酒、物質(zhì)濫用等行為。所有研究對(duì)象在知情同意的情況下，簽署知情同意書。

對(duì)照組：在社區(qū)隨機(jī)招募與病例組相匹配的正常人為對(duì)照組，抽樣時(shí)間為2011年10月1日至2012年5月1日，其中，男性39人，女性32人；平均年齡（31.27±9.91）歲；平均受教育年限（8.87±3.02）a。入組標(biāo)準(zhǔn)：①漢密爾頓抑郁量表評(píng)分﹤8分；其他入組標(biāo)準(zhǔn)同抑郁癥組②～⑤。所有研究對(duì)象在知情同意的情況下，簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 認(rèn)知功能的評(píng)估 病例組與對(duì)照組在入組當(dāng)天應(yīng)用WCST軟件評(píng)估受試者的執(zhí)行功能。主要分析指標(biāo)有：應(yīng)答數(shù)、分類數(shù)、正確數(shù)、錯(cuò)誤數(shù)、持續(xù)錯(cuò)誤數(shù)、非持續(xù)錯(cuò)誤數(shù)，其中，持續(xù)錯(cuò)誤數(shù)是顯示執(zhí)行功能（偶然性任務(wù)轉(zhuǎn)換能力）損害的最主要指標(biāo)，分類數(shù)則主要反映概念形成能力。

1.2.2 血清BDNF水平的檢測(cè) 在受試者未服用任何抗精神病藥物或已經(jīng)過(guò)2周藥物洗脫期的情況下，抽取清晨肘靜脈血3ml，置入5ml非抗凝管中，離心，收集血清，－80℃的冰箱凍結(jié)保存。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用人BDNF提取試劑盒采用雙抗體夾心（ELASA）法檢測(cè)血清BDNF濃度。

1.2.3 BDNF rs6265基因多態(tài)性的檢測(cè) 采用多聚酶鏈反應(yīng)－限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（PCRRFLP）方法對(duì)基因多態(tài)性進(jìn)行檢測(cè)。抽取清晨肘靜脈血2mL，置入5mL的2%EDTA抗凝管中，在－80℃的冰箱凍結(jié)保存。應(yīng)用北京天根生化科技有限公司提供的血液基因組DNA提取試劑盒（離心柱型）提取人外周血基因組DNA。從美國(guó)國(guó)家生物信息中心（National Center for Biotechnology Information，NCBI）的GenBank DNA庫(kù)中獲取基因位點(diǎn)的單核苷酸多態(tài)性信息。由上海生物工程有限公司根據(jù)多態(tài)位點(diǎn)上下游序列設(shè)計(jì)并合成PCR引 物。上 游：5′－CAAACATCCGAGGACAAGGT－3′；下 游：5′－AGAAGAGGAGGCTCCAAAGG－3′。PCR反應(yīng)條件：95℃預(yù)變性1min，95℃變性30s，53℃退火30s，72℃延伸1min，共35個(gè)循環(huán)。PmlI酶在37℃水浴箱中水浴過(guò)夜，切開(kāi)PCR產(chǎn)物。2%瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR產(chǎn)物及酶切產(chǎn)物。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理及分析。數(shù)據(jù)為正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)（M）及標(biāo)準(zhǔn)差（SD）表示，兩組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；非正態(tài)分布的計(jì)量資料以中位數(shù)及四分位數(shù)間距表示，兩組間比較采用兩獨(dú)立樣本非參數(shù)檢驗(yàn)（Mann－Whitney U檢驗(yàn)）；χ2檢驗(yàn)判斷多態(tài)位點(diǎn)的基因型分布是否符合Hardy－Weinberg遺傳平衡定律及進(jìn)行兩組基因型的比較；Pearson相關(guān)分析兩統(tǒng)計(jì)量的相關(guān)性。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組執(zhí)行功能、BDNF水平及多態(tài)位點(diǎn)基因型的比較

病例組應(yīng)答數(shù)、正確數(shù)、錯(cuò)誤數(shù)、持續(xù)錯(cuò)誤數(shù)、非持續(xù)錯(cuò)誤數(shù)明顯高于對(duì)照組（P＜0.05）；血清BDNF水平明顯低于對(duì)照組（P＜0.05）；BDNF rs6265多態(tài)位點(diǎn)基因型兩組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），主要表現(xiàn)為抑郁癥組蛋氨酸攜帶發(fā)生率明顯高于對(duì)照組；而完成分類數(shù)兩組無(wú)明顯差異（P＞0.05）。見(jiàn)表1、2。

表1 兩組執(zhí)行功能的比較（±s）

表1 兩組執(zhí)行功能的比較（±s）

組別 n 應(yīng)答數(shù) 正確數(shù) 錯(cuò)誤數(shù) 分類數(shù) 持續(xù)錯(cuò)誤數(shù) 非持續(xù)錯(cuò)誤數(shù)病例組68 90.72±25.01 67.18±14.87 23.54±15.49 5.71±0.88 10.82±6.60 12.72±12.59對(duì)照組71 74.08±19.68 58.58±11.42 15.51±10.41 5.93±0.35 6.25±4.28 9.25±6.55 t 4.25 3.81 3.57 1.95 4.82 2.02 P＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.05

表2 兩組BDNF血清水平及rs6265多態(tài)位點(diǎn)基因型的比較（n，%）

2.2 血清BDNF水平及rs6265多態(tài)位點(diǎn)對(duì)執(zhí)行功能的影響分析

血清BDNF濃度與分類數(shù)呈明顯正相關(guān)（r＝0.27，P＜0.05）；將抑郁癥患者按照基因型分為攜帶蛋氨酸組（7例）及非攜帶蛋氨酸組（61例）兩組，進(jìn)行非參數(shù)檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)兩組間WCST分析指標(biāo)中的非持續(xù)錯(cuò)誤數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其余無(wú)明顯陽(yáng)性發(fā)現(xiàn)。見(jiàn)表3、4。

表3 血清BDNF水平與抑郁癥執(zhí)行功能的相關(guān)性分析

表4 rs6265基因多態(tài)位點(diǎn)對(duì)執(zhí)行功能的影響分析

3 討論

執(zhí)行功能障礙是抑郁癥患者主要的認(rèn)知損害之一［6］，與其他認(rèn)知功能不同，執(zhí)行功能損害對(duì)治療療效及患者社會(huì)功能康復(fù)的影響更為廣泛。WCST涉及多個(gè)認(rèn)知功能，但主要用于評(píng)定受試者執(zhí)行功能中的抽象思維能力及偶然性任務(wù)轉(zhuǎn)換能力。目前采用WCST對(duì)抑郁癥認(rèn)知功能的研究發(fā)現(xiàn)，抑郁癥患者WCST的多個(gè)指標(biāo)均顯著低于對(duì)照組，而以“持續(xù)錯(cuò)誤數(shù)”及“完成分類數(shù)”最明顯，提示抑郁癥患者存在概念形成及轉(zhuǎn)換功能障礙。而這種損害會(huì)隨著治療的進(jìn)展逐漸改善，可能是一種狀態(tài)性的指標(biāo)，如Chang HH等［9］的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，在排除了練習(xí)效應(yīng)后，藥物治療6周的患者其完成分類數(shù)較用藥前明顯改善。本研究結(jié)果顯示，病例組應(yīng)答數(shù)、正確數(shù)、錯(cuò)誤數(shù)、持續(xù)錯(cuò)誤數(shù)、非持續(xù)錯(cuò)誤數(shù)明顯高于對(duì)照組（P＜0.05），與既往研究結(jié)果基本一致，提示抑郁癥患者存在抽象思維能力及偶然性任務(wù)轉(zhuǎn)換能力等執(zhí)行功能的損害。分析認(rèn)為，患者的思維遲緩及注意障礙等臨床癥狀可能是導(dǎo)致執(zhí)行功能損害的主要原因之一。

關(guān)于抑郁癥的發(fā)生機(jī)制，目前在研究精神心理因素及神經(jīng)生物化學(xué)因素的基礎(chǔ)上，“神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)及可塑性”理論越來(lái)越受到人們的關(guān)注，認(rèn)為抑郁癥的發(fā)生與中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)以BDNF為代表的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子缺乏及神經(jīng)可塑性減退有關(guān)［10］，因此，目前關(guān)于BDNF與抑郁癥之間關(guān)系的研究越來(lái)越多［11－12］，也提示BNDF基因可能是抑郁癥的一個(gè)主要易感基因之一。但Gyekis JP等［13］最近的一項(xiàng)meta分析卻發(fā)現(xiàn)，BDNF及其基因多態(tài)性與抑郁癥無(wú)關(guān)。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，抑郁癥患者血清BDNF水平明顯低于對(duì)照組，且BDNF rs6265多態(tài)位點(diǎn)基因型兩組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，主要表現(xiàn)為抑郁癥組Met發(fā)生率明顯高于對(duì)照組，與“神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)及可塑性理論”基本一致。目前認(rèn)為，腦內(nèi)5－HT能神經(jīng)元減少或活性降低是抑郁癥發(fā)病的主要機(jī)制之一，而B(niǎo)DNF則可以為膽堿能、多巴胺能、5－HT能等神經(jīng)元提供重要的營(yíng)養(yǎng)支持，蛋氨酸轉(zhuǎn)染的海馬神經(jīng)元分泌BDNF明顯減少［14］，促進(jìn)了抑郁癥的發(fā)生。

BDNF與抑郁癥之間的關(guān)系已基本明確，但與抑郁癥認(rèn)知功能的研究目前尚缺乏一定的一致性。Cardoner N等［15］對(duì)抑郁癥患者的研究發(fā)現(xiàn)，BDNF rs6265多態(tài)位點(diǎn)與患者大腦眶額葉皮質(zhì)體積及治療療效有關(guān)，且可影響遺忘型輕度認(rèn)知損害患者的執(zhí)行功能。另外，對(duì)精神分裂癥及癡呆患者的研究也顯示，BDNF水平可能與認(rèn)知功能有關(guān)［16－17］。但也有研究顯示，BDNF水平及其基因多態(tài)性與抑郁癥的認(rèn)知功能及臨床療效無(wú)關(guān)［18－19］，且關(guān)于老鼠抑郁模型的研究也證實(shí)了這一點(diǎn)［20］。本研究結(jié)果顯示，血清BDNF濃度與WCST中的分類數(shù)呈明顯正相關(guān)性（r＝0.27，P＜0.05），攜帶蛋氨酸的抑郁癥患者其非持續(xù)錯(cuò)誤數(shù)明顯低于非攜帶蛋氨酸組（z＝0.20，P＜0.05），提示BDNF與抑郁癥概念的形成及轉(zhuǎn)換能力有一定的相關(guān)性，可能參與了患者的抽象思維能力過(guò)程。分析其原因，可能是位于BDNF基因啟動(dòng)子上的rs6265多態(tài)位點(diǎn)對(duì)其前體蛋白的形成有重要作用，蛋氨酸使前體蛋白匯聚在核周，進(jìn)而影響認(rèn)知功能［21］。

本研究顯示，抑郁癥存在明顯執(zhí)行功能的損害，血清BDNF水平及BDNF rs6265多態(tài)位點(diǎn)基因多態(tài)性在抑郁癥及抑郁癥執(zhí)行功能損害的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起著重要的作用。

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