咪康唑莫米松皮膚成膜凝膠皮膚用藥安全性試驗(yàn)＊

賴東梅，張丹霞，陳惠英，廖朝峰，張呂釗

(廣東省深圳市寶安人民醫(yī)院藥劑科，廣東 深圳 518101)

咪康唑莫米松皮膚成膜凝膠為我院自制制劑。筆者以常用凝膠劑輔料泊洛沙姆407和188為基質(zhì)材料[1]，將硝酸咪康唑糠酸和莫米松兩種治療皮膚病用藥配制成復(fù)方皮膚成膜凝膠[2]，并按照新藥審批辦法中有關(guān)皮膚毒理試驗(yàn)要求[3]，進(jìn)行安全性試驗(yàn)研究，包括皮膚刺激性試驗(yàn)和過敏性試驗(yàn)。

1 試藥與動(dòng)物

咪康唑莫米松皮膚成膜凝膠[2](批號為20120201，規(guī)格為每支10g);對照品成膜凝膠基質(zhì)(批號為20120205，規(guī)格為每支10g)。均為本院制劑室研制產(chǎn)品。健康日本大白兔10只，體重1．8～2．5 kg，雄雌各半;豚鼠 30 只，體重 250 ～350 g，雄雌各半，均購自廣東省醫(yī)用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物場(粵證12-059)，試驗(yàn)期間，動(dòng)物均飼養(yǎng)在室溫18～25℃、相對濕度45% ～65%、安靜的相同環(huán)境，自由進(jìn)食。

2 方法與結(jié)果

2．1 皮膚刺激性試驗(yàn)[4]

將10只家兔稱重后分成兩組，第1組為完整皮膚組，第2組為破損皮膚組，每組5只，雄雌各半。試驗(yàn)前24 h對家兔脊柱雙側(cè)給藥區(qū)進(jìn)行脫毛處理，剪去約3 cm×3 cm。破損皮膚制作:在給藥部位用碘伏消毒后，用無菌針頭劃“#”字，以輕度滲血為度。

家兔左側(cè)脫毛區(qū)給予咪糠唑莫米松成膜凝膠藥物，右側(cè)脫毛區(qū)給予成膜凝膠基質(zhì)對照品，均每天每只1．0 g/只，然后用1層玻璃紙覆蓋，用無刺激的紗布和醫(yī)用膠布固定。敷藥4 h后，除去受試物并用溫開水清潔給藥部位。連續(xù)7 d。每次給藥前1 h和末次洗去藥物后1，24，48，72 h借助眼科反光鏡按照皮膚刺激反應(yīng)評分表見表1，觀察并記錄敷藥部位有無紅斑和水腫等情況，以及上述變化的恢復(fù)情況的恢復(fù)時(shí)間，評價(jià)本品對皮膚的刺激強(qiáng)度。評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)為分值在 0～0．49分為無刺激性，0．5～2．99分為輕度刺激性，3．0 ～5．99 分為中度刺激性，6．0 ～8．0 分為強(qiáng)刺激性。

咪糠唑莫米松成膜凝膠對家兔皮膚連續(xù)7 d的刺激反應(yīng)，結(jié)果見表2。咪糠唑莫米松成膜凝膠(左側(cè))及其基質(zhì)(右側(cè)空白對照)對家兔完整皮膚和破損皮膚連續(xù)給藥7 d和停藥觀察3 d，均未見紅斑、水腫等情況，根據(jù)皮膚刺激評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，所試兩組藥物均屬于無刺激性。

表1 皮膚刺激反應(yīng)評分表

表2 咪康唑莫米松成膜凝膠對家兔皮膚連續(xù)7 d的刺激反應(yīng)結(jié)果

2．2 皮膚過敏性試驗(yàn)[5]

將豚鼠稱重后按性別體重隨機(jī)分成3組，每組10只，雄雌各半。第1組為給受試藥物咪康唑莫米松成膜凝膠(1．0 g/只)，第2組為成膜凝膠基質(zhì)(1．0 g/只)空白對照組，第3組為陽性物1%的 2，4-二硝基氯苯丙酮溶液(0．2 mL/只)陽性對照組。

致敏接觸:取上述受試物涂在試驗(yàn)前24 h脊背兩側(cè)已脫毛的豚鼠左側(cè)皮膚上，用醫(yī)用繃帶、膠布固定，持續(xù)6 h，用溫開水擦洗干凈給藥部位。第7天和第14天以同樣方式重復(fù)1次，共3次。激發(fā)接觸:于末次給受試物致敏后14 d，將上述受試物再涂于豚鼠脊背部右側(cè)脫毛區(qū)，6 h后去除受試物，用溫開水擦洗干凈給藥部位，即刻借助眼科反光鏡觀察皮膚過敏反應(yīng)情況，照表1、表3評分，于24，48，72 h再次觀察，按照國家藥品監(jiān)督管理局藥物研究技術(shù)指導(dǎo)原則的評分標(biāo)準(zhǔn)[5]，對皮膚紅斑和水腫進(jìn)行評分，空白對照與陽性物對照組同法觀察。結(jié)果見表4。

表3 皮膚致敏性評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

可見，在激發(fā)接觸觀察中，第1組豚鼠右側(cè)脊背脫毛部位涂擦硝酸咪康唑/糠酸莫米松復(fù)方成膜凝膠，第2組涂擦成膜凝膠基質(zhì)，分別在0，24，48，72 h后與其自身左側(cè)對照觀察，均未見出現(xiàn)紅斑和水腫現(xiàn)象;第3組豚鼠右側(cè)涂1%的2，4-二硝基氯苯丙酮溶液，其分別在 0，24，48，72 h后與其自身左側(cè)對照觀察，有相當(dāng)部分豚鼠皮膚出現(xiàn)明顯紅斑或(和)水腫現(xiàn)象。

表4 咪康唑莫米松成膜凝膠對豚鼠皮膚過敏反應(yīng)的評定結(jié)果

3 討論

選用泊洛沙姆407和188為混合基質(zhì)制配的成膜凝膠，具有良好的效果[6-7]，且其載藥量大，已廣泛應(yīng)用于眼、耳、鼻[8]及陰道局部用藥[1]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，本皮膚成膜凝膠對家兔的完整皮膚和破損皮膚均無刺激性，對豚鼠的皮膚亦無過敏性反應(yīng)，說明本品應(yīng)用于臨床安全、可靠。

[1]金璐燕，李 娟．泊洛沙姆407在制劑中的應(yīng)用進(jìn)展[J]．藥學(xué)與臨床研究，2009，17(3):231-234．

[2]張丹霞，賴東梅，陳惠英，等．咪康唑莫米松成膜凝膠的制備及其質(zhì)量控制[J]．中國藥業(yè)，2013，22(5):53-55．

[3]國家食品藥品監(jiān)督管理局．藥物研究技術(shù)指導(dǎo)原則:2005[M]．北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2006:234-250．

[4]孫敬方．動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M]．北京:人民衛(wèi)生出版社，2002:191，374-375．

[5]ZGPT5-1．中藥、天然藥物免疫毒性(過敏性、光變態(tài)反應(yīng))研究的技術(shù)指導(dǎo)原則[S]．

[6]Niu G，Du F，Song L，et al．Synthesis and characterization of reactive poloxamer 407s for biomedical applications[J]．J Control Release，2009，138(1):49-56．

[7]Dumortier G，Grossiord JL， Agnely F，et al．A review of poloxamer 407 Pharmaceutical and pharmacological characteristics[J]．Pharm Res，2006，23(12):2 709-2 728．

[8]Zakinm，Awad GA，Mortada ND，et al．Enhanced bioavailability of metoclopranide HCL by intranasal administration of a mucoadhesive in situ gel with modulated rheological and mucociliary transport Properties[J]．Eur J Pharm Sci，2007，32(4-5):296-307．