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    交叉配血不合原因分析及處理

    2013-04-08 09:48:26胡飄萍
    關(guān)鍵詞:供血者供者受者

    胡飄萍

    (南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院輸血科,江西南昌330006)

    ·講座·

    交叉配血不合原因分析及處理

    胡飄萍

    (南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院輸血科,江西南昌330006)

    交叉配血;不合;輸血;紅細(xì)胞凝集

    輸血治療是一項(xiàng)重要的臨床治療手段,在病員救治的過程中發(fā)揮著不可替代的作用。隨著醫(yī)療水平的發(fā)展,輸血安全成為日益關(guān)注的問題。臨床輸注全血或含紅細(xì)胞成分血液前需要做交叉配血試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)供血者和受血者的紅細(xì)胞和血漿間是否存在抗原抗體反應(yīng),以保證臨床用血安全。實(shí)際工作中,往往會(huì)發(fā)生交叉配血不相合的情況,即主側(cè)或次側(cè)出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集?;诨颊哐丸b定無誤前提下,本文就可能引起配血困難的情況進(jìn)行總結(jié)并提出相應(yīng)的處理方法。

    1 紅細(xì)胞假凝集

    部分交叉配血實(shí)驗(yàn)是由于血液標(biāo)本的原因?qū)е录訇栃越Y(jié)果,干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。其中可以是患者的血液中含有某些物質(zhì)、抽取患者血液時(shí)未與抗凝劑充分混勻或供血者血辮抗凝不充分。

    1.1 患者高免疫球蛋白血癥或靜脈輸入高分子藥物多發(fā)性骨髓瘤,巨球蛋白血癥、霍奇金病、嚴(yán)重肝臟疾病等,由于血清蛋白分泌增加,白蛋白/球蛋白比例失調(diào),血漿黏稠度增加。交叉配血時(shí),主側(cè)交叉中供者紅細(xì)胞表面Zeta電位降低,形成緡錢狀假凝集。靜脈輸入高分子藥物如甘露醇、羥乙基淀粉或右旋糖酐等亦可導(dǎo)致紅細(xì)胞呈緡錢狀改變。

    消除方法:采用試管法配血(聚凝胺法和鹽水法),在配血的主管離心后去血漿,加3滴生理鹽水觀察結(jié)果。

    1.2 患者血液中白細(xì)胞或血小板數(shù)量增高慢性粒細(xì)胞性白血病患者白細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯增高時(shí),血液標(biāo)本經(jīng)1000g離心1min處理,血漿中混有大量的白細(xì)胞。由于白細(xì)胞平均體積大于紅細(xì)胞并且其變形能力僅為紅細(xì)胞的1/1000,微柱凝膠卡配血離心時(shí),交叉配血反應(yīng)體系中的細(xì)胞在微柱凝膠中下移,白細(xì)胞不能全部通過微孔進(jìn)而將微孔堵塞導(dǎo)致游離的紅細(xì)胞不能順利通過微孔到達(dá)底部,導(dǎo)致假陽性[1]。EDTA抗凝標(biāo)本中的血小板計(jì)數(shù)較高時(shí),大量血小板聚集成團(tuán)塊狀。交叉配血前,標(biāo)本離心速度、時(shí)間不夠會(huì)導(dǎo)致血小板懸浮于血漿中,對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響[2]。

    消除方法:將患者EDTA抗凝血液經(jīng)2000g離心5~10 min處理,將血漿中的白細(xì)胞或血小板充分沉淀,可消除血液細(xì)胞成分對(duì)交叉配血結(jié)果的影響。

    1.3 血漿中纖維蛋白原增高患者血漿存在大量的纖維蛋白原,或供血者血辮呈部分抗凝時(shí),交叉配血試驗(yàn)過程中纖維蛋白原有可能被激活轉(zhuǎn)變成纖維蛋白,夾帶紅細(xì)胞形成凝塊,干擾交叉配血結(jié)果的判斷。

    消除方法:①加溫孵育法去除交叉配血過程中纖維蛋白原干擾,將標(biāo)本在37~42℃孵育10~ 30min,離心后再進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)。②可采用細(xì)玻璃棒碾壓進(jìn)行鑒別。用細(xì)玻璃棒對(duì)凝集塊輕輕碾壓,在顯微鏡下觀察碾壓前后,紅細(xì)胞是否由凝集現(xiàn)象轉(zhuǎn)變成分散狀態(tài),且紅細(xì)胞形態(tài)改變,出現(xiàn)該現(xiàn)象為假凝集[3]。③為排除纖維蛋白原的干擾,可考慮使用血清進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)。

    1.4 標(biāo)本溶血溶血性貧血患者或是燒傷科患者,由于存在大量的紅細(xì)胞碎片,微柱凝膠法時(shí),紅細(xì)胞碎片容易堵塞凝膠微孔而使紅細(xì)胞不能完全到達(dá)底部,導(dǎo)致假陽性。

    消除方法:改用凝聚胺法交叉配血[4,5],在顯微鏡下仔細(xì)觀察紅細(xì)胞是否真凝集。

    2 紅細(xì)胞真凝集

    2.1 不規(guī)則抗體紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體是ABO系統(tǒng)的以外的同種抗體,可經(jīng)譜細(xì)胞鑒定抗體特異性。不規(guī)則抗體多因同種異體輸血、妊娠產(chǎn)生,新生兒可從母體被動(dòng)獲得IgG類抗體,李雪英等[6]

    對(duì)無償獻(xiàn)血人群紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體篩查,共檢出0.3%的人存在不規(guī)則抗體,其中女性抗體檢出率明顯高于男性。如果供血者的紅細(xì)胞含有與受血者的不規(guī)則抗體相對(duì)應(yīng)的抗原,交叉配血時(shí),可出現(xiàn)凝集。配血時(shí),選擇不含有與不規(guī)則抗體對(duì)應(yīng)的紅細(xì)胞抗原的血液交叉配血。

    2.2 藥物致敏臨床上,部分患者既無輸血史,又無自身免疫性疾病病史且血漿總蛋白正常,無白球蛋白比例倒置和纖維蛋白原增高,出現(xiàn)直接抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)(DAT)陽性[7],如果患者有明確的相關(guān)藥物使用史,應(yīng)考慮為藥物致敏。患者紅細(xì)胞膜受某些藥物(以頭孢菌素類最多見)而改變,導(dǎo)致非特異性地吸附蛋白,造成DAT陽性。由藥物影響造成的DAT陽性[8],導(dǎo)致的配血困難的比例越來越大。懷疑藥物致敏時(shí)可進(jìn)行藥物抗體檢測,若確定某種藥物所致,應(yīng)避免使用,在停藥一段時(shí)間后,DAT結(jié)果可轉(zhuǎn)為陰性。

    2.3 自身抗體

    2.3.1 冷凝集冷凝集是指由自身抗體引起的,紅細(xì)胞在冷環(huán)境中的凝集成團(tuán)的現(xiàn)象。紅細(xì)胞膜表面物質(zhì)的構(gòu)型會(huì)隨環(huán)境溫度的變化而發(fā)生改變。在較低溫度時(shí),紅細(xì)胞膜表面物質(zhì)的構(gòu)型發(fā)生改變,暴露出某些抗原決定簇,能與相應(yīng)抗體結(jié)合。而在體溫條件下,紅細(xì)胞膜物質(zhì)的構(gòu)型阻礙了冷凝集素與相應(yīng)的抗原決定簇結(jié)合。冷凝集反應(yīng)在0~4℃時(shí)最強(qiáng),紅細(xì)胞凝集最明顯;隨溫度的升高,抗原抗體復(fù)合物逐漸解離,凝塊消失。

    患者含有較高效價(jià)的冷凝集素時(shí),血樣采取以下方法處理:采集血樣后,立即離心,獲得壓積紅細(xì)胞;用37℃溫生理鹽水洗滌紅細(xì)胞;如仍有凝集現(xiàn)象,將洗滌后的紅細(xì)胞45℃水浴放散3min或巰基試劑處理以破壞IgM;交叉配血在37℃進(jìn)行。

    2.3.2 溫自身抗體部分免疫性疾病患者,血清和紅細(xì)胞中均具有高效的病理性自身抗體,可與供血者紅細(xì)胞及自身紅細(xì)胞發(fā)生凝集,造成交叉配血主次側(cè)均發(fā)生凝集。在交叉配血時(shí)可采取如下措施:(1)將患者紅細(xì)胞與自身血漿吸收,用吸收后的血漿交叉配血;(2)與多人份ABO血型相同的血液做配血試驗(yàn),選擇主側(cè)凝集最弱的供血者血液,制成洗滌紅細(xì)胞后輸注;(3)如果自身抗體干擾ABO血型鑒定,而患者的病情危急,需緊急輸血搶救生命時(shí),可立即給與O型洗滌紅細(xì)胞輸注。

    2.4 移植患者接受ABO血型不同的造血干細(xì)胞移植后,受者原有血型的紅細(xì)胞不斷衰亡,相應(yīng)的抗體逐漸消失,最終ABO血型轉(zhuǎn)為供者血型。在受者完全轉(zhuǎn)變?yōu)楣┱哐椭?,患者血型及抗體會(huì)發(fā)生變化,輸血前應(yīng)根據(jù)患者病情變化及血型改變的情況,制訂合理的輸血策略,選擇相應(yīng)的血液成分[9]。

    ABO血型主要不合的移植(受者體內(nèi)存在抗供者ABO血型抗原的抗體),選擇紅細(xì)胞血液制品的血型與受者相同。為了減少同種抗體的輸入,以利于受者紅細(xì)胞血型轉(zhuǎn)變?yōu)楣┱哐?,可以考慮輸注洗滌紅細(xì)胞,而血小板和血漿制品的血型與供者相同。

    ABO血型次要不合的移植(供者體內(nèi)存在抗受者ABO血型抗原的抗體),在移植后3周內(nèi)應(yīng)監(jiān)測受者血型抗體效價(jià)并做抗人球蛋白試驗(yàn),如果DAT反應(yīng)呈陽性,應(yīng)給患者輸注O型洗滌紅細(xì)胞,如果抗人球蛋白試驗(yàn)陰性,可以輸注與供者血型相同的紅細(xì)胞或普通O型紅細(xì)胞;血小板和血漿的血型與受者相同。

    ABO血型主要不合及次要不合同時(shí)存在(受者體內(nèi)存在抗供者ABO血型抗原的抗體,同時(shí)供者體內(nèi)也存在抗受者ABO血型抗原的抗體),在受者血型完全轉(zhuǎn)變?yōu)楣┱哐颓皯?yīng)輸注O型紅細(xì)胞,AB型血小板、血漿。

    2.5 紅細(xì)胞多凝集或全凝集紅細(xì)胞多凝集或全凝集可有基因變異,也可因血中紅細(xì)胞被細(xì)菌或細(xì)菌酶污染,引起紅細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)改變,暴露出T抗原,T抗原具有免疫原性。大多數(shù)成人血清中含抗T抗體,因此,交叉配血時(shí),T活化紅細(xì)胞幾乎與所有供血者的血清發(fā)生凝集反應(yīng)。鑒定交叉配血是否由紅細(xì)胞全凝集引起,可將患者紅細(xì)胞與臍帶血清或6個(gè)月以內(nèi)嬰兒血清作用,因6個(gè)月以內(nèi)嬰兒血清中不存在抗T抗體,不能與T抗原反應(yīng),故紅細(xì)胞不凝集。將患者紅細(xì)胞分別與10人份AB血清反應(yīng),部分凝集則稱為多凝集,如果全部凝集則是全凝集。

    由疾病導(dǎo)致的全凝集現(xiàn)象是暫時(shí)的,一般病愈或控制感染后即自行消失,輸血時(shí)選用同型洗滌紅細(xì)胞制品,而避免輸全血或單獨(dú)輸血漿。

    2.6 供血者DAT陽性正常人群約有1‰的供血者有DAT陽性,其紅細(xì)胞應(yīng)避免輸入患者體內(nèi)。同種異體輸血有傳播疾病和發(fā)生輸血反應(yīng)等風(fēng)險(xiǎn),應(yīng)盡量避免或減少輸注,提倡自身輸血和成分輸血。用以交叉配血的患者血樣必需是3天之內(nèi)的、最能反映患者輸血前的免疫狀態(tài)的標(biāo)本。嚴(yán)把輸血前交叉配血關(guān),規(guī)范操作規(guī)程并嚴(yán)格執(zhí)行,是減少輸血反應(yīng)、保障輸血安全的重要手段。

    [1]夏兵,戴書萍,裴寶芹.慢性粒細(xì)胞白血病致微柱凝膠法交叉配血假陽性1例[J].中國輸血雜志,2011,24(2):152-153.

    [2]鄒海虹,甘福生.凝聚胺法在交叉配血試驗(yàn)中的應(yīng)用價(jià)值[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2012,9(22):2889-2891.

    [3]王晶吉.交叉配血試驗(yàn)中纖維蛋白原的干擾原因分析和去除方法的探討[J].中國醫(yī)藥指南,2011,9(10):96-97.

    [4]楊瑩,譚雅玲,蔣永青.卡式配血在臨床輸血中的應(yīng)用價(jià)值[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2011,29(3):332.

    [5]陳燕萍,王長奇,朱芳,等.微柱凝膠技術(shù)鑒定血型和篩檢不規(guī)則抗體的臨床應(yīng)用[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2008,26(6):719.

    [6]李雪英,張國平,邱玉霞,等.35 751例健康獻(xiàn)血者紅細(xì)胞不規(guī)則抗體的分布及特點(diǎn)[J].山東醫(yī)藥,2011,51(15):94-95.

    [7]雷國華,鐘清蘭,熊永萍,等.微柱凝膠免疫檢測法在配血及血型鑒定中的應(yīng)用[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2010,28(2):202.

    [8]梁潔玲,黃美群,王發(fā)雄,等.抗人球蛋白試驗(yàn)陽性患者分布特征探討[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2012,33(17):2161-2162.

    [9]高志勇,謝毅.血型不合造血干細(xì)胞移植前后的輸血支持[J].中國輸血雜志,2010,23(6):417-419.

    457.4.1+1

    A

    1674-1129(2013)01-0059-02

    10.3969/j.issn.1674-1129.2013.01.020

    江西省衛(wèi)生廳科技計(jì)劃(編號(hào)20133048)

    胡飄萍,女,1981年7月生,武漢大學(xué)碩士學(xué)位學(xué)歷,主要從事臨床輸血研究。

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