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    金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基在細(xì)菌性食物中毒中的應(yīng)用

    2013-05-29 08:59:50林金麗梁玉潮梁衛(wèi)橋馮婉麗李銀鳳
    當(dāng)代醫(yī)學(xué) 2013年22期
    關(guān)鍵詞:葡菌金黃色細(xì)菌性

    林金麗 梁玉潮 梁衛(wèi)橋 馮婉麗 李銀鳳

    金黃色葡萄球菌是常見的食物中毒病原菌之一,為有效控制病原菌的發(fā)生和擴(kuò)散,準(zhǔn)確及時的檢測手段是預(yù)防和控制金黃色葡萄球菌傳播的關(guān)鍵。目前金黃色葡萄球菌傳統(tǒng)的檢驗方法(國標(biāo)法) 需要分離培養(yǎng)、鏡檢觀察、生化鑒定等多個步驟,檢測周期長,整個過程大約需要4~7 d,且操作復(fù)雜,已不能滿足細(xì)菌性食物中毒中病原菌快速檢測的現(xiàn)實需要[1]。而金葡菌顯色培養(yǎng)基中添加了針對金葡菌的選擇性色素,因而具有較高的特異性和靈敏度[2]。而且同常規(guī)培養(yǎng)基相比,能較好地消除假陽性。金葡菌顯色培養(yǎng)基僅需通過單一菌落的典型色彩即可進(jìn)行初步鑒定,大大提高了對金葡菌的檢出率。為探討顯色法的實用價值,本研究在用傳統(tǒng)方法處理細(xì)菌性食物中毒時,使用金葡菌顯色培養(yǎng)基同時進(jìn)行檢測,為金葡菌顯色培養(yǎng)基的應(yīng)用提供借鑒。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 選取自2011年3月-2012年3月間廣東省江門市新會區(qū)124 例可疑細(xì)菌性食物中毒患者作為研究對象,其中男性患者為73 例,女性患者為51 例,其中年齡最大的患者為72 歲,年齡最小的患者為5 歲。其中兒童患者為12 例。

    1.2 材料 金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基由法國科瑪嘉公司提供,快速革蘭氏染色液由環(huán)凱公司提供。

    1.3 方法

    1.3.1 金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基平板制備 稱取一定量的金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基干粉,倒入三角燒瓶中,緩慢倒入一定量的蒸餾水,攪拌均勻至瓊脂粉完全溶解,加熱至100℃,并按常規(guī)不斷攪拌,直至瓊脂完全溶解。將培養(yǎng)基水浴冷卻至48℃,在無菌操作臺中將培養(yǎng)基倒入已滅菌的培養(yǎng)皿中,待液體凝固后用封口膜將平皿封好,放置在4℃冰箱留用。

    1.3.2 患者嘔吐物等樣品金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)的檢驗 將采集送檢食物中毒患者的嘔吐物等樣品用滅菌后的生理鹽水進(jìn)行10 倍遞次稀釋,使用不同稀釋濃度的樣品進(jìn)行劃線接種,放置在37℃培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)24 h。肉眼觀察菌落顏色,然后挑取菌落涂片,使用快速革蘭氏染色液染色后進(jìn)行鏡檢和血漿凝固酶試驗,進(jìn)一步確認(rèn)結(jié)果。

    2 結(jié)果

    2.1 中毒患者資料 對發(fā)生食物中毒的患者資料進(jìn)行整理,結(jié)果發(fā)現(xiàn),在家里就餐中毒的情況比在外邊多,在家里發(fā)生中毒的情況一般是食用了存放過久的食物造成的中毒,而發(fā)生食物中毒例數(shù)最多的季節(jié)為夏季。見表1。

    表1 發(fā)生食物中毒患者的資料

    2.2 金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基檢測結(jié)果

    2.2.1 金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基菌落生長特征及診斷例數(shù) 葡萄球菌在金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基上菌落生長特征各有不同,單個菌落呈現(xiàn)的顏色也不相同,金黃色葡萄球菌在顯色培養(yǎng)基上菌落生長特征為紫紅色,其他細(xì)菌為藍(lán)色、無色或奶油色。在124 例細(xì)菌性食物中毒患者中,檢測到金黃色葡萄球菌的患者例數(shù)為25 例。

    2.2.2 血漿凝固酶試驗結(jié)果 使用血漿凝固酶試驗驗證結(jié)果,將血漿凝固酶驗證試驗與金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基方法所得結(jié)果進(jìn)行比較,兩者的準(zhǔn)確率均為100%,可以得出金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基方法準(zhǔn)確率較高,見表2。

    表2 血漿凝固酶驗證實驗與顯色培養(yǎng)基方法比較

    2.2.3 金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基在不同樣品中金葡菌的檢出率 使用金葡菌顯色培養(yǎng)基檢測細(xì)菌性食物中毒患者的不同樣品,嘔吐物、咽拭子和肛拭子均檢出金葡菌,其中嘔吐物的檢出率最高,見表3。

    表3 金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基在不同樣品中金葡菌的檢出率

    3 討論

    使用金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基方法檢測,金黃色葡萄球菌呈紫紅色,其他細(xì)菌為藍(lán)色、無色或奶油色,肉眼容易區(qū)分和鑒別,124 例可疑細(xì)菌性食物中毒患者的金葡菌檢測傳統(tǒng)法與顯色培養(yǎng)基法結(jié)果一致,鑒定的靈敏度和特異性與葡萄球菌血平板法這種常規(guī)檢驗方法無顯著差異。金葡菌顯色培養(yǎng)基對患者的不同樣品均能檢出,說明這種培養(yǎng)基受不同樣品中其他物質(zhì)的干擾較少。這種方法不但簡化了分離培養(yǎng)鑒定程序,而且加快了檢測的速度,對細(xì)菌性食物中毒患者得到及時和正確的治療爭取了時間,顯色培養(yǎng)基是有價值的分離鑒定平板,可以作為傳統(tǒng)平板的補(bǔ)充,顯色培養(yǎng)基在微生物檢測中的應(yīng)用,可大大提高測效率,滿足應(yīng)急需要[3-5]。

    綜上所述,金葡菌顯色培養(yǎng)基有易于鑒別,選擇性好,優(yōu)勢遠(yuǎn)大于普通培養(yǎng)基的選擇性,特別是突發(fā)公共衛(wèi)生事件處理中和有混合菌的金葡菌處理中,顯色培養(yǎng)基是首選的,并能取得較好的結(jié)果。將顯色培養(yǎng)基與傳統(tǒng)檢測方法結(jié)合對食源性致病菌進(jìn)行快速檢驗已成為微生物快速檢測技術(shù)發(fā)展的重要方向。

    [1]吳清平,周艷紅,蔡芷荷.衛(wèi)生微生物特異性顯色培養(yǎng)基的研究與應(yīng)用[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2005,15(1):124-126.

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    [5]高濤.食品中金黃色葡萄球菌腸毒素及檢測方法的研究進(jìn)展[J].福建分析測試,2003,12(2):1775-1778.

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