Bax、ki—67在宮頸病變組織中的表達及意義

麻卲等

Bax是一種促凋亡基因，可以通過激活Caspase信號轉(zhuǎn)導途徑、破壞ATP合成功能、改變細胞氧化還原反應等機制發(fā)揮促凋亡作用。增殖細胞核抗原Ki-67隨著宮頸病變程度的升高而呈上升趨勢，且與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預后關系密切。

資料與方法

研究對象：樣本原發(fā)性宮頸癌、宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）和正常宮頸組織均來自鄭州市第一人民醫(yī)院病理科，所有病例均經(jīng)過病理組織學證明。病例年齡36～71歲，平均49.6歲，按國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（FlCO）宮頸癌分期標準進行分期；宮頸鱗癌30例，宮頸上皮內(nèi)瘤變組90例（其中CINⅠ 30例，CINⅡ 30例，CINⅢ 30例），正常宮頸組20例。所有患者術前均未進行化療和放療。所有標本均經(jīng)過10%的福爾馬林中性溶液浸泡，常規(guī)脫水、透明、侵蠟，然后石蠟包埋。

方法：采用免疫組織化學S.P法.實驗步驟按試劑盒說明書進行。以檸檬酸緩沖液高溫高壓進行抗原修復。DAB顯色，用公司出售陽性切片作陽性對照，以PBS液代替一抗作為陰性對照。

結(jié)果判定：Bax及ki-67表達陽性均為細胞漿呈棕黃色或棕褐色顆粒.每例均隨機觀察5個高倍視野（X400）。用半定量積分法判斷結(jié)果，陽性細胞<5%為0分。6%～25%為1分，26%～50%為2分，5I%～75%為3分，>75%為4分。陽性強度黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。兩項積分相乘t0分為陰性（-），1～4分為弱陽性（+），5～8分為中度陽性（++），9～12分為強陽性（+++）。結(jié) 果

Bax、ki-67蛋白在宮頸癌新輔助化療前、后的表達：Bax蛋白的陽性表達主要存在于細胞漿內(nèi)，隨著宮頸病變程度的升高其表達成下降趨勢，新輔助化療后較化療前明顯升高。宮頸癌組0.032±0.003，CIN組0.065±0.016，正常宮頸組0.172±0.023，3組比較（P值均<0.05），見表1。

Ki-67蛋白的陽性表達主要存在于細胞核，呈棕黃色，其在正常宮頸組織、宮頸上皮內(nèi)瘤變、宮頸癌組織中均有表達，隨著宮頸病變程度的升高其呈上升趨勢。宮頸癌組65.32±0.003，CIN組17.35±0.26，正常宮頸組9.12±0.23，3組比較（P值均<0.05），見表1。

討 論

宮頸病變從CIN到原位癌再到浸潤癌是一個多階段、多步驟的連續(xù)過程，歷時5～10年，腫瘤的發(fā)生不僅與細胞的過度增殖有關，而且與腫瘤細胞異常凋亡有關。宮頸病變中不僅有癌細胞的過度增殖，而且存在細胞凋亡減少[1]，增值指數(shù)及治療前凋亡指數(shù)低的患者，癌的復發(fā)率較低，生存率較高。多因素分析表明增值指數(shù)和凋亡指數(shù)是兩個重要的預后因素。

Bax基因位于染色體19q13，屬水溶性蛋白，其蛋白主要位于細胞漿中，當?shù)蛲霭l(fā)生時它從細胞漿轉(zhuǎn)移到線粒體與線粒體膜結(jié)合，再與位于線粒體的bcl-2相互作用而發(fā)揮誘導凋亡作用[2]，對細胞凋亡的調(diào)控起著重要作用。Bcl-2可以抑制多種組織的細胞凋亡，延長細胞生存而參與腫瘤的發(fā)生，是目前公認的抗凋亡基因。本研究表明，Bax蛋白表達在宮頸癌組織中的表達低于CIN組，CIN組低于正常宮頸組，與王曉琴等[3]報道一致。結(jié)果提示Bax在正常組織中的高表達可以促進細胞凋亡，不致引起細胞異常增殖從而引發(fā)腫瘤的形成。宮頸癌組織的表達下調(diào)，細胞增殖不能得到有效控制。細胞凋亡減少，致使腫瘤向惡性轉(zhuǎn)化。

Ki-67抗原（Ki-67 antigen），簡稱為Ki-67，能識別存在于G0晚期以外的細胞周期核抗原，由于其半衰期短，脫離細胞周期后迅速降解，已成為目前應用最廣泛的增殖細胞標記之一，Ki-67參與細胞周期的調(diào)控，理論上可作為診斷和預測腫瘤對治療的敏感度及其結(jié)局等方面的標志物，在腫瘤的分級、增生程度、預后的預測中均有一定的意義。本研究表明其表達隨宮頸癌臨床分期的升高而增高，從宮頸炎到上皮內(nèi)瘤變再到宮頸癌，其表達水平呈逐步上升趨勢，所以ki-67是診斷宮頸病變的一個有效的參考指標。

同時，本研究發(fā)現(xiàn)Bax的表達與ki-67的表達存在負相關性，提示腫瘤的發(fā)生不單是因為細胞的異常增殖，同時也存在細胞的凋亡受阻，通過檢測組織中兩者的表達不但有利于良惡性病變的區(qū)分，并且對放化療及預后具有評估意義。

參考文獻

1 鄭秀惠，陳竹欽，李力，等.252锎中子放療對宮頸癌細胞凋亡及bcl-2、bax的影響[J].第三軍醫(yī)大學學報，2005，27（19）：1957-1959.

2 Hocenberg D，Nunez C，Millian C，et al.Bcl 2 is an inner mito-chondrial memberaneproten that blocks programmed cell death.Nature，1990，348，6299：334.

3 王曉琴，戴穹，楊志惠.bcl.2、Ki-67和bax蛋白在官頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌中的表達及臨床意義[J].中國醫(yī)療前沿，2008，3（2）：27-28.