微柱凝膠技術(shù)在交叉配血中的應(yīng)用探討

馬吉聯(lián)

摘要目的：探索檢測(cè)IgG抗體的敏感性交叉配血，保證輸血安全。方法：采用微拄凝膠技術(shù)配血，觀察輸血應(yīng)紅細(xì)胞抗原或抗體是否引起輸血不良反應(yīng)。結(jié)果：微柱凝膠技術(shù)配血可發(fā)現(xiàn)較弱的凝集配血不符合。結(jié)論：微柱凝膠抗人球蛋白技術(shù)交叉配血方法簡(jiǎn)單可靠安全。

關(guān)鍵詞微拄凝膠技術(shù)配血應(yīng)用

在輸血前必須進(jìn)行交叉配血，是保證臨床輸血質(zhì)量安全的重要環(huán)節(jié)。2010年10月引進(jìn)瑞士達(dá)亞美全自動(dòng)血型配血系統(tǒng)至2012年10月采用原裝微柱凝膠抗人球蛋白技術(shù)進(jìn)行交叉配血10452例。其中10354例結(jié)果陰性，輸血應(yīng)均末見發(fā)生因紅細(xì)胞抗原或抗體引起的輸血反應(yīng)，現(xiàn)總結(jié)如下。

資料與方法

2010年10月～2012年10月申請(qǐng)用血患者標(biāo)本10354例。

試劑：微柱凝膠抗人球蛋白。凝聚胺，篩選紅細(xì)胞。

儀器：全自動(dòng)血型配血儀。

方法：①鹽水介質(zhì)配血法：見全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程第3版；②凝聚胺按說明書操作；③微柱凝膠抗人球蛋白：將患者與供血者的紅細(xì)胞和血漿分離，將卡放在儀器專用位，患者標(biāo)本和供血標(biāo)本放在專用位置上，自動(dòng)掃描，自動(dòng)吸樣，自動(dòng)稀釋吸樣反應(yīng)，孵育15分鐘，自動(dòng)離心，自動(dòng)判讀結(jié)果完成；④抗人球蛋白試驗(yàn)：見全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程第3版[1]。

結(jié)果

10452例患者用卡式微柱凝膠抗人球蛋白技術(shù)交叉配血中10354例主次側(cè)均為陰性結(jié)果，98例陽性結(jié)果，其中主側(cè)陽性52例，次側(cè)46例。

主側(cè)陽性標(biāo)本的處理：52例主例配血陽性者，其中25例標(biāo)本纖維蛋白析出引起的假凝集反應(yīng)，標(biāo)本使用抗凝試管未充分混勻，而網(wǎng)羅加入的紅細(xì)胞不能通過凝膠沉淀到卡管底部導(dǎo)致假陽性結(jié)果。10例為供血者直接抗人球蛋白陽性引起凝集，經(jīng)調(diào)換另一表供血者之后，結(jié)果陰性。17例血者有不規(guī)則抗體陽性引起的主側(cè)交叉配血不合，經(jīng)另換一袋血源，經(jīng)鹽水法，凝聚胺法配血，再次用微柱凝膠抗人球蛋白技術(shù)方法進(jìn)行交叉配血結(jié)果主次側(cè)全陰性，輸血后均無輸血不良反應(yīng)。

次側(cè)配血陽性標(biāo)本處理：46例次側(cè)配血陽性的患者標(biāo)本均給予洗滌紅細(xì)胞輸注，均無出現(xiàn)紅細(xì)胞抗原或抗體引起的輸血反應(yīng)，次側(cè)陽性可能是某些疾病，導(dǎo)致了紅細(xì)胞表面發(fā)生了變化等，與試劑中含有的抗IgG、C3成分發(fā)生非特異牲凝集反應(yīng)所致。

討論

微柱凝膠技術(shù)作為一種免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)，目前己在歐美等發(fā)達(dá)國家作為常規(guī)性撿測(cè)技術(shù)應(yīng)用于臨床[2]。而作為簡(jiǎn)單快速的鹽水法交叉配血，只能檢出IgM抗體，但不能撿出IgG抗體。而抗人球蛋白由于此試驗(yàn)步驟復(fù)雜，并進(jìn)行繁鎖的洗滌紅細(xì)胞過程，需要較長(zhǎng)時(shí)間，操作者對(duì)反應(yīng)終點(diǎn)與結(jié)果判斷需一定經(jīng)驗(yàn)，從而不能成為臨床常規(guī)配血方法。

1986年Lappierre發(fā)明的微柱卡式凝膠技術(shù)試驗(yàn)，其原理是利用微柱凝膠的微孔過濾作用和抗原抗體特異性反應(yīng)的作用，通過離心技術(shù)，利用凝膠微柱層析分子排阻原則，將發(fā)生凝集反應(yīng)的紅細(xì)胞阻滯于凝膠之內(nèi)，而末凝集的單個(gè)紅細(xì)胞則穿過微孔運(yùn)動(dòng)到柱底，從而區(qū)別有無凝集。微柱凝膠分中性凝膠，特異牲凝膠和抗人球蛋白凝腔。在抗人球蛋白凝膠中含有球蛋白抗體，可用于檢測(cè)IgG類不完全抗體和相應(yīng)紅細(xì)胞坑泵的反應(yīng)微柱凝膠試驗(yàn)已在臨床大量使用，并且提完善，已成為常規(guī)的紅細(xì)胞血型血請(qǐng)學(xué)檢測(cè)新技術(shù)。它省略了洗滌紅細(xì)胞繁鎖的步驟過程，比傳統(tǒng)的抗人球蛋白交叉配血試驗(yàn)方法簡(jiǎn)單，快速準(zhǔn)確，易于大批量操作，配血加樣用量少，對(duì)新生心或標(biāo)本不易抽取的患者可節(jié)約標(biāo)本采血量，結(jié)果穩(wěn)定可靠，重復(fù)性好，并有自動(dòng)拍照存于電腦中，便于日后應(yīng)用。

配血標(biāo)本必須用抗凝管，并且抽血放入之后必須充分搖勻，防止有凝塊出現(xiàn)，否則影響結(jié)果。在配血時(shí)若遇到患者血液中有ABO不規(guī)則抗體時(shí)，可用鹽水配血法或凝聚胺配血法相對(duì)于微柱凝膠法配血成本較低，時(shí)間短。當(dāng)凝聚胺配血無凝集后，可再用微柱凝膠抗人球蛋白技術(shù)交叉配血，以確保檢出到低含量的不完全抗體，保證臨床輸血質(zhì)量和安全。

參考文獻(xiàn)

1葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī).南京：東南大學(xué)出版社，2006：253-263.

2李勇，楊貴貞.人類紅細(xì)胞血型學(xué)實(shí)用理論與實(shí)驗(yàn)室技術(shù).北京：中國科學(xué)技術(shù)出版社，1999：263-276.