克隆公豬血液生化指標(biāo)測定與比較分析

薛振華，肖 煒，朱振營，王曉鳳，楊宇澤，谷傳慧，云 鵬*

(1.北京市畜牧獸醫(yī)總站，北京100107; 2.中國檢驗檢疫科學(xué)研究院 動物檢疫研究所，北京100029)

家畜的血液生化指標(biāo)不僅能反映其生理狀態(tài)，體現(xiàn)機體健康情況，還是了解動物的飼養(yǎng)管理、生長發(fā)育規(guī)律的有效途徑，同時也是獸醫(yī)臨床診斷疾病、防治疾病不可缺少的重要依據(jù)［1］。血液中相當(dāng)一部分酶的活性還與品種遺傳特性相關(guān)［2］?？寺」i是在動物實驗和生產(chǎn)中，利用無性繁殖技術(shù)(體細(xì)胞核移植技術(shù)，SCNT) 獲得的、與供體豬同質(zhì)的個體。國外已有針對克隆豬10 項血液生化指標(biāo)的研究［3～5］，而國內(nèi)少見報道［6］。本試驗測定了克隆公豬不同年齡階段的32項血液生化指標(biāo)，并進(jìn)行比較，以了解其種質(zhì)特性，分析其與普通種公豬在此方面的異同，為克隆公豬的應(yīng)用提供技術(shù)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗動物

用于采精階段的克隆公豬5 頭，其中12月齡2 頭、18月齡3 頭。對照組為相同飼養(yǎng)條件和采精階段的普通公豬10 頭，其中12月齡5 頭、18月齡5 頭。試驗動物均為美系大白品種。

1.2 血樣采集

于清晨、且空腹?fàn)顟B(tài)下，從每頭豬的前腔靜脈采血10 mL 左右，經(jīng)2 000 r/min 離心10 min，收集血清。

1.3 測定指標(biāo)

共32 項，包括: 總膽紅素(TBIL) 、直接膽紅素(DBIL) 、葡萄糖(GLU) 、尿素氮(BUN) 、肌酐(CREA) 、尿酸(UA) 、二氧化碳總量(TCO2) 、總蛋白(TP) 、白蛋白(ALB) 、蛋白比值(A/G) 、總膽固醇(CHOL) 、甘油三酯(TG) 、磷脂(PL) 、載脂蛋白A1 (APOA) 、r- 谷氨?；D(zhuǎn)移酶(GGT) 、總膽汁酸(TBA) 、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT) 、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST) 、堿性磷酸酶(ALP) 、肌酸激酶(CK) 、肌酸激酶同工酶(CK-MB) 、乳酸脫氫酶(LDH) 、α-羥丁酸脫氫酶(HBDH) 、血清淀粉酶(AMY) 、血清膽堿酯酶(CHE) 、鈉(Na) 、鉀(K) 、氯(Cl) 、總鈣(Ca) 、鎂(Mg) 、磷(P) 和鐵(Fe) 。

1.4 測定方法

采用日立7600 全自動生化分析儀進(jìn)行血液生化指標(biāo)測定。

1.5 數(shù)據(jù)處理

應(yīng)用SPSS 13.0 對測定值進(jìn)行F 檢驗和單因素方差分析。為消除生化指標(biāo)的測定易受樣品采集、貯存方法、檢測儀器等因素影響，使試驗結(jié)果更具參考價值，在數(shù)據(jù)處理過程中對測定值進(jìn)行了數(shù)據(jù)離散度分析。

2 結(jié)果

2.1 生化指標(biāo)測定結(jié)果

血液生化測定指標(biāo)分為四大類，包括蛋白和脂類、酶、有機物以及無機物，測定結(jié)果分別列于表1、2、3、4。同時，對各項測定值進(jìn)行數(shù)據(jù)離散度分析，見圖1、2。

表1 克隆公豬血液蛋白和脂類測定值

表2 克隆公豬血液酶測定值

表3 克隆公豬血液有機物測定值

表4 克隆公豬血液無機物測定值

圖1 克隆公豬12月齡時各項生化指標(biāo)測定值的離散度圖

圖2 克隆公豬18月齡時各項生化指標(biāo)測定值的離散度

2.2 不同月齡生化指標(biāo)比較

對克隆公豬12月齡時各項血液生化指標(biāo)測定值F 檢驗結(jié)果表明，血液蛋白和脂類中，總蛋白(TP) 和蛋白比值(A/G) 的測定值與對照組差異顯著(P ＜0.05) ; 血液酶類中，堿性磷酸酶(ALP) 的測定值與對照組差異顯著(P ＜0.05) ; 血液有機物中葡萄糖(GLU) 、肌酐(CREA) 和二氧化碳總量(TCO2) 的測定值與對照組差異顯著(P ＜0.05) 。其他測定值與對照組差異不顯著。

對克隆公豬18月齡時各項血液生化指標(biāo)測定值F 檢驗結(jié)果表明，血液蛋白和脂類中，白蛋白(ALB) 和蛋白比值(A/G) 的測定值與對照組差異極顯著(P ＜0.01) ; 血液酶類中，堿性磷酸酶(ALP) 的測定值與對照組差異極顯著(P ＜0.01) ; 血液有機物中，二氧化碳總量(TCO2) 的測定值與對照組差異顯著(P ＜0.05) ; 血液無機物中，鐵(Fe) 的測定值與對照組差異極顯著(P ＜0.01) 。其他測定值與對照組差異不顯著。

3 討論

3.1 血清蛋白類

總蛋白(TP) 是由白蛋白(ALB) 和球蛋白(GLOB) 兩部分組成的，二者具有維持血漿正常膠體滲透壓、運輸作用、緩沖作用、免疫作用、修補組織等主要生理功用［11］。TP含量高，有利于提高代謝水平和免疫力，促進(jìn)動物健康、快速生長。試驗數(shù)據(jù)顯示，克隆公豬的TP 含量顯著高于對照組，說明克隆公豬在代謝水平和生長速度方面優(yōu)于普通對照公豬，這與克隆公豬的供體是經(jīng)過選擇的優(yōu)秀個體有關(guān)，也可以說明克隆公豬遺傳并表現(xiàn)了供體優(yōu)良的生長性能。同時，蛋白比值(A/G) 稍低，提示白蛋白(ALB) 相對低和球蛋白(GLOB) 相對高，在一定程度上是機體的免疫功能強的表現(xiàn)，說明克隆公豬在免疫水平好于普通對照公豬。

3.2 血清酶類

動物血清中的堿性磷酸酶(ALP) 主要來自骨骼，由成骨細(xì)胞產(chǎn)生，它能促進(jìn)磷酸鈣貯集骨內(nèi)而參與骨骼的鈣化過程［12～14］。因此堿性磷酸酶是健康動物成骨細(xì)胞活動的一個指標(biāo)，也是骨質(zhì)形成的一個依據(jù)。試驗數(shù)據(jù)顯示，克隆公豬的ALP 含量顯著高于對照組，說明克隆公豬的成骨細(xì)胞的活動性強于普通對照公豬，也能夠說明在生長速度方面，克隆公豬具有優(yōu)于普通對照公豬的潛能或者表現(xiàn)。這與國外的報道一致［3～5］。

3.3 血液有機物

血液中有機物含量的測定可以體現(xiàn)機體的代謝能力［12～14］。葡萄糖是機體的供能物質(zhì)，試驗數(shù)據(jù)顯示，克隆公豬的葡萄糖含量處于正常的區(qū)間內(nèi)，但較對照組高，說明在代謝水平方面優(yōu)于普通對照公豬，這與克隆公豬的TP 含量顯著高于對照組所表現(xiàn)出的意義相同。同時，參考二氧化碳總量(TCO2) 的測定值顯示，機體處于良好的有氧氧化代謝水平。

尿素氮(BUN) 是蛋白質(zhì)代謝后產(chǎn)生的廢物，血清BUN 是動物體內(nèi)反映蛋白質(zhì)代謝和日糧氨基酸平衡狀況的指標(biāo)。當(dāng)日糧中含氮物質(zhì)增高，或體內(nèi)氨基酸代謝旺盛、組織遭受破壞、腎功能障礙和血中尿素得不到正常排出時均會使血清BUN 濃度升高?？寺」i與對照組尿素氮(BUN) 的測定值高于文獻(xiàn)參考值，但是無顯著差異，這可能與處于采精生產(chǎn)階段的公豬日糧中蛋白含量高有關(guān)。

本研究針對克隆公豬在12月齡和18月齡兩個階段測定的32 項血液生化指標(biāo)中，僅有堿性磷酸酶(ALP) 和二氧化碳總量(TCO2) 與對照組均顯示出統(tǒng)計學(xué)差異，其余絕大多數(shù)與對照組無顯著差異。因此，綜合分析32 項測定指標(biāo)可以表明，克隆公豬與普通種公豬在生理狀態(tài)方面基本相似，而且在代謝和免疫水平上表現(xiàn)出更優(yōu)的狀態(tài)。

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