OPN和SCC-Ag在宮頸鱗癌組織中的表達及宮頸癌浸潤轉(zhuǎn)移的關(guān)系研究

孟秀云

OPN和SCC-Ag在宮頸鱗癌組織中的表達及宮頸癌浸潤轉(zhuǎn)移的關(guān)系研究

孟秀云

OPN；SCC-Ag；宮頸鱗癌；表達；宮頸癌浸潤

宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤，發(fā)病率位居第2位，僅次于女性乳腺癌[1]。大多數(shù)宮頸癌患者主要死于宮頸癌的復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移侵潤其它遠處組織而引起的一系列臨床繼發(fā)癥狀，而腫瘤臨床治療的難題也正是腫瘤的浸潤與轉(zhuǎn)移。醫(yī)學界研究認為多種生物因子在宮頸惡性腫瘤的外部浸潤轉(zhuǎn)移過程中，起了很大作用，因此明確這些因子的生物學基礎(chǔ)，對以后宮頸癌預(yù)后的判斷有重要的價值。骨橋蛋白（Osteopontin,OPN）是一種分泌型的磷酸化糖蛋白，有多種生物學活性，和成骨細胞的分化成熟、骨質(zhì)形成與吸收等有關(guān)；它含有Arg-Gly-Asp（RGD）序列，可與整合素CD44等受體相互作用，在細胞信號傳導、惡性細胞的趨化、黏附和遷移等方面起重要作用[2-3]。鱗狀細胞癌抗原（SCC-Ag）是子宮頸鱗癌較特異的腫瘤標志物，具有特異性高、敏感性較低的特點。本研究中采用酶聯(lián)免疫吸附劑測定技術(shù)即ELISA 方法測定兩個指標在宮頸正常組織、CIN、宮頸癌中的表達情況，現(xiàn)將結(jié)果匯報如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料2009年12月至2012年12月間，從本科室門診與病房收治的患者中挑選宮頸鱗癌的患者40例為A組，CIN患者40例作為B組，另外再挑選40例頸組織正常者作為對照C組。三組患者年齡均在24～62之間，無明顯差異，無可比性。

1.2 實驗方法首先準備組織樣品，用福爾馬林液固定組織24h，然后常規(guī)石蠟包埋，樣品制成后用ELISA方法測定OPN和SCC-Ag在三組患者中的表達情況。

1.3 結(jié)果判斷骨橋蛋白廣泛存在于各種組織和體液中，主要表達于宮頸癌細胞的細胞漿。根據(jù)酶聯(lián)免疫吸附劑測定技術(shù)最后顏色反應(yīng)的有無及深淺來檢測OPN在三組患者中的陽性表達率。同樣方法測SCC-Ag的表達情況。

1.4 統(tǒng)計學分析用SPSS 17.0統(tǒng)計學軟件分析處理所有的數(shù)據(jù)，計數(shù)資料率的比較，采用χ2檢驗，P＜0.05，認為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 OPN在宮頸正常組織C組、宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）B組、宮頸鱗癌A組三組患者中的陽性表達率依次升高，且惡性度越高，表達陽性率也越高，P＜0.05，認為差異有統(tǒng)計學意義，詳細結(jié)果見表1和表2。ELISA方法最后的顏色反應(yīng)深淺度與腫瘤的惡性程度成正相關(guān)，在A組中顏色反應(yīng)主要發(fā)生在癌細胞的胞質(zhì)和胞膜，B組中主要發(fā)生在異型細胞的胞質(zhì)和胞膜，C組中則主要發(fā)生在部分正常的宮頸上皮細胞。

表1 OPN在A、B兩個實驗組中的表達情況[n(%)]

表2 OPN在A、C兩個實驗組中的表達情況[n(%)]

2.2 經(jīng)ELISA方法得知SCC-Ag在A、B、C三組中的表達率依次降低，在宮頸鱗癌細胞中表達最多。

3 討論

宮頸癌是女性最常見的生殖道惡性腫瘤之一，且在發(fā)展中國家中所占比例更高，在當今社會生活中，嚴重威脅著女性的健康。近年來，由于醫(yī)療技術(shù)的進步和檢查治療手段的改進，宮頸癌得以早發(fā)現(xiàn)早治療，而多種環(huán)境和條件影響著宮頸癌的預(yù)后，比如自身癌組織的類型和異型性，是否有遠處的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，周圍是否有致癌癥發(fā)生的危險因素存在等。惡性腫瘤最主要的生物學特征是腫瘤的浸潤與轉(zhuǎn)移，轉(zhuǎn)移途徑有直接蔓延、血道、淋巴道等。據(jù)有關(guān)統(tǒng)計，60%以上的惡性腫瘤患者于初次診斷時已發(fā)現(xiàn)有轉(zhuǎn)移[4]。各種研究證實多種生物因子參與了這一過程的進展，比如骨橋蛋白OPN。

本研究采用 ELISA 方法測定OPN在具有正常宮頸組織、CIN、宮頸癌三個實驗組中的表達情況顯示A組中顏色反應(yīng)主要發(fā)生在癌細胞的胞質(zhì)和胞膜，B組中主要發(fā)生在異型細胞的胞質(zhì)和胞膜，C組中則主要發(fā)生在部分正常的宮頸上皮細胞，得知OPN的表達陽性率在癌細胞中最高，且隨著惡性程度的增高而升高，通過分析具有不同的分化程度、不同的臨床分期、不同腫瘤直徑、不同脈管入侵情況、不同肌層浸潤深度以及不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況的宮頸癌組織中OPN的表達差異，可以得出OPN的表達確實與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展、浸潤和轉(zhuǎn)移有相關(guān)性，這與骨橋蛋白的結(jié)構(gòu)和生物學特性有關(guān)。醫(yī)學界公認OPN為腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因，其在惡性腫瘤形成、侵襲和轉(zhuǎn)移的過程中發(fā)揮著重要的作用。這一研究結(jié)果也提示OPN的表達異?？勺鳛樵缙谠\斷宮頸癌、評估宮頸癌浸潤深度和淋巴轉(zhuǎn)移狀態(tài)、預(yù)測宮頸癌預(yù)后的有用指標。另外，OPN不僅在宮頸鱗癌組織中表達增加，而與其它多種腫瘤的形成、浸潤轉(zhuǎn)移、發(fā)展也有著密切的聯(lián)系，并被認為是判斷多種腫瘤預(yù)后的標志物。在婦科腫瘤中，如宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌[5]、卵巢癌中也可檢測出有OPN 的表達，對其的發(fā)現(xiàn)和研究為未來女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤的基因治療方面開拓了更加廣闊的應(yīng)用前景。鱗狀細胞癌抗原（SCC-Ag）是子宮頸鱗癌較特異的腫瘤標志物，是目前臨床上較為常用的子宮頸鱗癌的輔助診斷指標；對于術(shù)前臨床分期、預(yù)測腫瘤浸潤深度及盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況具有一定的參考價值，在評估治療效果、術(shù)后隨訪監(jiān)測，早期發(fā)現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā)等方面具有重要的臨床意義。但 SCC-Ag 作為宮頸癌的腫瘤標志物，具有特異性高、敏感性較低的特點。

OPN和SCC-Ag與宮頸癌浸潤轉(zhuǎn)移的關(guān)系還有待使用更多的方法和技術(shù)來研究證明和進行臨床統(tǒng)計學分析，以期在未來腫瘤的治療過程中做到早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療，不僅提高患者的治愈率，更以改善患者的生活質(zhì)量，提高患者的生活水平為目標。

[1] Rassalli J D, Baccino D, Belin D. A cellular binding site for the Mr 55000 form of the human plasminogen activator, urokinase[J]. Cell Biol, 1985,100(1)：86-92.

[2] Pyke C, Eriksen J, Solberg H, et al, An alternatively spliced variant of mRNA for the human receptor for urokinase plasminogen activator[J]. FEBS Letters, 1993,326：69-74.

[3] O’ Regan A, Berman J S. Osteopontin： a key cytokine in cellmediated and granulomatous inflammation[J]. Int J Exp Pathol, 2000,81(6)：373-390.

[4] Wong YF, Cheung TH, Tsao GS, et al. Genome-wide gene expression profiling of cervical cancer in Hong Kong women by oligonucleotide microarray[J]. Int J Cancer, 2006,118(10)：2461.

[5] 朱耀魁,屈洋,夏明翰,等.骨橋蛋白在子宮內(nèi)膜癌及子宮頸癌組織中的表達[J].中國病理生理雜志,2005,21(12)：241.

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