HPLC測定大鼠血漿中1，8-二川芎嗪基大黃酸及其藥代動(dòng)力學(xué)研究

彭兆亮，李　潔，樊　玲，王雪琦，黃　鵬，栗進(jìn)才，汪電雷，，陳亞軍，王淑君，汪珊珊，張　悅

( 1．安徽中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，安徽合肥　230031;2．亳州職業(yè)技術(shù)學(xué)院，安徽亳州　236800)

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HPLC測定大鼠血漿中1，8-二川芎嗪基大黃酸及其藥代動(dòng)力學(xué)研究

彭兆亮1，李潔1，樊玲1，王雪琦1，黃鵬1，栗進(jìn)才2，汪電雷1，2，陳亞軍1，王淑君1，汪珊珊1，張悅1

( 1．安徽中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，安徽合肥230031;2．亳州職業(yè)技術(shù)學(xué)院，安徽亳州236800)

中國圖書分類號: R-332; R284. 1; R446. 11; R969. 1

摘要:目的建立測定大鼠血漿中1，8-二川芎嗪基大黃酸濃度的HPLC方法，并對大鼠尾靜脈注射給藥1，8-二川芎嗪基大黃酸后，研究其在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)。方法采用大黃素為內(nèi)標(biāo)，血漿樣品用甲醇沉淀蛋白后進(jìn)行HPLC分析，流動(dòng)相為甲醇－0. 1%甲酸水( 78∶22，V/V)，流速為1. 0 mL·min－1，檢測波長為275 nm。大鼠單劑量靜脈注射2、4、8 mg·kg－11，8-二川芎嗪基大黃酸后，測定給藥后不同時(shí)間點(diǎn)大鼠血漿中1，8-二川芎嗪基大黃酸的濃度，并對其血藥濃度－時(shí)間曲線采用DAS 2. 1軟件擬合，計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。結(jié)果1，8-二川芎嗪基大黃酸在0. 05－10. 00 mg·L－1血漿濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好( r = 0. 996 2)，定量下限為0. 05 mg·L－1，提取回收率均大于88%，日內(nèi)和日間差異RSD均小于6%，方法學(xué)考察均符合要求。1，8－二川芎嗪基大黃酸按2、4和8 mg·kg－1靜脈注射給藥后，在大鼠體內(nèi)的T1/2分別為( 68. 35±1. 36)、( 69. 32±2. 21)、( 69. 32±2. 03) min，AUC0－t分別為( 101. 03±24. 9)，( 144. 79±3. 29)，( 231. 92±19. 30) min·mg·L－1。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)所建立的HPLC方法操作簡便、快速、專屬性強(qiáng)，可用于1，8-二川芎嗪基大黃酸血藥濃度分析及其藥代動(dòng)力學(xué)研究。

關(guān)鍵詞:1，8-二川芎嗪基大黃酸; HPLC;大鼠;藥代動(dòng)力學(xué);血藥濃度;靜脈注射

栗進(jìn)才( 1981－)，男，碩士，講師，研究方向:中藥化學(xué)，通訊作者，Tel: 0558-5587006，E-mail: ahbanli@163．com;

汪電雷( 1977－)，男，博士，教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向:藥物代謝動(dòng)力學(xué)，通訊作者，Tel: 0551-68129153，E-mail: dlwang@ ahtcm．edu．cn

大黃酸屬單蒽核類1，8-二羥基蒽醌衍生物，含有2個(gè)羥基和1個(gè)羧基，是蓼科植物大黃、何首烏、虎杖等多種中藥的主要有效成分［1］。具有廣泛的藥理活性，例如抗腫瘤、抗炎、抗菌、調(diào)節(jié)腎功能等作用［2］。研究表明，大黃酸能抑制內(nèi)毒素誘生的大鼠巨噬細(xì)胞IL-12mRNA過度表達(dá)，能使［Ca2 +］濃度降低［3］。另有報(bào)道，大黃酸對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞內(nèi)白三烯C4、B8( LTC4、LTB4)的生物合成有較強(qiáng)的抑制作用，其IC50分別為0. 44、2. 78 μmol·L－1，并能提高巨噬細(xì)胞內(nèi)環(huán)磷腺苷( cAMP)水平，抑制其花生四烯酸代謝［4］，以上研究說明大黃酸對炎癥的預(yù)防和治療具有明顯的效果，且目前臨床上已經(jīng)使用的大黃酸1，8-二乙?；锟芍委煿顷P(guān)節(jié)炎［5］。川芎嗪( tetramethylpyrazine，TMP，F(xiàn)ig 1A)是從傘形科藁本屬植物川芎的根中提取的生物堿，是川芎的有效成分之一，具有廣泛的藥理作用，例如改善心、腦血管系統(tǒng)微循環(huán)，鎮(zhèn)靜鎮(zhèn)痛，抗腫瘤等［6］。且川芎嗪具有很好的生物活性，易于透過血腦屏障。本課題通過藥物化學(xué)拼合原理，將大黃酸和川芎嗪以醚鍵結(jié)合，將兩個(gè)具有活性的化合物結(jié)合在一起，修飾成大黃酸醚類衍生物1，8-雙( 3，5，6-三甲基吡嗪基-2-甲氧基) -9，10-二氧代-9，10二氫蒽-3-羧酸(簡稱1，8-二川芎嗪基大黃酸，F(xiàn)ig 1B)以期開發(fā)具有更好活性的大黃酸類藥物。前期研究表明該化合物比大黃酸酯類化合物更具有明顯的藥理活性，且可用于治療或預(yù)防與T-細(xì)胞增殖有關(guān)或由促炎細(xì)胞因子介導(dǎo)的疾病，具有抗炎、抗腫瘤等作用［7］。本文旨在采用HPLC建立大鼠血漿中1，8-二川芎嗪基大黃酸的測定方法，考察其在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)，以期為進(jìn)一步的開發(fā)和研究提供必要的參考。

Fig 1 Chemical structure of TMP ( A) and 1，8 TMP Rhein ( B)

1　材料

1．1儀器島津高效液相色譜儀:包括LC-10AT泵、CBM-10Alite控制器、SPD-10Avp紫外檢測器、CTO-10ASvp柱溫箱、LC-Solution工作站; Milli-Q Gradient A10超純水器( Millipore Inc．USA) ; XW-80A微型漩渦混合器(上海醫(yī)大儀器廠) ; Centrifuge 5804R臺(tái)式高速離心機(jī)(上海東兢電子有限公司) ; BP211D型電子天平(德國Sartorius公司) ; JL-180超聲儀(上海吉理超聲儀器有限公司)。

1．2動(dòng)物SPF級SD大鼠，♀♂兼用，體質(zhì)量200 ～250 g，由安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號為SCXK(皖) 2005－001。實(shí)驗(yàn)前禁食12 h，可自由飲水。

1．3藥品與試劑1，8-二川芎嗪基大黃酸(安徽中醫(yī)藥大學(xué)黃鵬副教授課題組合成，純度95. 64%，經(jīng)IR、MS、1H NMR結(jié)構(gòu)確認(rèn)，20140905)，色譜甲醇(上海星可高純?nèi)軇┯邢薰? ;水為雙蒸水;其它試劑均為分析純。

2　HPLC測定法的建立與考證

2．1色譜條件色譜柱: Shimadzu VP-ODS ( 150 mm×4. 6 mm，5 μm) ;流動(dòng)相:甲醇－0. 1%甲酸水( 78∶22，V/V) ;流速: 1. 0 mL·min－1;紫外檢測波長: 275 nm;柱溫25℃;進(jìn)樣量: 20 μL;靈敏度: 0. 001 AUFS。

2．2標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制1，8-二川芎嗪基大黃酸標(biāo)準(zhǔn)品的配制:精密稱取1，8-二川芎嗪基大黃酸標(biāo)準(zhǔn)品5. 00 mg至50 mL量瓶中，用甲醇溶解并定容，配制成0. 1 g·L－1貯備液，臨用前用甲醇稀釋成濃度0. 5、1、2. 5、5、10、25、50、100 mg·L－1的標(biāo)準(zhǔn)溶液。精密稱取大黃素2. 50 mg至50 mL量瓶中，甲醇溶解并定容，臨用前甲醇稀釋至25 mg·L－1作內(nèi)標(biāo)溶液，備用。

2．3血漿樣品處理取200 μL血漿，加內(nèi)標(biāo)溶液20 μL( 2. 5 mg·L－1)混勻后，加入2 mL甲醇，渦旋振蕩5 min，3 000 r·min－1離心10 min;取上清溶液1. 6 mL，在40℃水浴中用氮?dú)獯蹈?，?00 μL甲醇溶解殘?jiān)?，?2 000 r·min－1離心10 min，取上清液適量，進(jìn)樣20 μL，用樣品與內(nèi)標(biāo)峰面積比進(jìn)行定量分析。

2．4專屬性考察按“2. 1”項(xiàng)下操作，分別考察空白血漿( 6個(gè)空白個(gè)體)、空白血漿中加入1，8-二川芎嗪基大黃酸(濃度為1. 0 mg·L－1)、單劑量靜脈注射給藥4 mg·kg－11，8-二川芎嗪基大黃酸30 min后大鼠血漿樣品。按“2. 3”項(xiàng)下操作，進(jìn)行分析得到各樣色譜圖。

2．5標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備及定量下限分別取空白血漿200 μL，加入1，8-二川芎嗪基大黃酸系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，配制成相當(dāng)于1，8-二川芎嗪基大黃酸濃度為0. 05、0. 1、0. 25、0. 5、1、2. 5、5、10 mg·L－1的血漿樣品，每組濃度平行做3份，按“2. 3”項(xiàng)下操作，以待測物濃度( C)為橫坐標(biāo)，利用待測物與內(nèi)標(biāo)物的峰面積比值Ri為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸。按照色譜峰信噪比( S/N)為5確定定量下限，按照信噪比( S/ N)為3確定檢測下限。

2．6方法的精密度與準(zhǔn)確度取大鼠空白血漿200 μL，加入不同濃度的1，8-二川芎嗪基大黃酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，配制成低、中、高(分別為0. 1、1、5 mg· L－1) 3個(gè)濃度的血漿樣品，每個(gè)濃度平行做5份( n =5)，按“2. 3”項(xiàng)下操作，取20 μL進(jìn)樣，用樣品與內(nèi)標(biāo)峰面積比Ri代入同一條工作曲線，計(jì)算得到相應(yīng)的濃度，考察批內(nèi)和批間的變異情況，再與加入濃度對照計(jì)算其準(zhǔn)確度。

2．7提取回收率考察分別取空白血漿200 μL，加入1，8-二川芎嗪基大黃酸系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，配制成低、中、高(分別為0. 1、1、5 mg·L－1) 3個(gè)濃度的血漿樣品，每個(gè)濃度平行做5份，按“2. 3”項(xiàng)下處理，取20 μL進(jìn)樣，分析得到1，8-二川芎嗪基大黃酸峰面積As( H)。另取不同濃度的1，8-二川芎嗪基大黃酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，用甲醇稀釋到低、中、高(分別為0. 1、1、5 mg·L－1) 3個(gè)濃度的樣品，每個(gè)濃度平行做5份( n =5)，進(jìn)樣分析得到1，8-二川芎嗪基大黃酸峰面積As( D)。按照回收率= As( H) /As( D)平均值×100%，計(jì)算1，8-二川芎嗪基大黃酸的提取回收率。

2．8穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)分別取空白血漿200 μL，加入1，8-二川芎嗪基大黃酸系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，配制成低、中、高(分別為0. 1、1、5 mg·L－1) 3個(gè)濃度的血漿樣品，每個(gè)濃度平行做5份( n = 5)，分別考察室溫放置6 h、樣品處置后放置12 h、反復(fù)凍融3次、長期放置－20℃冰箱凍存2周的穩(wěn)定性。

2．9動(dòng)物實(shí)驗(yàn)取SPF級SD大鼠15只，♀♂兼用，體質(zhì)量200～250 g，實(shí)驗(yàn)前禁食12 h以上，可自由飲水，隨機(jī)分為3組，1，8－二川芎嗪基大黃酸經(jīng)雙蒸水溶解后，按2、4、8 mg·kg－1的劑量經(jīng)大鼠尾靜脈注射給藥( 0. 2 mL/100 g)，與給藥前( 0 min)和給藥后2、5、10、20、30、60、90、120、180、240、300 min，眼底靜脈叢連續(xù)取血0. 3 mL于經(jīng)肝素處理的試管中，于3 000 r·min－1離心10 min，分離出血漿，按“2. 3”項(xiàng)下處理，進(jìn)樣分析。

3　結(jié)果

3．1專屬性考察從Fig 2中可以看出，1，8-二川芎嗪基大黃酸的保留時(shí)間為6. 08 min，大黃素的保留時(shí)間為10. 83 min。結(jié)果表明在選定的色譜條件下，血漿中的內(nèi)源性物質(zhì)不干擾1，8-二川芎嗪基大黃酸的測定。

3．2標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備及定量下限以1/X2i( Xi= Ci)作權(quán)重因子1，8-二川芎嗪基大黃酸最小二乘法血漿標(biāo)準(zhǔn)曲線為Y = 0. 109 3X + 0. 000 2( r = 0. 996 2)，線性范圍0. 05～10 mg·L－1，定量下限0．05 mg ·L－1( n = 5; RSD = 5. 65%，準(zhǔn)確度96. 63%)最低檢測限0. 01 mg·L－1。

3．3提取回收率考察按“2. 7”項(xiàng)下操作，1，8-二川芎嗪基大黃酸低、中、高(分別為0. 1、1、5 mg·L－1) 3個(gè)濃度樣品的回收率分別為( 90. 39±0. 64) %、 ( 89. 80±2. 21) %、( 88. 66±2. 06) %。RSD分別為0. 71%、2. 46%、2. 32%?；厥章示笥?8%，且在待測濃度范圍內(nèi)，樣品低、中、高濃度回收率穩(wěn)定( RSD ＜10 %)，符合生物樣品分析要求。

Fig 2 HPLC chromatograms of A) Blank plasma; B) Blank plasma spiked with 1 mg·L－11，8-TMP rhein and 2．5 mg·L－1internal standard emodin; C) Rat plasma ( 30 min) after a single i．v．a(chǎn)dministration of 4 mg·kg－11，8-TMP rhein spiked with 2．5 mg·L－1internal standard emodin; 1: 1，8-TMP rhein; 2: Emodin

3．4精確度與準(zhǔn)確度考察按“2. 6”項(xiàng)下操作，制備1，8-二川芎嗪基大黃酸低、中、高(分別為0．1、1、5 mg·L－1) 3個(gè)濃度樣品，每個(gè)濃度平行做5份( n =5)，連續(xù)測定3 d。根據(jù)隨行標(biāo)準(zhǔn)曲線求得實(shí)測濃度。實(shí)測濃度的RSD即為精密度，實(shí)測濃度和加入濃度的比值即為準(zhǔn)確度。結(jié)果表明，1，8-二川芎嗪基大黃酸日內(nèi)、日間準(zhǔn)確度分別為94. 40%～99. 76%( RSD≤5. 7%，n = 5)和94. 32%～98. 65% ( RSD≤5. 4%，n =5)。所有樣品的日內(nèi)和日間RSD均小于10 %，同時(shí)低、中、高3種濃度的準(zhǔn)確度在85%～115%之間，符合生物樣品分析要求。

3．5穩(wěn)定性考察按“2. 8”項(xiàng)下操作，結(jié)果表明在上述情況下樣品穩(wěn)定性良好，具體見Tab 1。

Tab 1 Results of 1，8-TMP rhein room temperature，long-term placement，reduplicate freeze thawing，place after treatment in rat plasma(±s，n =5)

Tab 1 Results of 1，8-TMP rhein room temperature，long-term placement，reduplicate freeze thawing，place after treatment in rat plasma(±s，n =5)

Stability　0．1 mg·L－1　1．0 mg·L－1　5．0 mg·L －1 Roon temperature　0．094±0．005　0．98±0．081　4．99±0．43 Long-term placement　0．098±0．008　0．99±0．045　4．97±0．54 Reduplicate freeze thawing　0．096±0．006　0．93±0．094　5．03±0．35 Post-preparation____________ _______0．0_______________________ 99±0．009__0．95±0．078__4．89±0．63___

3．6血藥濃度－時(shí)間曲線與藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)大鼠單劑量靜脈注射1，8-二川芎嗪基大黃酸所得的平均血藥濃度－時(shí)間曲線如Fig 4。將所得的血藥濃度－時(shí)間數(shù)據(jù)，采用DAS 2．1軟件擬合求算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。其主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)見Tab 2。2、4、8 mg·kg－1單劑量給藥后血藥濃度－時(shí)間曲線下面積AUC0－t與劑量相關(guān)性見Fig 3。

Tab 2 Main pharmacokinetic parameters of 1，8-TMP rhein after i．v．in rats (±s，n =5)

Tab 2 Main pharmacokinetic parameters of 1，8-TMP rhein after i．v．in rats (±s，n =5)

Parameter_______________ __________2 mg·kg－1　4 mg·kg－1　8 mg·kg－1___T1/2/min 68．35±1．36　69．32±2．21　69．32±2．03 CL/L·kg－1·min－1　0．034±0．013　0．024±0．007　0．030±0．002 V /L·kg－1　3．36±1．16　2．40±0．072　2．95±0．26 MRT0－t/min　91．03±12．45　83．95±6．80　85．08±4．19 AUC0－t/min·mg·L－1　101．03±24．9　144．79±3．29　231．92±19．30 AUC0－∞/min·mg·L－1____131．92±52．76______ 171．47±12．16______ 28___________ 4．87±19．97

Fig 3 Dose positive correlation of single dose ( 2，4，8 mg·kg－1) AUC0－t

Fig 4 Mean concentration-time curve of fifiteen rats after single dose i．v．a(chǎn)dminisration of( 2，4，8 mg·kg－1) 1，8-TMP rhein( (±s，n =5)

4　討論

HPLC測定大鼠血漿中1，8-二川芎嗪基大黃酸的濃度，具有靈敏度高、分離度好等特點(diǎn)，尤其適用于大批量生物樣品測定。根據(jù)大鼠藥效劑量制定大鼠藥代研究給藥劑量，其高劑量最好接近最大耐受劑量，中、小劑量根據(jù)動(dòng)物有效劑量的上下限范圍選取。本課題參考大黃酸在大鼠和比格犬體內(nèi)的吸收動(dòng)力學(xué)研究文獻(xiàn)中的給藥劑量［8］及1，8-二川芎嗪基大黃酸HPLC測定方法的定量下限，綜合考慮選擇2、4、8 mg·kg－1的給藥劑量。

本實(shí)驗(yàn)對于流動(dòng)相的選擇，分別考察了甲醇－水、甲醇－0. 1%甲酸水、甲醇－0. 05%甲酸水、甲醇－0. 01%甲酸水。發(fā)現(xiàn)用甲醇和不同濃度的甲酸水作為流動(dòng)相時(shí)，1，8－二川芎嗪基大黃酸的峰型出現(xiàn)不同程度的拖尾現(xiàn)象。相比使用甲醇－0. 1%甲酸水作為流動(dòng)相時(shí)拖尾現(xiàn)象減輕，且峰型較好。經(jīng)過改變流動(dòng)相比例，最終選擇甲醇－0. 1%甲酸水( 78 ∶22，V/V)時(shí)，出峰效果最好。

本實(shí)驗(yàn)對比了大黃素、大黃酸和蘆薈大黃素3種內(nèi)標(biāo)物質(zhì)。紫外全波長掃描發(fā)現(xiàn)大黃酸的最大紫外吸收波長為230、254 nm，蘆薈大黃素的最大紫外吸收波長為255、376 nm，大黃素的最大吸收波長為225、285、435 nm，而1，8-二川芎嗪基大黃酸的最大吸收波長為210、275 nm，其中210 nm左右1，8-二川芎嗪基大黃酸和大黃素吸收較強(qiáng)，在甲醇－0. 1%甲酸水( 78∶22，V/V)流動(dòng)相條件下大黃酸和蘆薈大黃素分別在5. 31、3. 92 min左右出峰，而大黃素在10. 82 min左右出峰?？紤]到血漿中內(nèi)源性雜質(zhì)的紫外末端吸收較多，且在5 min左右仍有內(nèi)源性物質(zhì)吸收，所以綜合考慮選擇大黃素為內(nèi)標(biāo)，275 nm為紫外檢測波長。

藥代動(dòng)力學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，靜脈注射給藥后1，8-二川芎嗪基大黃酸從大鼠血漿中消除，其T1/2在69 min左右，平均駐留時(shí)間( MRT) 85 min左右，而大黃酸大鼠靜脈注射后T1/2約在4 h左右，MRT約在2. 03 h左右，血漿清除率CL約在0. 1 L·kg－1· h－1，表觀分布容積V約在1. 2 L·kg－1左右［8］，經(jīng)對比發(fā)現(xiàn)1，8-二川芎嗪基大黃酸藥物消除較快，半衰期短，體內(nèi)滯留時(shí)間短，而表觀分布容積較改造前大，可能是由于1，8-二川芎嗪基大黃酸親脂性增強(qiáng)。如果根據(jù)藥理學(xué)研究的需要增加在體內(nèi)的滯留時(shí)間，延長半衰期，可以通過劑型來進(jìn)行優(yōu)化。單劑量注射1，8-二川芎嗪基大黃酸高、中、低3種濃度的AUC0－t與所研究的劑量呈現(xiàn)簡單的線性相關(guān)( r = 0. 9959，F(xiàn)ig 3)且T1/2基本不變，血漿清除率CL為常數(shù)，與給藥劑量無關(guān)。初步判斷在所研究的劑量范圍內(nèi)1，8-二川芎嗪基大黃酸體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)過程符合線性過程。

(致謝:本實(shí)驗(yàn)在安徽中醫(yī)藥大學(xué)藥物代謝動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)并完成研究，衷心感謝本研究室全體成員對本實(shí)驗(yàn)的大力幫助與支持。)

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Determination of 1，8-TMP rhein and its pharmacokinetics in rat plasma by HPLC

PENG Zhao-liang1，LI Jie1，F(xiàn)AN Ling1，WANG Xue-qi1，HUANG Peng1，LI Jin-cai2，WANG Dian-lei1，2
CHEN Ya-jun1，WANG Shu-jun1，WANG Shan-shan1，ZHANG Yue1
( 1．College of Pharmacy，Anhui University of Chinese Medicine，Hefei 230031，China; 2．Bozhou Vocational and Technical College，Bozhou Anhui 236800，China)

Abstract:AimTo develop a HPLC method for the determination of the concentration of 1，8-TMP rhein in rat plasma and study the pharmacokinetics of 1，8-TMP rhein in rat plasma after single dose i．v．a(chǎn)dministration of 1，8-TMP rhein ( 2，4，8 mg·kg－1)．Methods Emodin was used as an internal standard．Plasma samples were extracted with methanol and analyzed by HPLC．The mobile phase was methanol－0. 1% formic acid water ( 78∶22，V/V)，with a flow rate of 1. 0 mL·min－1and UV 275 nm as the detection wavelength．The plasma concentration of 1，8-TMP rhein in rats was determined by HPLC after single-dose intravenous injection in rats with 2，4 and 8 mg·kg－1of 1，8-TMP rhein，and the pharmacokinetic parameters were caclulated by DAS 2．1．ResultsThe result of calibration curve was linear over the range of 0. 05～10. 00 mg·L－1( r =0. 996 2)．The lower limit of quantification was 0. 05 mg·L－1．The intra-day and inter-day precision ( RSD%) were both lower than 6%，and the extraction recoveries were higher than 88%，respectively．The validated method was successfully applied to a pharmacokinetic study after i．v．a(chǎn)dministration of 1，8-TMP rhein in rats with a dose of 2，4 and 8 mg· kg－1．The T1/2was ( 68. 35±1. 36)，( 69. 32±2. 1) and ( 69. 32±2. 03) min，respectively．The AUC0－twas ( 101. 03±24. 90 )，( 144. 79±3. 29 ) and ( 231. 92±19. 30) min·mg·L－1，respectively．Conclusion A simple and specific HPLC method for the analysis of 1，8-TMP rhein is successfully developed and applied to a pharmacokinetic study in rat plasma．Key words: 1，8-TMP Rhein; HPLC; rat; pharmacokinetics; plasma concentration; intravenous injection

作者簡介:彭兆亮( 1991－)，男，碩士生，研究方向:藥物代謝動(dòng)力學(xué)，Tel: 0551-68129153，E-mail: 747972445@ qq．com;

基金項(xiàng)目:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目( No 81473536) ;安徽省教育廳高等教育振興計(jì)劃人才項(xiàng)目(皖教秘［2014］181號)

收稿日期:2015－10－27，修回日期: 2015－11－25

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

文章編號:1001－1978( 2016) 01－0109－05

doi:10．3969/j．issn．1001－1978．2016．01．023