白芍總苷與辛伐他汀對腹膜纖維化大鼠腹膜功能的影響

張奡 湯水福 練建紅

摘 要：目的：比較白芍總苷與辛伐他汀對腹膜纖維化大鼠腹膜功能的影響。方法：選用健康SD大鼠32只，隨機(jī)分為4組，每組8只，分別為：空白組、模型組、辛伐他汀組、白芍總苷組。用持續(xù)4.25%含糖透析液和間斷脂多糖腹腔注射進(jìn)行腹膜纖維化造模。辛伐他汀組每日給予辛伐他汀20 mg.kg-1.d-1灌胃，白芍總苷組每日給予白芍總苷灌胃200 mg.kg-1.d-1；實(shí)驗(yàn)第30天結(jié)束后檢測腹膜功能及測量腹膜厚度。結(jié)果：模型組的腹膜厚度最厚，腹膜超濾量最差，與其他3組有顯著性差異（P<0.05）。辛伐他汀組、白芍總苷組的腹膜厚度及腹膜超濾量與空白組相比，有顯著性差異（P<0.05）。辛伐他汀組腹膜厚度與白芍總苷組相比，有顯著性差異（P<0.05）。辛伐他汀組超濾量與白芍總苷組相比，無顯著性差異（P>0.05）。結(jié)論：白芍總苷和辛伐他汀均可一定程度保護(hù)腹膜，預(yù)防腹膜纖維化的發(fā)生。

關(guān)鍵詞：腹膜纖維化；白芍總苷；辛伐他汀

中圖分類號：R285

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1007-2349（2013）06-0055-03

腹膜透析（peritoneal dialysis，PD）是慢性腎功能衰竭尿毒癥的主要治療方法之一，其具有操作簡單，價格相對低廉，對殘存腎功能保護(hù)性好及對機(jī)體內(nèi)環(huán)境影響小等優(yōu)點(diǎn)[1]。長期腹膜透析后，腹膜的結(jié)構(gòu)和功能均發(fā)生了變化。盡管腹膜透析的水平和技術(shù)不斷成熟，但腹膜超濾失敗發(fā)生率仍較高，腹膜纖維化是減少腹膜透析時間的主要因素之一。如何延長腹膜超濾功能，防治腹膜纖維化是目前需要解決的問題。本研究通過觀察白芍總苷（the total glucosides of paeony，TGP）和辛伐他汀對腹膜纖維化大鼠腹膜功能的影響，來評價白芍總苷和辛伐他汀對腹膜功能的保護(hù)作用。

1 材料與方法

1.1 動物 健康SPF級雄性SD大鼠（周齡4～6周），體重180～200 g，分籠飼養(yǎng)，由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，許可證號SCXK粵2003-002。

1.2 主要試劑與儀器藥物 白芍總苷膠囊，寧波立華制藥有限公司生產(chǎn)。低鈣腹膜透析液（乳酸鹽-G4.25%），百特醫(yī)療用品有限公司生產(chǎn)。細(xì)菌脂多糖（Lip polysaccharides），Sigma公司生產(chǎn)。正置顯微鏡及顯像系統(tǒng)（DFC310 FX）德國Leica公司。全自動包埋機(jī)（HD-310），湖北惠達(dá)儀器有限公司。

1.3 分組及給藥方法 選用32只大鼠隨機(jī)分為4組，每組8只，分別為：空白組、模型組、辛伐他汀組、白芍總苷組?？瞻捉M每日腹腔注射生理鹽水20 mL；模型組每日腹腔內(nèi)直接注射4.25%含糖透析液 20 mL；辛伐他汀組每日給予辛伐他汀20 mg.kg-1.d-1灌胃，白芍總苷組每日腹腔內(nèi)直接注射4.25%含糖透析液20 mL，同時給予白芍總苷200 mg.kg-1.d-1灌胃。后3組都在第1、3、5、7天加入細(xì)菌脂多糖0.6 mg.kg-1（體重）腹腔注射造模。整個周期為30 d。

1.4 腹膜超濾功能 各組在實(shí)驗(yàn)第30天測定。先用10%水合氯醛（35 mg/kg）對大鼠進(jìn)行肌注麻醉，然后往腹腔內(nèi)注射4.25% 透析液20 mL，輕輕按摩大鼠的腹部，使腹膜透析液均勻地充滿腹腔，4h后沿腹白線剪開腹壁，量取腹腔內(nèi)液體，超濾量（UF）=（最后出水量—20） mL。

1.5 腹膜厚度的測量 沿大鼠腹中線兩側(cè)中部避開注射部位取壁層腹膜組織一份固定，常規(guī)脫水，用石蠟包埋后進(jìn)行切片，60℃烘干融蠟，以二甲苯脫蠟，酒精梯度復(fù)水后進(jìn)行Masson三色染色，使用光鏡觀察腹膜并進(jìn)行厚度測量。每組隨機(jī)選取10個高倍視野測量的腹膜進(jìn)行腹膜厚度比較。

1.6 統(tǒng)計方法 采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ ±s ）表示，各組間差異性比較采用單因素方差分析并進(jìn)行兩兩比較（LSD法），P<0.05為差異有顯著性。

2 結(jié)果

2.1 腹膜厚度比較 模型組的腹膜最厚，與空白組、辛伐他汀組、白芍總苷組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）?？瞻捉M與辛伐他汀組、白芍總苷組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。白芍總苷組與辛伐他汀組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

2.2 腹膜超濾量的比較 空白組的超濾量最高，與模型組、辛伐他汀組、白芍總苷組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。模型組與辛伐他汀組、白芍總苷組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。辛伐他汀組與白芍總苷組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

3 討論

腹膜纖維化是維持性腹膜透析患者的主要并發(fā)癥，也是導(dǎo)致腹膜結(jié)構(gòu)和功能改變的主要原因。腹膜纖維化的病理學(xué)特點(diǎn)表現(xiàn)為腹膜間皮細(xì)胞的脫落、細(xì)胞間隙的增寬、微絨毛的喪失、膠原纖維的排列紊亂、細(xì)胞外基質(zhì)的沉積等。它影響了腹膜透析患者治療效果從而最終導(dǎo)致腹膜透析的最終失敗。其可能的原因是，腹膜長期與含糖非生物相容性的腹透液持續(xù)接觸，伴或不伴細(xì)菌性或非細(xì)菌性腹膜炎的反復(fù)發(fā)生，介導(dǎo)了腹膜纖維化的發(fā)生，最終導(dǎo)致腹膜超濾的失敗[2]。本研究中，大鼠腹膜組織持續(xù)受到高濃度腹膜透析液和間斷脂多糖模擬炎癥的刺激，一定程度上再現(xiàn)了腹膜透析的過程，其結(jié)果顯示腹膜明顯增厚，超濾量下降，提示造模是成功的。也再次證明了反復(fù)的高糖和炎癥可造成腹膜組織的結(jié)構(gòu)和功能的損傷。

白芍總苷是白芍根中提取的一種糖苷類物質(zhì)，主要成分是芍藥苷（paeoniflorin，PF），占90%以上[3]。有研究表明，白芍總苷具有抗炎及抗氧化等作用[4]。在臨床中，廣泛用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病、強(qiáng)直性脊柱炎等疾病[5～7]。李瑞麟等研究表明，白芍總苷對四氯化碳致大鼠肝纖維化有治療作用[8]。研究發(fā)現(xiàn)他汀類藥物具有抗纖維化的作用，這可能與其調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、分化、凋亡、抑制M沉積、抗炎、抗氧化等多種生物學(xué)功能有關(guān)[9]。管紅斌等研究證實(shí)，辛伐他汀對腹膜纖維化大鼠腹膜有保護(hù)作用[10]。本研究對比白芍總苷和辛伐他汀對大鼠腹膜纖維化模型腹膜的影響，結(jié)果顯示，2組對腹膜纖維化均有保護(hù)作用。雖然白芍總苷對腹膜厚度的影響優(yōu)于辛伐他汀，但兩者的腹膜超濾量無統(tǒng)計學(xué)差異。所以尚不能認(rèn)為白芍總苷的腹膜纖維化的作用優(yōu)于辛伐他汀。這兩種結(jié)果的不平行，可能與樣本量偏小有關(guān)。

綜上所述，本研究表明白芍總苷和辛伐他汀均可一定程度上減輕高糖和炎癥所致的腹膜纖維化。為臨床防治腹膜纖維化提供了新的思路和方法。

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（收稿日期：2013-04-15）