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    正交試驗優(yōu)選五倍子軟膏處方

    2013-05-07 06:50:24楊躍輝
    實用藥物與臨床 2013年4期
    關鍵詞:蜂蠟五倍子軟膏

    王 磊,程 嵐,楊躍輝

    五倍子(Galla chinensis),為不同的倍蚜科Pemphigidae昆蟲在其寄主植物漆樹科或其他樹上不同的特定部位形成的蟲癭[1]。在我國四川、貴州、陜西、云南、湖南、湖北6省產量較高,占全國總產量90%以上[2]。五倍子中的主要有效成分為鞣質[3],為我國傳統(tǒng)中藥,具有斂肺降火、澀腸止瀉、固精縮尿、止汗、止血、解毒、斂瘡等多種功效?,F(xiàn)代藥理研究證明,五倍子還有抗菌、抗病毒、抑突變、癌化學預防、清除自由基、抗氧化、收斂等作用[4]。根據(jù)臨床需要,我們研制了五倍子提取物軟膏劑,并采用正交設計法進行了處方優(yōu)化,為五倍子外用制劑研究提供參考。

    1 儀器、試藥及色譜條件

    1.1 藥品與試劑 五倍子(豪州市中藥飲片廠,批號:1202011)、凡士林(沈陽紅旗制藥有限公司,批號:1202011)、羊毛脂(湖南爾康制藥有限公司,批號:20110501)、蜂蠟(國藥集團化學試劑有限公司,批號:20100910)、span-80(國藥集團化學試劑有限公司,批號:F20080203)、甘油(南昌白云藥業(yè)有限公司,批號:20111211)、薄荷醇(國藥集團化學試劑有限公司,批號:F20110811)。

    1.2 儀器 T1000型電子天平(美國雙杰兄弟有限公司)、LD5-2A型離心機(北京醫(yī)用離心機廠)、SK2105多功能電磁爐(美的)、HN101-2AS型數(shù)顯不銹鋼電熱鼓風干燥箱(南通滬南科學儀器有限公司)、恒溫水浴鍋(金壇市瑞華儀器有限公司)、冰箱(海爾)、R2000型流變儀、安捷倫1100高效液相色譜儀。

    2 方法與結果

    2.1 處方工藝(軟膏制備)

    2.1.1 處方有效成分的提取與精制 五倍子提取液制備[5]:將200 g五倍子打碎,加6倍量蒸餾水煎煮,提取2次,每次煎煮2 h,合并提取液,過濾,濾液濃縮至相對密度為1.02(50℃)以上。

    2.1.2 五倍子軟膏的處方及工藝 配制方法:根據(jù)處方,五倍子提取液、凡士林、羊毛脂、蜂蠟、span-80、甘油、薄荷醇共制成1 200 g軟膏。按表1的設計分別將油相、水相置于燒杯中,水浴加熱熔化至85℃,保溫,再將油相緩緩加入水相中,不斷攪拌成乳膏,冷凝,即得。主藥有3種加入方式:加入水相中;加入油相中;加入兩相之中。

    2.2 處方因素及其水平的選擇 在本配方中,五倍子軟膏由五倍子提取液、薄荷醇、凡士林、蜂蠟、羊毛脂、span-80、甘油組成。通過考察以上處方因素,確定了以蜂蠟、span-80、藥物加入方式為3個影響因素,每個因素安排3個水平,因此,本試驗按L9(34)正交表進行實驗,其中D列設計成空列,以便進行方差分析。實驗方案見表1。

    表1 因素水平表

    2.3 考察指標

    2.3.1 外觀考察 觀察膏體外觀性狀,包括稠度、色澤、細膩度、涂展性等。

    2.3.2 離心實驗 分別取各成品5 g,于10 mL離心管內,以3 000 r/min離心30 min,觀察軟膏分層情況。

    2.3.3 耐熱耐寒實驗 分別取各成品5 g,置于塑料軟膏盒內,盒外用塑料袋密封,分別置于45℃恒溫烘箱6 h,-18℃低溫冰箱24 h,觀察膏體變化情況。

    2.3.4 評分標準 根據(jù)“2.3”項考察指標對實驗結果進行評分,每項滿分20分,最后對各項得分進行加權綜合評分,滿分100分,評分標準見表2。

    表2 五倍子軟膏處方評分標準

    2.4 流變學參數(shù)測定[6]取五倍子軟膏適量,采用AR2000型流變儀的 Flow Curve Yield Fluid lin測試模式,剪切速率1~100/s,數(shù)據(jù)點100,測試溫度25℃,轉子PLATE。結果見圖1。

    圖1 五倍子提取物軟膏流變學測定

    2.5 正交實驗結果與分析

    2.5.1 試驗結果 五倍子提取物軟膏成品的外觀性狀觀察、離心實驗(3 000 rpm)與不同溫度下穩(wěn)定性考察結果,及其綜合評價見表3。

    表3 試驗方案與實驗結果

    2.5.2 結果分析 (1)直觀分析:水平優(yōu)劣依次為 A2>A3>A1、B3>B2>B1、C2>C3>C1,因素主次順序為 B>C>A。結果最佳處方為 A2B3C2。(2)方差分析:方差分析結果見表4。由方差分析結果可知,B、C因素對五倍子軟膏穩(wěn)定性具有顯著性影響,A因素對其穩(wěn)定性影響較小,主要是影響膏體的外觀性狀,影響順序為B>C>A。結合直觀分析和方差分析結果,確定最佳處方配比為A2B3C2,即:蜂蠟2%,span-80 4%,加藥方式加入油相。

    表4 正交試驗方差分析表

    2.5.3 流變學 結果表明,所制備五倍子提取物膏屬于假塑性流體,具有剪切變稀的特性;具有觸變性,觸變滯后回環(huán)面積較小,觸變測試過程中體系結構能恢復而未出現(xiàn)不可逆破壞;具有一定的黏性,能兼顧生產灌裝涂抹使用及穩(wěn)定性的要求。

    2.6 優(yōu)化處方的驗證 根據(jù)篩選結果,按最優(yōu)組方A2B3C2制備3批五倍子軟膏,按2.3項下考察指標進行試驗,以驗證五倍子軟膏的穩(wěn)定性。結果見表5。結果表明該處方工藝穩(wěn)定,重現(xiàn)性好,合理、可行。

    表5 優(yōu)選處方的驗證

    2.7 含量測定 經(jīng)實驗確定了以下色譜條件對以上3批軟膏采用HPLC法進行沒食子酸的含量測定。流動相:甲醇-1%磷酸水(5∶95,v∶v);流速:1.0 mL/min;檢測波長:273 nm;柱溫:30℃;進樣量:20 μL。結果3批軟膏沒食子酸含量測定的結果分別為55.57%、54.54%、53.52%。結果表明,五倍子軟膏含量穩(wěn)定,處方制備工藝合理可行。

    3 討論

    本組方為中藥W/O型乳膏劑,油性基質熔點較低,高溫易分層,而且乳劑儲存過程中也易出現(xiàn)乳析分層現(xiàn)象,針對其穩(wěn)定性較差的情況,采用離心分層、耐溫試驗、外觀性狀及流變學參數(shù)等作為穩(wěn)定性的考察指標,對軟膏處方工藝進行考察,同時測定了3批軟膏的主藥含量。

    采用正交設計實驗可以明顯減少試驗次數(shù),但數(shù)據(jù)統(tǒng)計過程較為復雜,故在試驗過程中,考察因素應選擇準確,并合理設置水平,保證試驗條件與操作平行性。正交實驗優(yōu)選結果表明,乳化劑的用量是配制五倍子提取物的關鍵,其比例為4%時配出的膏劑更加穩(wěn)定,外觀柔軟、細膩、光亮美觀;組方中主藥為中藥五倍子,而且五倍子提取物濃縮液粘度較大,其加入到基質中的方式對乳膏的穩(wěn)定性也有一定的影響;蜂蠟的用量主要影響軟膏的外觀,其用量對乳膏穩(wěn)定性的影響較小。該實驗優(yōu)選結果表明,最優(yōu)處方的成品不僅外觀優(yōu)良,且經(jīng)不同溫度下放置后外觀性狀較穩(wěn)定,符合中國藥典2010年版軟膏劑項下有關規(guī)定。

    [1] 馮淑萍,王曉娟,薛妮娜.五倍子生藥學研究[J].現(xiàn)代中藥研究與實踐,2008,22(5):24-26.

    [2] 李紅然,付大友.五倍子中有效成分提取方法研究進展[J].廣東化工,2010,37(10):71.

    [3] 周勁光.五倍子的藥理作用與臨床研究進展[J].海峽藥學,2010,22(4):30-32.

    [4] 李秀萍,李春遠,渠桂榮,等.五倍子的研究概況[J].中醫(yī)藥學報,2002,30(3):72-74.

    [5] 楊君,楊躍輝,姜清華.五倍子軟膏制備工藝優(yōu)化研究[J].中華中醫(yī)藥學刊,2011,29(11):2579-2581.

    [6] 關志宇,王森,管詠梅,等.黃連軟膏處方優(yōu)化與流變學考察[J].中國實驗方劑學雜志,2012,18(9):10-13.

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