高效液相色譜法測定芪芍抗毒顆粒中黃芪甲苷的含量

韓 冬

高效液相色譜法測定芪芍抗毒顆粒中黃芪甲苷的含量

韓 冬

目的芪芍抗毒顆粒中黃芪甲苷的含量測定，建立制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法與結(jié)果在0.9～10.8μg范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，回歸方程Y=5.5969+1.7274X，r=0.9999；精密RSD為3.82%；穩(wěn)定性RSD為3.69%；重現(xiàn)性黃芪甲苷含量（mg/g）X=0.0974 RSD=4.14%；回收率黃芪甲苷X=98.47%，RSD=0.59%。結(jié)論芪芍抗毒顆粒中黃芪甲苷含量測定方法穩(wěn)定，可作為芪芍抗毒顆粒制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制指標(biāo)。

芪芍抗毒顆粒；黃芪甲苷；高效液相色譜法；含量測定

芪芍抗毒顆粒是由黃芪、芍藥等多味中藥組成。黃芪為方中君藥，黃芪甲苷為其主要成分，藥理研究證明黃芪甲苷具有扶正抗衰、抗病毒、增強(qiáng)免疫功能的作用[1]。黃芪中含有黃芪多糖、黃芪甲苷和多種氨基酸[2]。采用高效液相色譜法對黃芪甲苷的含量進(jìn)行測定[3]，已建立可控的芪芍抗毒顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

1 材料

1.1 儀器LC-10A高效液相色譜儀（島津）；電子分析天平（梅特勒）。

1.2 試劑甲醇，乙腈為色譜純；其余試劑均為分析純。

1.3 試藥對照品黃芪甲苷購于中國藥品生物制品檢定所。

2 方法與結(jié)果

2.1 供試品溶液的制備取本品10g，精密稱定，加甲醇100ml，加熱回流1小時，提取液回收溶劑并濃縮至干，殘渣加水50ml，微熱使溶解，用水飽和的正丁醇等體積萃取3次，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

2.2 色譜分析條件高效液相色譜儀：島津LC-10A。色譜柱：島津ODS-C18柱（4.6×250mm，5μm）流動相：以乙腈：水（32：68）為流動相；流速：1.0ml/min；檢測器：蒸發(fā)光檢測器

2.3 對照品溶液的制備對照品制備：取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.45mg的溶液，即得。

2.4 測定方法分別精密吸取對照品溶液10μl、20μl，供試品溶液20μl，注入高效液相色譜儀，用外標(biāo)兩點(diǎn)法對數(shù)方程計算，即得。

2.5 線性關(guān)系考察線性關(guān)系的考察和標(biāo)準(zhǔn)曲線：取黃芪甲苷對照品制成0.45mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別精密吸取2、6、12、18、24μl，注入高效液相色譜儀，測定色譜蜂峰面積，作濃度-積分面積的線性關(guān)系曲線，進(jìn)樣量在0.9～10.8μg范圍內(nèi)呈線性關(guān) 系，回歸方程Y=5.5969+1.7274X，R2=0.9999。

表1 黃芪甲苷線性考察數(shù)據(jù)

圖1 黃芪甲苷線性圖

2.6 精密度試驗(yàn)精密吸取對照品溶液10ul，重復(fù)進(jìn)樣5次，測定色譜峰峰面積，計算，黃芪甲苷峰面積平均值為2449349，RSD為3.82%。結(jié)果見表2。

表2 精密度測定

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)精密吸取供試品溶液10ul，每隔2小時進(jìn)一針，測定色譜峰峰面積，計算，黃芪甲苷峰面積平均值為2403152.2，RSD為3.69%。結(jié)果見表3。

表3 穩(wěn)定性測定

2.8 重現(xiàn)性試驗(yàn)取同一樣品，均分5份，精密稱定，分別按本品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)含量測定項(xiàng)下操作，測定，計算，結(jié)果見表4。

表4 重現(xiàn)性試驗(yàn)

2.9 回收率實(shí)驗(yàn)取已知黃芪甲苷含量的樣品（含量為0.0974mg/g）5g，共5份，精密稱定，分別精密加入黃芪甲苷約2.0mg，按本品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測測定項(xiàng)下操作測定，計算回收率，結(jié)果見表5。

表5 回收率試驗(yàn)(n=5)

2.10樣品含量測定數(shù)據(jù)及含量限度按本品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)含量測定項(xiàng)下的操作方法，測定三批樣品，每批測定2次，取其均值，列入表6。

表6 樣品含量測定結(jié)果

3 討論

通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，黃芪甲苷含量測定方法穩(wěn)定，制劑中黃芪甲苷含量可控，可用于芪芍抗毒顆粒質(zhì)量控制指標(biāo)，為大工業(yè)生產(chǎn)具有指導(dǎo)意義。

[1] 賈淑琴.黃芪的化學(xué)成分、藥理和臨床研究[J].天津藥學(xué),1994, 6(4)：48-48.

[2] 江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典[M].上海：上海人民出版社,1997：2037-2037.

[3] 中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中國藥典(Ⅰ部)[S].北京：化學(xué)化工出版社,2010：283-284.

HighPerformance Liquid Chromatography Astragaloside Content of Qishaokangdukeli

Han Dong

ObjectiveThe determination of content in astragaloside of Qishaokangdukeli, establish the quality standards of preparations.Methods or ResultsA linear relationship wihin the range of 0.9-10.8μg, regression equation Y=5.5969+1.7274X, r=0.9999; accurate RSD is 3.82%;stability RSD is 3.69%; the reproducibility astragaloside content (mg/g) X=0.0974, RSD=4.14%; Recoveries of astragaloside X=98.47%, RSD=0.59%.ConclusionThe stable in determination of astragaloside of Qishaokangdukeli,can be used as preparation quality standards control indicators in Qishaokangdukeli.

Qishaokangdukeli; Astragaloside; HighPerformance Liquid Chromatography; Determination of content

R917

A

1673-5846(2013)06-0198-02

吉林省中研醫(yī)院藥劑科，吉林長春 130021