活血通絡(luò)口服液提取工藝研究

陳 煜 陜西省富平縣醫(yī)院藥劑科（富平711700）

中風(fēng)（Stroke）是中醫(yī)學(xué)對急性腦血管病的統(tǒng)稱，西醫(yī)稱之為腦卒中，分為出血性和缺血性兩類。高血壓、動脈硬化、腦血管畸形、腦動脈瘤等可導(dǎo)致出血性中風(fēng)［1］；經(jīng)過醫(yī)務(wù)工作者多年努力和臨床驗證，我國傳統(tǒng)中藥在中風(fēng)方面的作用已受到了醫(yī)藥界的普遍重視［2］?；钛ńj(luò)口服液為我院院內(nèi)制劑，由黃芪、當(dāng)歸、赤芍、地龍、川芎、紅花、桃仁、全蝎、牛膝、桑枝、?蟲、川斷等12味中藥組成，具有益氣溫陽，活血化瘀之功效，主治氣虛血瘀之胸痹心痛心悸之證。方中黃芪為君藥，黃芪微溫補氣，氣旺血行；黃芪辛散微寒，祛瘀生新，活血不傷正，寒溫并用，瘀去絡(luò)通。當(dāng)歸、紅花辛溫發(fā)散，活血行氣，為血中氣藥。又得到黃芪的固攝而不致于出現(xiàn)氣虛氣陷之狀。地龍、全蝎祛風(fēng)通絡(luò)，再配合牛膝、續(xù)斷、桑枝，補益肝腎，強骨舒絡(luò)利關(guān)節(jié)，以達補氣活血、化瘀通絡(luò)之目的。其組方嚴謹，益氣溫陽，活血祛瘀，攻補兼施，祛邪不傷正，相益得彰，治療虛實夾雜胸痹心痛療效甚佳。但該制劑的制備工藝未進行系統(tǒng)研究，導(dǎo)致其質(zhì)量不穩(wěn)定，影響療效。為了更進一步保證制劑的質(zhì)量，筆者本著優(yōu)化工藝參數(shù)，并盡可能降低成本的原則，在舊工藝的基礎(chǔ)上，以阿魏酸為考察指標，對活血通絡(luò)口服液提取工藝中乙醇的濃度、用量及提取時間和次數(shù)等工藝參數(shù)進行科學(xué)系統(tǒng)的考察，篩選出穩(wěn)定可靠、高效經(jīng)濟的提取工藝，為其生產(chǎn)工藝改造提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與試藥 LC2010－CHT液相色譜儀（Shimadzu），LCsolution化學(xué)工作站；PB3002－S電子分析天平。阿魏酸標準品（中國生物制品檢定所）；色譜分析用乙腈購自MERCK公司，其余試劑均為分析純。

藥物提?。喊刺幏奖壤Q取黃芪、當(dāng)歸、赤芍、地龍、川芎、紅花、桃仁、全蝎、牛膝、桑枝、?蟲、川斷等12味中藥，共9份（藥材均購自西安萬壽路藥材市場，全部符合2010版《中國藥典》一部對應(yīng)藥材項下規(guī)定）。按正交設(shè)計表加入乙醇，回流提取，回收乙醇后，冷卻抽濾，濾液待測。

2 方 法 2.1 指標選擇 復(fù)方中當(dāng)歸活血通絡(luò)為主藥，其含量測定方法成熟，提取物中阿魏酸含量可用液相色譜法檢測，故此選為質(zhì)量控制指標。

2.2 阿魏酸含量測定方法 供試品溶液制備：藥物提取所得濾液濃縮至約50mL，轉(zhuǎn)移至50mL量瓶中，加稀乙醇定容搖勻。精密量取濾液0.5mL，置100mL量瓶中，加入稀乙醇稀釋至刻度搖勻，過濾取濾液。

對照品溶液制備：精密稱取阿魏酸對照品適量，加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液。

測定：LC2010－CHT 液相色譜儀；C18柱（250mm×4.6mm ，5μm），流動相：乙腈－水（30：70）；檢測波長270nm，柱溫25℃；流速：1.0mL·min－1；樣品處理后自動進樣，進樣量50μL，記錄峰面積，按外標法計算阿魏酸提取量。

標準曲線繪制：制備阿魏酸梯度標準工作液進樣，測定并繪制標準曲線。得回歸曲線Y＝1367.2X＋24.231，R2＝0.9996，阿魏酸在檢測濃度范圍內(nèi)線性良好。

2.3 正交試驗 為篩選出活血通絡(luò)口服液最佳制備工藝，采用正交設(shè)計試驗對其醇提水沉工藝進行優(yōu)選：即選取對提取效率最關(guān)鍵的醇濃度（A）、加醇量（B）、提取時間（C）和提取次數(shù)（D）4個影響因素，每個因素選3個水平（見表1），按L9（34）正交表進行試驗并進行方差分析，確定優(yōu)化工藝（見表2～3）。

表1 因素水平表

表2 L9（34）正交設(shè)計表

表3 阿魏酸方差分析表

3 結(jié)果與討論 由方差分析結(jié)果顯示，四個因素對阿魏酸的轉(zhuǎn)移率影響主次關(guān)系為A＞D＞C＞B，其中A因素影響最為顯著（P＜0.01），其次為C、D兩因素 （P＜0.05），而B因素的影響無顯著性意義（P＞0.05），為了節(jié)約能源和時間，我們綜合考慮選擇A2B1C2D2，即加70%乙醇6倍量提取，每次提取時間1.5h，提取2次做為最佳提取工藝。

本研究以活血通絡(luò)口服液中當(dāng)歸所含成分阿魏酸為考察指標，保證了制劑質(zhì)量和藥效，文獻中有關(guān)以阿魏酸為指標的當(dāng)歸提取方法很多，有水蒸氣蒸餾后水提工藝［3］、乙醇回流提取工藝［4］、乙醇滲漉工藝［5］、以及近年來出現(xiàn)的SFE－CO2（超臨界 CO2）提取工藝［6］。本工藝選取最簡便操作的乙醇回流提取工藝進行了考察，在阿魏酸檢測中對流動相進行了反復(fù)試驗，確定乙腈－水（30：70）條件下樣品分離良好，并減少以往水相中加酸對儀器和色譜柱的損害。

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［5］ 趙迪加，張水寒，王宇紅.婦炎寧中當(dāng)歸滲漉法提取工藝的研究及其與雙提法樣品的鎮(zhèn)痛作用比較［J］.中成藥，2007，29（9）：1360－1362.

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