伊曲康唑?qū)嫌盟幬锼幋鷦?dòng)力學(xué)的影響機(jī)制初探

鄭 欣

伊曲康唑?qū)嫌盟幬锼幋鷦?dòng)力學(xué)的影響機(jī)制初探

鄭 欣

目的探討伊曲康唑?qū)嫌盟幬锼幋鷦?dòng)力學(xué)的影響機(jī)制，為臨床上安全合理地利用合成藥物提供依據(jù)。方法利用健康成人的肝細(xì)胞微粒體，將其分為加入不同濃度伊曲康唑的10個(gè)小組，濃度梯度為0.0、0.4、0.8、1.6、3.2μg/ml，每組做5個(gè)平行組，之后在其中五組加入肝細(xì)胞微粒體細(xì)胞色素的P450的同功酶1A2的底物非那西丁，在另外五組中加入同工酶3A4的底物睪酮，測(cè)量不同伊曲康唑下的同功酶1A2和3A4的相對(duì)活性。結(jié)果各濃度伊曲康唑組對(duì)同功酶1A2作用效果無(wú)明顯差異，各濃度伊曲康唑組對(duì)同功酶3A4的作用較明顯，同功酶3A4的活性隨著伊曲康唑的濃度增大而減小，其減小到本實(shí)驗(yàn)的最大活性一半時(shí)的伊曲康唑的濃度為0.7μg/ml。結(jié)論伊曲康唑?qū)】党赡耆烁渭?xì)胞微粒體細(xì)胞色素酶同功酶1A2的活性無(wú)顯著影響；但是它對(duì)同功酶3A4的活性有明顯抑制作用，極大地影響了同功酶3A4對(duì)合用藥物藥代動(dòng)力學(xué)的各種參數(shù)。

伊曲康唑；合用藥物藥代動(dòng)力學(xué)；細(xì)胞色素同功酶1A2和3A4

多種藥物聯(lián)合使用，藥物間的相互作用是導(dǎo)致許多用藥患者產(chǎn)生不良反應(yīng)，嚴(yán)重的不良反應(yīng)甚至是導(dǎo)致死亡的最重要因素之一。據(jù)國(guó)外地研究所的一項(xiàng)調(diào)查報(bào)告顯示，藥物間的相互作用成為導(dǎo)致住院患者死亡的第五大原因。而近年來(lái)隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，越來(lái)越多的新藥上市被應(yīng)用到臨床治療方案中，也有越來(lái)越多的藥物聯(lián)合使用。多種藥物間的相互作用可以在攝取、代謝、排出等各種環(huán)節(jié)進(jìn)行，而藥物代謝之間的相互作用大多數(shù)是由細(xì)胞色素P450酶介導(dǎo)的。因而測(cè)定不同濃度的伊曲康唑?qū)?xì)胞色素P450酶家族中的cyp1a2和cyp3a4活性的影響就非常有必要了。

伊曲康唑（Itraconazole,ICZ）是一種親脂性三氮唑類廣譜抗真菌藥物，其作用機(jī)制是高選擇性地抑制真菌細(xì)胞的細(xì)胞色素酶[1]。筆者就不同濃度的伊曲康唑?qū)yp1a2和cyp3a4活性的影響以探討伊曲康唑?qū)嫌盟幬锼幋鷦?dòng)力學(xué)的影響機(jī)制，以期為臨床上安全合理地利用合成藥物提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料健康成人肝組織（肝組織供者年齡均在25～39歲，男女人數(shù)相等，均無(wú)肝膽疾病、肝炎病毒及其它病毒攜帶情況）。

1.2 儀器設(shè)備與試劑FA10004型電子天平，Phenomenex色譜柱，Agilent1100型高效液相色譜儀，高速離心機(jī)，T-VBA型二氧化碳培養(yǎng)箱等。試劑有辜酮、伊曲康唑、非那西丁、胎牛血清。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 制備肝細(xì)胞微粒體將冷凍的肝組織取出，放入勻漿緩沖液中解凍，然后將其剪成碎片，置于勻漿機(jī)中勻漿，之后放于高速離心機(jī)中于8000G離心35min，取上清液再于100000G條件下離心80min，去下層沉淀物，然后將其溶于勻漿緩沖液中，制備勻漿液中蛋白濃度為20mg/ml[2]。

1.3.2 cyp1a2和cyp3a4的活性檢測(cè)將制備好的微粒體溶液加入細(xì)胞培養(yǎng)板，分為十個(gè)組，其中五個(gè)為cyp1a2活性實(shí)驗(yàn)組，剩余的為cyp3a4活性實(shí)驗(yàn)組，且每一組設(shè)置五個(gè)平行實(shí)驗(yàn)組，然后各組分別加入0.0、0.4、0.8、1.6、3.2μg/ml的伊曲康唑溶液，然后將細(xì)胞培養(yǎng)板置于37℃ CO2濃度為7%的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1d[3]，之后，向cyp1a2活性實(shí)驗(yàn)組加入其相應(yīng)底物非那西丁，并向cyp3a4活性實(shí)驗(yàn)組加入其相應(yīng)底物睪酮，待反應(yīng)停止之后，用Agilent1100型高效液相色譜相儀對(duì)反應(yīng)代謝產(chǎn)物羥基非那西丁和6β-2羥基睪酮的含量進(jìn)行測(cè)定，其中色譜儀出峰的面積表示cyp1a2和cyp3a4的活性大小。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)用SPSS 13.0 軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料以來(lái)表示，兩組間采用t檢驗(yàn)；P＜0.05就表示兩組有差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。分組計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)[4]。

2 結(jié)果

2.1 與加入濃度為零的伊曲康唑溶液的實(shí)驗(yàn)組相對(duì)比，其它各濃度伊曲康唑溶液的cyp1a2活性實(shí)驗(yàn)組的羥基非那西丁的量無(wú)明顯變化，見表1。

2.2 與加入濃度為零的伊曲康唑溶液的實(shí)驗(yàn)組相對(duì)比，其它各濃度伊曲康唑溶液的cyp3a4活性實(shí)驗(yàn)組的6β-2羥基睪酮的含量變化較顯著，隨著伊曲康唑溶液濃度的增加，cyp3a4的相對(duì)活性也變小，見表2。

表1 不同濃度伊曲康唑溶液對(duì)cyp1a2活性影響的作用效果(±s)

表1 不同濃度伊曲康唑溶液對(duì)cyp1a2活性影響的作用效果(±s)

注：※與第一組比較，P＞0.05

藥物濃度峰面積酶相對(duì)活性(μg/ml)平行組組數(shù)(mAU·min)(%)0.05571.24±31.66100.00.45591.39±29.31103.5※0.85543.67±34.5195.1※1.65569.07±27.6599.6※3.25539.87±31.6994.4※

表2 不同濃度伊曲康唑溶液對(duì)cyp3a4活性影響的作用效果(±s)

表2 不同濃度伊曲康唑溶液對(duì)cyp3a4活性影響的作用效果(±s)

注：*與第一組比較，P＜0.05

藥物濃度峰面積酶相對(duì)活性(μg/ml)平行組組數(shù)(mAU·min)(%)0.05398.09±22.67100.00.45270.64±13.2568.0*0.85159.24±10.4540.0*1.6559.70±7.6515.0*3.2511.94±3.263.0*

3 討論

據(jù)本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)不同濃度伊曲康唑溶液對(duì)cyp1a2活性影響不明顯，表明臨床應(yīng)用劑量下伊曲康唑溶液對(duì)人肝細(xì)胞微粒體中的細(xì)胞色素P450酶的生物活性沒(méi)有抑制作用。而不同濃度伊曲康唑溶液對(duì)cyp3a4活性影響較大，并且隨著伊曲康唑溶液濃度的增加，cyp3a4的相對(duì)活性逐漸變小。原理是cyp3a4代謝過(guò)程中，其被睪丸酮特異性地利用，然后發(fā)生6β-2羥基化的反應(yīng)，這樣就可以通過(guò)色譜峰的面積變化而判斷出cyp3a4相對(duì)活性的變化。

伊曲康唑?yàn)閏yp3a4的強(qiáng)抑制劑（也是cyp3a4的底物），能使cyp3a4的底物如特非那定、阿司咪唑、西沙必利的血藥濃度升高，顯著延長(zhǎng)q-t間期，使一些敏感的患者最終成為尖端扭轉(zhuǎn)型室性心動(dòng)過(guò)速而導(dǎo)致死亡。因此，當(dāng)伊曲康唑和其它藥物合用時(shí)，應(yīng)密切注意作用時(shí)的血藥濃度，并加以適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，以免危害患者健康。

CYP450酶系的活性被抑制是多種藥物合用進(jìn)行代謝時(shí)，相互發(fā)生作用的重要機(jī)制。CYP450酶系許多種同工酶，其中cyp3a4的含量約占此酶系總量的40%，居于第一位，其直接參與了三十幾類共一百五十多種藥物在體內(nèi)的代謝；而cyp1a2的含量約占總量的百分之十幾，居于第二，其參與代謝的藥物就有二十幾類八十多種[5]；研究表明，如果藥物對(duì)cyp3a4的活性具有明顯影響的話，那么當(dāng)藥物與cyp3a4底物聯(lián)合應(yīng)用的時(shí)候，可能最終會(huì)導(dǎo)致藥物在臨床上使用時(shí)出現(xiàn)十分嚴(yán)重的藥物相互作用，導(dǎo)致各種不良反應(yīng)，重則危及生命。因而，cyp1a2和cyp3a4的活性測(cè)定在臨床上對(duì)合用藥物藥代動(dòng)力學(xué)的測(cè)定將起到非常重要的作用，對(duì)安全合理地利用合成藥物具有十分重要的指導(dǎo)意義。

[1] 賓馳,農(nóng)林林.伊曲康唑的研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)綜述,2010,16(8)：1234-1236.

[2] 劉振威,楊小亮,施東偉,等.伊曲康哇對(duì)合用藥物藥代動(dòng)力學(xué)影響的機(jī)制探討[J].中國(guó)臨床醫(yī)學(xué),2005,12(6)：1144-1146.

[3] 陳翔,錢華,羅婷婷.伊曲康唑?qū)】抵驹刚唧w內(nèi)維胺酯藥代動(dòng)力學(xué)影響[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào),2006,22(11)：1390-1393.

[4] 苗彩云,陳漪,陳江飛.伊曲康唑影響的藥代動(dòng)力學(xué)相互作用研究進(jìn)展[J].中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué),2009,14(10)：1183-1192.

[5] 劉振威,胡卓漢,蔡映云.異煙肼和利福平聯(lián)合用藥對(duì)健康成人原代肝細(xì)胞CYP450同工酶1A2和3A4活性的影響[J].中華結(jié)核和呼吸雜志,2005,28(11)：785-788.

Itraconazole to Share Mechanism of the Influence of the Drug Pharmacokinetic Study

Zheng Xin

ObjectiveTo study the pharmacokinetics of itraconazole combined drugs influence mechanism of dynamics,and provide basis for clinical rational use of synthetic drugs safety.MethodsUsing liver microsomes by healthy adult, divided into 10 groups with different concentrations of itraconazole, a concentration gradient is 0.0,0.4,0.8,1.6,3.2μg/ml, each doing 5 parallel groups, after the enzyme substrate 1A2 into the hepatocyte microsomal cytochrome five groups including P450 non phenacetin,joined the 3A4 isoenzyme in the five other groups in the substrate testosterone, relative activity measurements under different itraconazole isoenzymes 1A2 and 3A4.ResultsThe concentration of the itraconazole group had no significant difference in isoenzyme 1A2 effect, effect of the concentration of the itraconazole group of isoenzyme 3A4 is obvious, 3A4 isoenzyme activity decreases with increasing the concentration of itraconazole, reduced to concentrations of itraconazole maximal activity of the half when the 0.7μg/ml.ConclusionNo significant effect of active itraconazole for healthy adults of hepatocellular Microsome Cytochrome 1A2 isoenzyme; but had significant inhibition effect on 3A4 isoenzyme activity, greatly influences the isoenzyme 3A4 on drug pharmacokinetics parameters of dynamics.

Itraconazole combined drugs; Pharmacokinetics; Cytochrome 1A2 isoenzyme and 3A4

R96

A

1673-5846(2013)04-0056-03

深圳人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)部，廣東深圳 518020

鄭欣（1973.11-），女，山東泰安，主管藥師。