去松果體對(duì)老年大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響

田榮波

吉首大學(xué)醫(yī)學(xué)院，湖南吉首416000

去松果體對(duì)老年大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響

田榮波

吉首大學(xué)醫(yī)學(xué)院，湖南吉首416000

目的：探討去松果體對(duì)老年大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響。方法：摘除老年大鼠松果體后行Morris水迷宮測(cè)試。結(jié)果：與對(duì)照組相比，去松果體組穿環(huán)次數(shù)顯著性減少，逃避潛伏期及T象限游泳距離百分比無(wú)顯著性差異。結(jié)論：去松果體可降低老年大鼠學(xué)習(xí)記憶能力。

松果體；老年；學(xué)習(xí)與記憶

松果體位于上丘腦的韁連合后上方，以柄附于第三腦室頂?shù)暮蟛?，主要由松果體細(xì)胞及少量神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和一些間質(zhì)組成。其功能主要為分泌褪黑激素，其作用有：改善睡眠、調(diào)節(jié)生殖系統(tǒng)功能、增強(qiáng)免疫、抗腫瘤、抗氧化、清除自由基等。隨著年齡的增加，松果體逐漸鈣化，分泌能力降低，至老年時(shí)其分泌功能明顯低下，血液中褪黑激素深度顯著降低［1］。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)摘除老年大鼠松果體，觀察其學(xué)習(xí)記憶能力的改變，以探討在老年松果體鈣化后，松果體是否還能對(duì)學(xué)習(xí)記憶產(chǎn)生影響。

1 儀器與材料

Sprague－Dawley大鼠20只，18～20齡，購(gòu)于中山大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。隨機(jī)分為兩組，每組10只。動(dòng)物籠養(yǎng)，自由攝食飲水，晝夜交替環(huán)境。

江灣Ⅱ型腦立體定位儀，上海江灣儀器廠生產(chǎn)。Morris水迷宮，由中山大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院腦研究室自制。

2 方法

2.1 去松果體大鼠模型的建立去松果體術(shù)參照Kuszak報(bào)道的方法［2］。大鼠麻醉后固定于腦立體定位儀，在矢狀縫和人字縫交匯處打開(kāi)顱骨（大小約5mm*5mm），移開(kāi)骨瓣；用0號(hào)手術(shù)線于前后兩點(diǎn)分別結(jié)扎上矢狀竇，從兩點(diǎn)間剪斷上矢狀竇；沿上矢狀竇兩側(cè)向尾側(cè)挑破硬腦膜，游離并向尾側(cè)翻開(kāi)上矢狀竇，暴露竇匯下面的松果體，將其摘除，然后復(fù)位上矢狀竇，清洗創(chuàng)面，縫合皮膚。對(duì)照組步驟同上，但不摘除松果體。

2.2 水迷宮測(cè)試術(shù)后第17天開(kāi)始行Morris水迷宮測(cè)試。共測(cè)試5天，每天分上、下午兩次，每次分別記錄由四個(gè)象限入水到找到平臺(tái)的時(shí)間，即逃避潛伏期。如果120秒內(nèi)找不到平臺(tái)，將大鼠引上平臺(tái)，逃避潛伏期記為120秒（定位航行試驗(yàn)）。第5天下午撤去平臺(tái)，記錄大鼠由某一象限入水后兩分鐘內(nèi)的游泳軌跡，然后記數(shù)穿環(huán)次數(shù)，計(jì)算T象限游泳距離百分比（空間探索試驗(yàn)）。

2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析所有數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，進(jìn)行兩組間的t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 定位航行試驗(yàn)由圖1可知，各組逃避潛伏期多隨訓(xùn)練次數(shù)的增加而逐漸下降，以前兩次下降尤為明顯。去松果體組逃避潛伏期下降緩慢，且自第六次訓(xùn)練后，潛伏期不再減少。與對(duì)照組相比，去松果體組第四、八、九次逃避潛伏期顯著性增多（P＜0.05）。但總的來(lái)看其平均逃避潛伏期分別為：對(duì)照組45.73±22.08秒，去松果體組59.31±20.92秒，兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3.2 空間探索試驗(yàn)由表1可見(jiàn)：與對(duì)照組相比，去松果體組穿環(huán)次數(shù)顯著性減少（P＜0.05）。

表1 各組穿環(huán)次數(shù)及T象限游泳距離百分比

4 討論

研究發(fā)現(xiàn)摘除成年動(dòng)物（中青年）松果體后，其學(xué)習(xí)記憶能力下降［3－4］，本實(shí)驗(yàn)選用老年大鼠作為研究對(duì)象，發(fā)現(xiàn)摘除松果體后，老年大鼠的穿環(huán)次數(shù)明顯少于未摘除松果體者，部分訓(xùn)練次數(shù)的逃避潛伏期增加。說(shuō)明摘除老年大鼠松果體后，其空間學(xué)習(xí)記憶能力有所下降。提示老年大鼠的松果體雖大部分已經(jīng)鈣化，其分泌褪黑激素的數(shù)量明顯降低，且晝低夜高的節(jié)律也已消失［1］，但仍可以促進(jìn)機(jī)體的抗氧化，從而減輕神經(jīng)系統(tǒng)的損害，有助于學(xué)習(xí)記憶能力的保持。去除松果體以后，其分泌的褪黑激素減少，抗氧化作用降低，神經(jīng)系統(tǒng)更容易受到自由基等有害物質(zhì)的損傷，加快細(xì)胞凋亡，使得基底前腦膽堿能神經(jīng)元功能下降［3－5］，導(dǎo)致記憶能力下降。另一方面，摘除松果體對(duì)老年大鼠的平均逃避潛伏期、T象限游泳距離百分比并無(wú)明顯影響，這與成年動(dòng)物摘除松果體后的變化略有不同［3－4］，也提示在老年階段，因?yàn)樗晒w的鈣化，其分泌功能的明顯減退，使得其對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的保護(hù)作用比較有限，因此當(dāng)摘除松果體后，大鼠在空間學(xué)習(xí)記憶的某些方面與未摘除者相比，并無(wú)明顯差異。

［1］張昱，盧明鷗.褪黑素與睡眠、衰老及癡呆［J］.神經(jīng)疾病與精神衛(wèi)生，2003，3（4）：315－316.

［2］Kuazak J，Rodin MA.A new technique of pinealectomy for adult rats［J］. Experientia，1977，33（3）：283－284.

［3］袁群芳，何宏文，田榮波.摘除松果體對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶及基底前腦膽堿能系統(tǒng)的影響［J］.解剖學(xué)研究，2003，25（1）：30－32.

［4］Appenrodt E，Juszczak M，Schwarzbery H.Septal vasopression induced preservation of social recognition in rats was abolished by pinealectomy［J］.Behav Brain Res，2002，134（1）：67－73.

［5］李巖，孫圣剛，竇建明，等.去卵巢、去松果體對(duì)大鼠梨狀皮質(zhì)細(xì)胞凋亡的影響［J］.山東醫(yī)藥，2010，50（13）：30－31.

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1007－8517（2013）22－0079－01

2013.09.27）