卟啉為核的星形聚己內(nèi)酯-嵌段-聚乙二醇的合成及釋放性能

黃雅菲，戈延茹，戚雪勇，戴曉暉

(江蘇大學(xué)1.藥學(xué)院，2.化學(xué)化工學(xué)院，江蘇 鎮(zhèn)江 212013)

卟啉類化合物存在大π共軛結(jié)構(gòu)，在紫外可見區(qū)有強(qiáng)吸收，對(duì)光具有良好的靈敏性，而且具有腫瘤靶向性，對(duì)正常組織毒性小，可作為抗腫瘤光動(dòng)力治療(photodynamic therapy，PDT)的光敏劑［1］。但傳統(tǒng)的小分子卟啉存在較強(qiáng)的π－π及疏水相互作用，在生物體內(nèi)形成聚集體，造成其光量子效率低，即發(fā)生光自淬滅。因此，以卟啉為內(nèi)核，通過(guò)高分子功能化，再利用高分子自組裝，獲得含卟啉藥物核的靶向型高分子納米微粒，有望高效地把高濃度的光敏藥物遞送到病灶部位［2－4］。

我們以四(4-羥乙基苯基)卟啉為引發(fā)劑，通過(guò)開環(huán)聚合和酯化反應(yīng)制備了卟啉為核的星形聚己內(nèi)酯-嵌段-聚乙二醇［star-shaped porphyrin-cored poly(caprolactone)-block-poly(ethylene glycol)，SPPCL-b-PEO］。在該共聚物分子中，四臂大分子骨架可有效延緩卟啉內(nèi)核的自淬滅，在臨床癌癥治療中，能極大限度保留卟啉內(nèi)核的光動(dòng)態(tài)療效。而且親水聚乙二醇(polyethylene glycol，PEO)鏈段能有效改善疏水聚己內(nèi)酯(poly caprolactone，PCL)鏈段的高結(jié)晶度和疏水性［5－6］。這些特性使得該共聚物載藥納米微球滿足靶向給藥系統(tǒng)的要求。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

四(4-羥乙基苯基)卟啉的制備依照文獻(xiàn)［7－9］。單甲氧基聚乙二醇(monomethoxy polyethylene glycol，MPEO，Aldrich，Mn=2000/5000)、4-二甲氨基吡啶(4-dimethylaminopyridine，DMAP，Aldrich)、雙環(huán)己基碳酰亞胺(dicyclohexylcarbodiimide，DCC，上海國(guó)藥集團(tuán))真空干燥8 h后使用;異辛酸亞錫(SnOct2，Aldrich)、琥珀酸酐(succine anhydride，上海國(guó)藥集團(tuán))、1，4-二氧六環(huán)(1，4-dioxane，上海國(guó)藥集團(tuán))直接使用;ε-己內(nèi)酯(ε-caprolactone，百靈威科技有限公司)、甲苯(toluene，上海國(guó)藥集團(tuán))減壓蒸餾后使用;二氯甲烷(CH2Cl2，上海國(guó)藥集團(tuán))、三乙胺(上海國(guó)藥集團(tuán))加CaH2回餾12 h后蒸出。其他所有溶劑未經(jīng)說(shuō)明均不作任何處理。

凝膠滲透色譜(gel permeation chromatograph，GPC)由配有2根Mixed-B柱子(Polymer Lab公司，孔徑10 μm，柱子尺寸為300 mm×7.5 mm)的 Perkin-Elmer Series 200凝膠滲透色譜儀(美國(guó)鉑金埃爾默公司)測(cè)得;核磁共振譜(nuclear magnetic resonance spectrum，NMR)由Varian Mercury-400核磁共振譜儀(美國(guó)瓦里安公司)測(cè)得;紅外光譜(fourier transform infrared spectroscopy，F(xiàn)T-IR)由 Nicolet Nexus 470傅里葉變換紅外光譜儀(美國(guó)尼高力公司)測(cè)得;紫外可見光譜(ultraviolet visible spectroscopy，UV-vis)由N-2450高效紫外可見分光光度計(jì)(日本島津公司)測(cè)得;熒光激發(fā)光譜由Varian Cary Eclipse熒光分光光度計(jì)(美國(guó)瓦里安公司)測(cè)得;透射電鏡(transmission electron microscope，TEM)照片由 JEOL JEM-2100透射電子顯微鏡(日本電子公司)拍攝。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 共聚物的合成

1.2.1.1 卟啉為核的星型聚己內(nèi)酯［porphyrincored star-shaped poly(caprolactone)，SPPCL］的合成SPPCL24(聚合度和分子質(zhì)量的值見表1)的合成方法依照我們以前的文獻(xiàn)報(bào)道［10］。加 入 ε-CL(309 mg，2.71 mmol)和四(4-羥乙基苯基)卟啉(19.5 mg，0.023 mmol)于干燥的試管中，用翻口塞封口，抽真空通氮?dú)?次后放入120℃恒溫油浴鍋中磁力攪拌5 min，再用微量進(jìn)樣器加入含SnOct2(1.1 mg，2.75 μmol)的甲苯溶液，120 ℃ 下磁力攪拌反應(yīng)24 h。將試管冷卻至室溫，所得固體溶解于2 mL的CH2Cl2中，然后沉降于100 mL冰甲醇中。過(guò)濾后所得產(chǎn)物，在40℃下真空干燥至恒重。產(chǎn)量316.4 mg，產(chǎn)率96.3%。

1.2.1.2 端羧基化聚乙二醇(carboxyl-terminated monomethoxy polyethylene glycol，CMPEO)的合成制備過(guò)程依照文獻(xiàn)［11－12］，以CMPEO2000的合成為例。稱取 MPEO(Mn=2 000，2.0 g，1.0 mmol)，丁二酸酐(152.4 mg，1.5 mmol)，DMAP(123.2 mg，1.0 mmol)溶解于10 mL無(wú)水1，4-二氧六環(huán)中，然后加入三乙胺(140 μL，1.0 mmol)，室溫下攪拌反應(yīng)24 h。反應(yīng)混合液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)掉溶劑，將固體溶于少量CH2Cl2中，然后攪拌下逐滴沉降于100 mL冰乙醚中，產(chǎn)物過(guò)濾后，40℃下真空干燥至恒重。產(chǎn)量1.61 g，產(chǎn)率85.5%。

1.2.1.3 卟啉為核的星型聚己內(nèi)酯-嵌段-聚乙二醇(SPPCL-b-PEO)的合成 SPPCL-b-PEO是通過(guò)SPPCL 和 CMPEO 發(fā)生酯化反應(yīng)合成的［11－12］。以SPPCL24-PEO5000的合成為例，稱取 SPPCL24(Mn=11 356，113.6 mg，0.01 mmol)，CMPEO 5 000(Mn=5 000，225.0 mg，0.045 mmol)，DCC(16.3 mg，0.08 mmol)和 DMAP(1.9 mg，0.015 mmol)溶解于2.0 mL無(wú)水CH2Cl2中，室溫氮?dú)饬飨聰嚢璺磻?yīng)24 h。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)掉溶劑，將殘?jiān)苡谶m量 CH2Cl2中，然后沉降于冰乙醚中，過(guò)濾得粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物使用乙醚和苯混合溶液(2∶1，mol∶mol)純化，所得產(chǎn)物40℃下真空干燥至恒重。產(chǎn)量235.8 mg，產(chǎn)率75.2%。

1.2.2 大分子骨架對(duì)卟啉核的屏蔽效應(yīng)研究 依據(jù)文獻(xiàn)［13－15］，將 1，3-二苯基異苯并呋喃(1，3-diphenylisobenzofuran，DPBF)配制成濃度為 10－6mol/L的N，N-二甲基甲酰胺(DMF)溶液，同時(shí)將樣品四(4-羥基苯基)卟啉(THPPH2)、SPPCL24、SPPCL24-PEO5000分別配制成濃度為1.5×10－4mol/L的DMF溶液。取5 μL上述樣品溶液加入到5 mL上述DPBF溶液中，立即測(cè)定混合溶液在激發(fā)波長(zhǎng)(Ex)403 nm處的熒光激發(fā)光譜并記錄其熒光強(qiáng)度。然后用激光對(duì)其照射300 s，期間每30 s測(cè)定1次上述Ex處的熒光激發(fā)光譜并依次記錄相應(yīng)熒光強(qiáng)度。

1.2.3 SPPCL-b-PEO共聚物自組裝膠束的制備所有樣品的膠束溶液用透析法制備。具體操作如下:4 mg共聚物樣品溶解于1 mL DMF中，磁力攪拌下，用微量進(jìn)樣器將該溶液以10 μL/min的速度逐漸滴加到2 mL蒸餾水中，在室溫下繼續(xù)攪拌24 h使制備的聚集體平衡，然后裝入透析袋(截留分子質(zhì)量為7 000)，在1 L的蒸餾水中透析72 h除去DMF，每隔12 h換水1次。

1.2.4 藥物包載與釋放

1.2.4.1 多柔比星載藥納米微球的制備 用透析法制備負(fù)載多柔比星的SPPCL-b-PEO納米微球，制備方法參考文獻(xiàn)［16－17］。稱取10.0 mg SPPCL24-PEO5000溶解于 6.5 mL DMF，稱取 2 mg(3.4 μmol)鹽酸多柔比星(DOX-HCl)溶解于1 mL DMF并加入1.5倍當(dāng)量(5.1 μmol)的三乙胺中和，一段時(shí)間后，將兩溶液混合攪拌片刻。向溶液中滴加10 mL的磷酸鹽緩沖液(0.1 mol/L，pH 8.4)，攪拌24 h。將混合溶液裝入透析袋(截留分子質(zhì)量為7 000)，在1 L的蒸餾水中透析72 h，每12 h換水1次，除去DMF。最后通過(guò)冷凍干燥得到載藥納米粒子凍干粉。

1.2.4.2 包封率和載藥量的測(cè)定 稱取載藥膠束凍干粉1 mg溶于10 mL DMF中，通過(guò)UV-vis測(cè)定載藥量和包封率。多柔比星的檢測(cè)波長(zhǎng)為500 nm，對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線:D=0.020 2C+0.0037(R=0.999 8)。膠束的載藥量和包封率分別按以下公式計(jì)算:載藥量=微球中所含的藥量/微球的總質(zhì)量×100%;包封率=微球中所含的藥量/投入的總藥量×100%

1.2.4.3 負(fù)載多柔比星的SPPCL-b-PEO納米微球的體外釋放參考文獻(xiàn)［16-17］，將2 mg的負(fù)載多柔比星的SPPCL24-PEO5000納米微球溶解于2 mL PBS緩沖溶液 (pH 7.4/5.6)，然后放入透析袋中(截留分子質(zhì)量為7 000)，將透析袋浸入裝有10 mL PBS緩沖溶液的小瓶中，37℃下恒溫振蕩進(jìn)行釋放。每隔一定時(shí)間取出1 mL PBS溶液，并加入1 mL新的PBS溶液。用UV-vis分別測(cè)得不同時(shí)間點(diǎn)所取溶液的光密度，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)多柔比星的濃度，由以下公式計(jì)算累積釋藥量:

Er:多柔比星累積釋放量(%);Ve:PBS溶液的置換體積，1 mL;Ci:第i次置換取樣時(shí)釋放液中藥物的質(zhì)量濃度(μg/mL);V0:PBS釋放液的總體積，12 mL;mdrug:載藥膠束中多柔比星的質(zhì)量(μg);n:PBS溶液的置換次數(shù);Cn:第n次置換取樣時(shí)釋放液中藥物的質(zhì)量濃度(μg/mL)。

2 結(jié)果

2.1 SPPCL-b-PEO嵌段共聚物的合成

一系列的SPPCL-b-PEO共聚物通過(guò)兩步反應(yīng)得到。首先，四(4-羥乙基苯基)卟啉在SnOct2催化下，引發(fā)ε-CL單體的開環(huán)聚合(ring-opening polymerization，ROP)得到了結(jié)構(gòu)規(guī)整的星型端羥基聚己內(nèi)酯(SPPCL-OH)。然后，室溫下SPPCL-OH的末端羥基與CMPEO的末端羧基在DMAP/DCC催化體系下，直接發(fā)生酯化縮聚反應(yīng)生成了SPPCL-b-PEO。合成路線見圖1所示，n和m分別表示共聚物中PCL鏈段的重復(fù)單元數(shù)和PEO鏈段的相對(duì)分子質(zhì)量。

圖2是SPPCL和SPPCL-b-PEO的GPC曲線，均得到狹窄的單峰，隨著相對(duì)分子質(zhì)量增加，峰值向短流出時(shí)間方向移動(dòng)，說(shuō)明反應(yīng)具有良好的可控性。由GPC測(cè)定的聚合物的數(shù)均分子質(zhì)量Mn，GPC大于其理論相對(duì)分子質(zhì)量Mn，th(表1)，可能是因?yàn)樾切尉酆衔锏牧黧w力學(xué)體積與作為標(biāo)樣的線性聚苯乙烯不一樣引起的［18－19］。

圖3(1)為聚合物SPPCL的1H NMR譜圖，很明顯，位于 δ1.35 ～1.45(δH3)、δ1.55 ～1.79(δH2)、δ2.28 ～2.43(δH1)和 δ4.05 ～4.19(δH4)處出現(xiàn)了歸屬于PCL重復(fù)單元的典型質(zhì)子峰，位于 δ4.48(δH13)、δ4.64(δH12)、δ7.52(δH9)、δ8.11(δH10)和δ9.21(δH11)處出現(xiàn)了歸屬于卟啉核的典型質(zhì)子峰。除此之外，δ3.68處還出現(xiàn)了PCL鏈段末端的羥基亞甲基(HOCH2)的質(zhì)子信號(hào)峰(δH5)，該峰與卟啉核中任意質(zhì)子峰的積分面積之比均近似于1。這些都證明了在SnOct2催化下，四(4-羥乙基苯基) 卟啉能夠有效引發(fā)ε-己內(nèi)酯單體的本體開環(huán)聚合。

圖1 SPPCL-b-PEO共聚物的合成路線Fig 1 Synthesis of SPPCL-b-PEO copolymers

表1 SPPCL和SPPCL-b-PEO制備參數(shù)和相對(duì)分子質(zhì)量Tab 1 Preparation parameters and molecular weight data for SPPCL and SPPCL-b-PEO

圖2 SPPCL和SPPCL-b-PEO的GPC曲線Fig 2 GPC traces of SPPCL and SPPCL-b-PEO

SPPCL的實(shí)際分子質(zhì)量(Mn，NMR)與理論分子量Mn，th的值基本符合，具體值見表1。與SPPCL比較，共聚物SPPCL-b-PEO的1H NMR［圖3(2)］中出現(xiàn)了幾個(gè)新的質(zhì)子峰 δ2.67(δH6)、δ3.66(δH7)、δ3.39(δH8)。δH7和 δH8分別為 PEO 中重復(fù)單元和末端甲氧基(—OCH3)的質(zhì)子峰，δH6屬于共聚物PCL和 PEO連接處的亞甲基(—CH2—)質(zhì)子峰。PCL鏈段的端基信號(hào)峰(δH5)在SPPCL-b-PEO中完全消失了。比較SPPCL和SPPCL-b-PEO的13C NMR(圖4)，SPPCL-b-PEO 在 δ29.2和 δ70.3處分別出現(xiàn)了新的峰δhC和δiC，這些都是SPPCL-b-PEO的特征峰，而屬于 SPPCL的端基碳信號(hào)δgC(δ60.1)完全消失了。SPPCL-b-PEO 的 Mn，NMR與 Mn，th基本一致，具體值見表1。這些說(shuō)明該反應(yīng)有效合成了SPPCL-b-PEO。

圖5是聚合物SPPCL、CMPEO及共聚物SPPCL-b-PEO的FT-IR圖譜，可觀察到在1 734 cm－1和2 952 cm－1處分別出現(xiàn)了PCL的羰基(C==O)伸縮振動(dòng)峰和甲基(—CH3)/亞甲基(—CH2—)伸縮振動(dòng)峰。位于1 104 cm－1和2 882 cm－1處的信號(hào)峰分別歸屬于PEO中的醚鍵(O—C—O)和亞甲基(—CH2—)。此外，隨著PEO嵌段的接入及長(zhǎng)度的增加，羰基和甲基/亞甲基的峰信號(hào)逐漸減弱。

圖3 SPPCL(1)和 SPPCL-b-PEO(2)在 CDCl3中的1H NMR圖譜Fig 3 1H NMR spectra of SPPCL(1)and SPPCL-b-PEO(2)in CDCl3

圖4 SPPCL(1)和 SPPCL-b-PEO(2)在 CDCl3中的13C NMR圖譜Fig 4 13C NMR spectra of SPPCL(1)and SPPCL-b-PEO(2)

圖5 SPPCL，CMPEO和SPPCL-b-PEO的FT-IR圖譜Fig 5 FT-IR spectra of SPPCL，CMPEO and SPPCL-b-PEO

圖6是THPPH2、SPPCL24、SPPCL24-PEO5000在DMSO中和SPPCL24-PEO5000納米微球在H2O中的UV-vis圖譜，均在435 nm處出現(xiàn)B(soret)吸收和Q(500～700 nm)帶吸收，這些都屬于卟啉化合物典型的紫外吸收［10，20］。這表明 SPPCL 和 SPPCL-b-PEO仍然保留了卟啉的發(fā)光性能。這一潛在性能使SPPCL和SPPCL-b-PEO可作為生物探針和PDT光敏劑被應(yīng)用。

圖 6 THPPH2、SPPCL24、SPPCL24-PEO5 000在 DMSO中和SPPCL24-PEO5 000納米微球在H2O中的UV-vis譜圖Fig 6 UV-vis spectra of THPPH2，SPPCL24，SPPCL24-PEO5 000in DMSO and SPPCL24-PEO5 000 nanospheres in H2O

2.2 大分子骨架對(duì)卟啉核的屏蔽效應(yīng)

利用熒光探針法分別對(duì)THPPH2、SPPCL24、SPPCL24-PEO5000接受光照后的淬滅程度進(jìn)行了研究，DPBF由于具有較強(qiáng)的熒光活性被用作試驗(yàn)的熒光探針［13－15］。卟啉類化合物能在特定波長(zhǎng)激光照射下，受到激發(fā)而產(chǎn)生能量，能量傳遞給周圍的氧，生成活性很強(qiáng)的單態(tài)氧。活性氧對(duì)熒光具有淬滅作用。因此，混合溶液系統(tǒng)在接受特定波長(zhǎng)激光照射過(guò)程中，DPBF產(chǎn)生的熒光被卟啉產(chǎn)生的單態(tài)氧淬滅，導(dǎo)致DPBF熒光強(qiáng)度下降。如圖7所示，相同光照時(shí)間內(nèi)，加入含等量卟啉核的 THPPH2、SPPCL24、SPPCL24-PEO5000樣品后的混合溶液系統(tǒng)的熒光強(qiáng)度均減弱了，但變化程度(ΔI)卻有明顯的差別，ΔITHPPH2＞ΔISPPCL24＞ΔISPPCL24-PEO5000。這證明了大分子骨架對(duì)卟啉核具有保護(hù)作用，使其在光照下緩慢持續(xù)地釋放單態(tài)氧。這對(duì)于提高藥物在腫瘤組織中的保留時(shí)間，達(dá)到持久療效具有重要的臨床意義，并且克服了小分子卟啉在體內(nèi)易分散的缺點(diǎn)，從而降低對(duì)正常組織的毒性。

2.3 SPPCL-b-PEO共聚物自組裝行為

圖8是SPPCL-b-PEO共聚物膠束的TEM照片，可以明顯觀察到隨著共聚物中親水PEO鏈段質(zhì)量分?jǐn)?shù)的減小，共聚物自組裝膠束的形態(tài)由球狀逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)槿湎x狀。SPPCL24-PEO5000(fPEO=69.2%)自組裝形成了大小均一，尺寸大約50 nm的球狀膠束;SPPCL24-PEO2000(fPEO=44.2%)形成了蠕蟲狀膠束，這種特殊的形態(tài)是由于共聚物中PEO的質(zhì)量分?jǐn)?shù)降低，膠束親水表面中PEO鏈間斥力減少及表面張力增加，從而影響了系統(tǒng)親-疏平衡而導(dǎo)致膠束形貌的改變。

圖7 含THPPH2、SPPCL24和SPPCL24-PEO5000的混合樣品溶液中DPBF的熒光激發(fā)光譜(1～3)及熒光強(qiáng)度在不同光照時(shí)間下的變化曲線(4)Fig 7 Fluorescence excitation spectra(1－3)and dynamic curve(4)of fluorescence intensities under different illumination timeof DPBF solutions in DMF respectively including THPPH2，SPPCL24，SPPCL24-PEO5000

圖8 SPPCL-b-PEO共聚物的透射電鏡照片F(xiàn)ig 8 TEM photographs of SPPCL-b-PEO copolymers

2.4 藥物的負(fù)載與體外釋放

多柔比星是一種廣泛應(yīng)用于臨床的抗癌藥物，在負(fù)載多柔比星的SPPCL24-PEO5000納米微球的制備中，TEA用于中和鹽酸多柔比星中的鹽酸，使其變?yōu)槭杷嗳岜刃?，易與共聚物納米微球的親水表面相互作用，有利于負(fù)載。多柔比星的pKa=8.4，所以多柔比星在 pH 8.4的PBS溶液中可以得到13.8%的載藥量和80.8%的包封率。

負(fù)載多柔比星的載藥納米微球的體外釋放具有pH敏感應(yīng)。這是因?yàn)槎嗳岜刃窃趬A性環(huán)境中是以疏水性游離分子態(tài)存在，而在酸性環(huán)境中則處于水溶性的離子態(tài)。圖9為該載藥微球在pH 7.4和pH 5.6的PBS體系中的累積釋放曲線?？梢钥闯觯卺尫诺那?0 h，兩者都存在突釋;10 h以后，釋放曲線趨于平緩，藥物在介質(zhì)中緩慢釋放。但是多柔比星在兩種pH環(huán)境中的釋放量有明顯差別。在pH 7.4的介質(zhì)中，12 h內(nèi)釋放了20.8%，96 h的累積釋放量?jī)H為39.9%。而在pH 5.6的介質(zhì)中釋放速率明顯增大，12 h的釋藥量為43.2%，96 h已達(dá)到了73.4%。機(jī)體正常組織的pH值為7.4左右，而腫瘤組織的pH值為5～6。所以該納米載藥系統(tǒng)的釋藥特性有利于靶向于腫瘤細(xì)胞。

圖9 37℃下負(fù)載多柔比星的SPPCL24-PEO5000納米微球在pH7.4和5.6的PBS體系中的藥物釋放曲線Fig 9 Doxorubicin release curve of SPPCL24-PEO5000nanospheres in PBS solutions of pH7.4 and 5.6 at 37℃

3 討論

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)開環(huán)聚合和酯化反應(yīng)，成功合成了一系列以卟啉為核的星型兩親性SPPCL-b-PEO共聚物。該共聚物不僅具有兩親性骨架，可在水中自組裝形成膠束，還具有卟啉內(nèi)核，具有良好的光敏性和腫瘤組織的靶向性，且大分子PCL-PEO骨架能有效阻止卟啉核的自淬滅。此外，以該共聚物作為載體的負(fù)載多柔比星的納米微球，有較高的包封率和載藥量。實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)載藥納米微球的釋放具有pH敏感性，在酸性環(huán)境中能夠快速大量釋放藥物，而在堿性環(huán)境中絕大多數(shù)藥物仍然保留于載體中，有利于靶向腫瘤細(xì)胞。由于被載藥物可選擇性地在腫瘤細(xì)胞中釋放，而對(duì)正常組織影響較小，負(fù)載多柔比星的SPPCL-b-PEO共聚物納米微球符合抗腫瘤靶向給藥系統(tǒng)的要求。

［1］ Li F，Yang SI，Ciringh Y，et al.Design，synthesis，and photodynamics of light-Harvesting arrays comprised of a porphyrin and one，two，or eight boron-dipyrrin accessory pigments［J］.J Am Chem Soc，1998，120(39):10001 －10017.

［2］ Lai PS.Star-shaped porphyrin-polylactide formed nanoparticles for chemo-photodynamic dual therapies［J］.IFMBE Proceedings，2009，23:1447 －1450.

［3］ Aksenova NA，Oles T，Sarna T，et al.Development of novel formulations for photodynamic therapy on the basis of amphiphilic polymers and porphyrin photosensitizers.Porphyrin-polymer complexesin modelphotosensitized processes［J］.Laser Physics，2012，22(10):1642 －1649.

［4］ Wang X，Chai ZH，Ma RJ，et al.Enhancement of the photostability and photoactivity of metallo-meso-5，10，15，20-tetrakis-(4-sulfonatophenyl)porphyrins by polymeric micelles［J］.J Colloid Interf Sci，2012，388(1):80 － 85.

［5］ Deng MX，Chen XS，Piao LH，et al.Synthesis of fourarmed poly(ε-caprolactone)-block-poly(ethylene oxide)by diethylzinc catalyst［J］.J Polym Sci Part A:Polym Chem，2004，42(4):950 －959.

［6］ Lu CF，Guo SR，Zhang YQ，et al.Synthesis and aggregation behavior of four types of different shaped PCL-PEG block copolymers［J］.Polym Int，2006，55(6):694 － 700.

［7］ Vestberg R，Nystrom A，Lindgren M，et al.Porphyrincored 2，2-bis(methylol)propionic acid dendrimers［J］.Chem Mater，2004，16(14):2794 －2804.

［8］ Adler AD，Longo FR，F(xiàn)inarelli JD，et al.A simplified synthesis for msso-tetraphenylporphine［J］.J Org Chem，1967，32(2):476 －476.

［9］ 李忠芳，王宇新，王亞權(quán).Meso-5，10，15，20-四(對(duì)羧基苯基)卟啉及其配合物的新合成方法［J］.山東理工大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，17(1):1 －7.

［10］ Dai XH，Dong CM，F(xiàn)a HB，et al.Supramolecular polypseudorotaxanes composed of star-shaped porphyrin-cored poly(ε-caprolactone)and α-Cyclodextrin［J］.Biomacromolecules，2006，7(12):3527 －3533.

［11］ Maglio G，Nese G，Nuzzo M，et al.Synthesis and characterization of star-shaped diblock poly(ε-caprolactone)/poly(ethylene oxide)copolymers［J］.Macromol Rapid Commun，2004，25(12):1139－1144.

［12］ Hua C，Dong CM.Synthesis，characterization，effect of architecture on crystallization of biodegradable poly(epsilon-caprolactone)-b-poly(ethylene oxide)copolymers with different arms and nanoparticles thereof［J］.J Biomed Mater Res A，2007，82(3):689－700.

［13］ Li ZY，Wang HY，Li C，et al.Porphyrin-functionalized amphiphilic diblock copolypeptides for photodynamic therapy［J］.J Polym Sci Part A:Polym Chem，2011，49(1):286－292.

［14］ Cheng Y，Samia AC，Meyers JD，et al.Highly efficient drug delivery with gold nanoparticle vectors for in vivo photodynamic therapy of cancer［J］.J Am Chem Soc，2008，130(32):10643 －10647.

［15］ Zhang LZ，Lin Y，Zhang YJ，et al.Fluorescent micelles based on star amphiphilic copolymer with a porphyrin core for bioimaging and drug delivery［J］.Macromol Biosci，2012，12(1):83 －92.

［16］ Gillies ER，F(xiàn)réchet JM.pH-Responsive copolymer assemblies for controlled release of doxorubicin［J］.Bioconjugate Chem，2005，16(2):361 －368.

［17］ Kwon G，Naito M，Yokoyama M，et al.Block copolymer micelles for drug delivery:loading and release of doxorubicin［J］.J Control Rel，1997，48(2/3):195 － 201.

［18］ Ren TB，Wang A，Yuan WZ，et al.Synthesis，self-Assembly，fluorescence，and thermosensitive properties of starshaped amphiphilic copolymers with porphyrin core［J］.J Polym Sci Part A:Polym Chem，2011，49(10):2303 －2313.

［19］ Zhang WL，He JL，Liu Z，et al.Biocompatible and pH-responsive triblock copolymer mPEG-b-PCL-b-PDMAEMA:synthesis，self-assembly，and application［J］.J Polym Sci Part A:Polym Chem，2010，48(5):1079 －1091.

［20］ Hecht S，Ihre H，F(xiàn)réchet JMJ.Porphyrin core star polymers:synthesis，modification，and implication for site isolation［J］.J Am Chem Soc，1999，121:9239 －9240.