鄧紅梅 席亞萍
1.永州市第二中醫(yī)院,湖南 永州 425006;2.東安縣人民醫(yī)院,湖南 永州 425006
中草藥對(duì)耐藥與非耐藥菌株抑菌活性的對(duì)比分析
鄧紅梅1席亞萍2
1.永州市第二中醫(yī)院,湖南 永州 425006;2.東安縣人民醫(yī)院,湖南 永州 425006
目的探討和研究五倍子等十二種中草藥對(duì)耐藥與非耐藥菌株抑菌活性的對(duì)比分析。方法對(duì)金黃色葡萄球菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、腸球菌以及耐萬古霉素腸球菌這四種菌株進(jìn)行重要抗菌試驗(yàn)試管法的測定,進(jìn)行最低抑菌濃度的統(tǒng)計(jì)和記錄。結(jié)果五倍子、黃連、大黃、黃柏、黃芩對(duì)金黃色葡萄球菌和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌有較強(qiáng)的抑菌作用;五倍子、黃連、黃柏、白頭翁、大黃以及敗醬草對(duì)腸球菌和耐萬古霉素腸球菌有著較強(qiáng)的抑菌活性。結(jié)論此十二種中藥材對(duì)于以上四種菌株有著不同程度的抑制作用,但是對(duì)于耐藥菌株和非耐藥菌株并無明顯的差異。
耐藥菌株;非耐藥菌株;最小抑菌濃度;中藥;抗菌效價(jià)
中藥材中有許多藥物都有著抗菌消炎的作用,雖然其作用機(jī)制尚未十分明確,但是可以肯定的是具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值,且不良反應(yīng)的發(fā)生率相較西藥而言較低,此外,更值得一提的是,這些中藥材的成分較為復(fù)雜,能夠?qū)甑亩鄠€(gè)環(huán)節(jié)產(chǎn)生作用,因此使菌株不容易產(chǎn)生相應(yīng)的耐藥性。為了探討和研究五倍子等十二種中草藥對(duì)耐藥與非耐藥菌株抑菌活性的對(duì)比分析,筆者對(duì)該院2008年4月—2010年4月期間住院患者的檢驗(yàn)標(biāo)本進(jìn)行了相關(guān)的實(shí)驗(yàn),對(duì)五倍子等十二種中藥材進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn),現(xiàn)報(bào)道如下。
采用杭州會(huì)兒儀器設(shè)備有限公司所提供的DNP-9082型電熱恒溫培養(yǎng)箱、由常州諾基電子器械有限公司提供的SW-CJ-1FD型醫(yī)用超凈工作臺(tái)以及產(chǎn)自瑞士的XP6型分析天平。
選取五倍子、黃連、大黃、黃柏、黃芩、蒼術(shù)、白頭翁、連翹、紫菀、敗醬草、金銀花、通草這十二種中藥材進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。此12種中藥材均由我院中藥房提供。
分別選取金黃色葡萄球菌和腸球菌及其它們的耐藥菌株,即金黃色葡萄球菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、腸球菌以及耐萬古霉素腸球菌。以上菌株從我院2008年4月—2010年4月期間的住院患者的檢驗(yàn)標(biāo)本中提取,在進(jìn)行試驗(yàn)之前對(duì)4種菌株分別采取了不同的形態(tài)、染色性、生化反應(yīng)和抗原性的鑒定。
1.4.1 藥液提取 采用2次煮沸的方法進(jìn)行藥液提取[1]。先稱取中藥材300g,放入1L蒸餾水中進(jìn)行浸泡,浸泡時(shí)間為30 min。之后將蒸餾水連帶藥材一起用武火煮沸,保持水面沸騰文火煮30 min,之后將藥渣過濾,保留藥液,將藥渣再加入500 mL蒸餾水煮沸,文火煮30 min之后濾除藥渣。將兩次藥液進(jìn)行合并之后濃縮為300 mL藥液,調(diào)整pH為7.4~7.6。置于離心管,將轉(zhuǎn)速調(diào)整為4000 r/min進(jìn)行離心10 min。之后對(duì)藥液進(jìn)行高壓蒸汽滅菌后制備為實(shí)驗(yàn)藥液。12種藥材均分別采用此種方法進(jìn)行制備,并分別存放。
1.4.2 菌液制備 在無菌的條件下利用接種環(huán)將4種菌株分別接種于瓊脂斜面培養(yǎng)基中,在37℃的環(huán)境中培養(yǎng)24 h;之后利用接種環(huán)傳種于無菌肉湯培養(yǎng)基,再培養(yǎng)18 h;然后再將培養(yǎng)的菌株傳種于無菌肉湯繼續(xù)培養(yǎng)6 h備用。在進(jìn)行試驗(yàn)前將菌液濃度按1∶1000稀釋[4]。取12種不同藥液的提取液分別和4種不同的菌液進(jìn)行混合,采用中藥抗菌試驗(yàn)試管法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)[2-4]。將實(shí)驗(yàn)結(jié)果分別進(jìn)行記錄并統(tǒng)計(jì)分析。
使用SPSS13.0軟件對(duì)以上數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量數(shù)據(jù)以()來表示,組間比較則采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)量以百分比顯示,組間比較使用χ2來檢驗(yàn)。
從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出,五倍子、黃連、大黃、黃柏、黃芩對(duì)金黃色葡萄球菌和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌有較強(qiáng)的抑菌作用;五倍子、黃連、黃柏、白頭翁、大黃以及敗醬草對(duì)腸球菌和耐萬古霉素腸球菌有著較強(qiáng)的抑菌活性。具體實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)見表1、2、3。
表1 12種中藥材抗菌實(shí)驗(yàn)材料統(tǒng)計(jì)(藥液、菌液)
表2 12種中藥材對(duì)金黃色葡萄球菌和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的抑菌活性統(tǒng)計(jì)
表3 12種中藥材對(duì)腸球菌和耐萬古霉素腸球菌的抑菌活性統(tǒng)計(jì)
最近幾年,中醫(yī)的優(yōu)越性與重要性開始得到人們的關(guān)注,臨床用藥也開始加重中藥比例,中西醫(yī)結(jié)合治療臨床疾病更是盛行。中藥的種類有很多,有我們?nèi)粘I僖姷拿F中藥到家庭常見的一般藥材。中藥種類中有絕大部分藥材都具有抗菌消炎的作用。但臨床研究發(fā)現(xiàn)其作用機(jī)制尚未十分明確,但其藥用價(jià)值是不可忽視的,且與西藥相比,中藥的不良反應(yīng)較少。更重要的是這些中藥材的抗菌效果并不因?yàn)槟撤N菌株的耐藥性的增強(qiáng)而減弱。從以上統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)我們可以看出,五倍子、黃連、大黃、黃柏、黃芩、蒼術(shù)、白頭翁、連翹、紫菀、敗醬草、金銀花、通草12種中藥材對(duì)于金黃色葡萄球菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、腸球菌以及耐萬古霉素腸球菌這四種菌株均有不同程度的活性抑制作用,而且五倍子、黃連、大黃、黃柏、黃芩對(duì)金黃色葡萄球菌和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌有較強(qiáng)的抑菌作用;五倍子、黃連、黃柏、白頭翁、大黃以及敗醬草對(duì)腸球菌和耐萬古霉素腸球菌有著較強(qiáng)的抑菌活性。該研究顯示,雖然同一種藥材對(duì)于耐藥菌株和非耐藥菌株的活性抑制作用稍有不同,但是總體來說耐藥菌株和非耐藥菌株對(duì)此種中藥材所起到的活性抑制作用影響并不大,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。這就說明對(duì)于這些產(chǎn)生耐藥性的菌株而言,同一種中藥材同樣能夠起到抗菌消炎的作用。相信在臨床上加以關(guān)注并應(yīng)用,是對(duì)于這些產(chǎn)生耐藥性的菌種的一種新的治療思路,為治療各種感染性疾病提供了新的治療參考和依據(jù)。
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2013-03-05)