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    豬圓環(huán)病毒病研究進(jìn)展

    2013-03-23 15:30:05劉今竺盤錦市興隆臺(tái)區(qū)檢驗(yàn)中心124010
    關(guān)鍵詞:養(yǎng)豬業(yè)圓環(huán)病原

    劉今竺 盤錦市興隆臺(tái)區(qū)檢驗(yàn)中心 124010

    劉 飛 盤錦市興隆臺(tái)區(qū)檢驗(yàn)中心 124010

    王云飛 盤錦市興隆臺(tái)區(qū)檢驗(yàn)中心 124010

    豬圓環(huán)病毒?。≒CVD)是繼豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)之后發(fā)現(xiàn)的重要傳染病。近年來,我國郎洪武、曹勝波等研究人員先后分別通過血清學(xué)調(diào)查及PCR對北京、天津、遼寧、上海、山東等7個(gè)省市的559份血清進(jìn)行檢測,結(jié)果顯示PCV-2抗體陽性率為42.9%,從而證實(shí)我國一定區(qū)域內(nèi)存在豬圓環(huán)病毒。PCV-2廣泛存在于世界很多的養(yǎng)豬國家和地區(qū),而與之有關(guān)的疾病包括PMWS、豬皮炎及腎病綜合征(PDNS)、豬增生性壞死性肺炎(PNP)等可能會(huì)給全球養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大的災(zāi)難,應(yīng)該引起獸醫(yī)工作者的高度重視。

    1 流行病學(xué)

    PCV的主要易感動(dòng)物是豬,但也有報(bào)道稱,在人、牛和鼠血清中也存在能與PCV發(fā)生群特異性結(jié)合的低水平抗體。PCV經(jīng)口、呼吸道感染不同日齡的豬,少數(shù)懷孕母豬感染PCV后,經(jīng)胎盤垂直傳染給仔豬。感染的豬可通過鼻液、糞便等排出病毒。PMWS可見于5-16周齡的豬,但最常見于6-8周齡。豬群發(fā)病率為3%-50%,病死率為8%-35%。該病發(fā)展緩慢,可持續(xù)12-18個(gè)月。此外,該病與集約化生產(chǎn)方式有關(guān),飼養(yǎng)管理不善、環(huán)境惡劣、飼養(yǎng)密度過大、應(yīng)激及不同年齡和不同來源的豬編群等均可誘發(fā)該病。Larcochelle等報(bào)道,PCV-2病毒可間歇性地自公豬精液中排出,感染公豬的精液可作為一種潛在的PCV-2病毒來源。Kiupel M等報(bào)道,被PCV-2感染的小鼠能否排毒尚不清楚。

    2 病原特征

    2.1 基本特征

    豬圓環(huán)病毒(PCV)屬于圓環(huán)病毒科、圓環(huán)病毒屬,為已知最小的動(dòng)物病毒之一。PCV以滾環(huán)方式復(fù)制,呈20面體對稱,無囊膜,直徑約17-22nm。

    2.2 PCV病毒的影響因素

    PCV對酸性環(huán)境(pH值為3)、氯仿或者高溫有抵抗作用,對苯酚、季胺類化合物、氫氧化鈉和氧化劑等較敏感。PCV在原代胎豬腎細(xì)胞、恒河猴腎細(xì)胞及BHK-21細(xì)胞上不生長,可在PK-15細(xì)胞中生長,但不引起細(xì)胞病變,且需將PCV盲傳多代才能使病毒有效增殖。在接種PCV的PK-15細(xì)胞培養(yǎng)物中加入d-氨基葡萄糖,可促進(jìn)其復(fù)制,使得感染PCV的細(xì)胞數(shù)量提高30%。感染PCV的細(xì)胞內(nèi)含有許多胞漿內(nèi)包涵體,少數(shù)感染細(xì)胞內(nèi)含有核內(nèi)包涵體。

    3 與PCV-2有關(guān)的疾病及診斷

    3.1 并發(fā)癥及病理變化

    世界各地的學(xué)者對豬圓環(huán)病毒進(jìn)行了大量的研究,發(fā)現(xiàn)PCV-2不僅是PMWS的主要病原,同時(shí)還與PDNS、PNP等疾病有所聯(lián)系。另外,PRRS、PPV、傳染性先天性震顫(CT)、PRV等均與PCV-2感染有重要關(guān)聯(lián)。在臨床上,以PMWS較為多見,患豬表現(xiàn)為生長發(fā)育不良,漸進(jìn)性消瘦,體重減輕,皮膚與可視黏膜呈現(xiàn)蒼白或黃疸,貧血,肌肉萎縮,衰弱無力,呼吸困難,咳嗽,水樣下痢或黑便。由于細(xì)菌和病毒的二重感染,常常使得PMWS的癥狀較為復(fù)雜。最顯著的病理變化是全身淋巴結(jié),特別是腹股溝淺淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)、支氣管淋巴結(jié)及頜下淋巴結(jié)腫大5-10倍。肺主要呈彌散性、間質(zhì)性病變,質(zhì)地硬如橡皮,肺表面呈花斑狀,灰棕色肺葉與正常的黃到粉紅肺葉相間。肝臟有不同程度的萎縮和纖維化。脾臟腫大,切面呈肉狀,無充血。腎臟腫大,呈現(xiàn)白色,有的因水腫可達(dá)正常大小的5倍。顯微病變可見淋巴細(xì)胞浸潤,在巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及上皮細(xì)胞內(nèi)形成包涵體,在小腸固有層、腹股溝淋巴結(jié)內(nèi)形成合胞體。

    3.2 實(shí)驗(yàn)室診斷

    由于PCV-2感染所致的各種疾病的臨床表現(xiàn)與病理變化并不是特有的,因此對這些疾病的臨床診斷十分困難,必須借助實(shí)驗(yàn)室手段才可以確診。其中,對PMWS的診斷可以參考以下3個(gè)指標(biāo):(1)臨床上可以觀察到類似PMWS的癥狀和病變;(2)可以在淋巴組織中觀察到胞漿包涵體、組織細(xì)胞炎癥浸潤及多核巨噬細(xì)胞;(3)在病變組織中檢測到PCV-2。目前,已建立和應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)室診斷方法有病毒分離與鑒定、間接免疫熒光抗體法(IFA)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、原位核酸雜交(ISH)、免疫組化法(IHC)和多聚酶鏈反應(yīng)(PCR)等。病毒分離與鑒定多用于急性病例的確診和新疫區(qū)的確定,但此法費(fèi)時(shí)費(fèi)力,不適于快速診斷;IFA、ELISA方法主要用于檢測PCV抗體,由于PCV-1和PCV-2有一定的抗原交叉性,所以IFA在PCV的診斷上受到限制;而ELISA具有簡便、快速、可靠的優(yōu)點(diǎn),并且和PPV、PRRS沒有交叉反應(yīng),應(yīng)用前景廣闊;IHC方法主要用于檢測PCV抗原,并進(jìn)行病毒的組織學(xué)定位,具有特異、確實(shí)的優(yōu)點(diǎn),但對實(shí)驗(yàn)人員的要求較高;PCR主要用于檢測PCV病毒的核酸,應(yīng)用型特異性引物可對PCV-1和PCV-2定型,是一種快速簡便特異的方法,尤其是定量PCR和復(fù)合PCR 的建立,為 PCV的檢測、分型、組織中病毒含量的測定、疾病發(fā)展階段的推測及臨床PMWS的診斷提供了有效的工具。

    4 對PCV-2的防制及展望

    目前還沒有有效的疫苗可以用來預(yù)防PCV-2的感染。雖然國內(nèi)外已研制出基因工程苗和亞單位疫苗,但因PMWS并非僅由PCV-2引起,必須與PPV、PRRS等病原協(xié)同作用于免疫系統(tǒng)才能使豬發(fā)病,所以對PCV-2的感染很難奏效。目前采取的主要對策是加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,降低飼養(yǎng)密度,保持良好的圈舍通風(fēng),減少環(huán)境應(yīng)激,合理分群與混養(yǎng),實(shí)行全進(jìn)全出,避免將不同日齡的豬混群飼養(yǎng),從而減少和降低豬群之間PCV-2及其他病原的接觸感染機(jī)會(huì)。建立完善的生物安全體系,將消毒衛(wèi)生工作貫穿于養(yǎng)豬生產(chǎn)的各個(gè)環(huán)節(jié),最大限度地降低豬場內(nèi)污染的病原微生物數(shù)量,減少或杜絕豬群繼發(fā)感染的機(jī)率。有效預(yù)防和控制其他感染性疾病,做好豬瘟、豬偽狂犬病、豬細(xì)小病毒病、豬氣喘病等疫苗的免疫接種,提高豬群整體的免疫水平。減少呼吸道病原體的繼發(fā)感染,增強(qiáng)肺臟對PCV-2的抵抗力。對于早期發(fā)現(xiàn)的疑似感染豬進(jìn)行檢查、隔離和淘汰。避免從疫區(qū)引進(jìn)豬只,嚴(yán)格控制外來人員、車輛、貨物進(jìn)入豬場。同時(shí)避免其他動(dòng)物接近豬場,對老鼠和飛鳥也要進(jìn)行嚴(yán)格控制。

    PCV-2作為一種新發(fā)現(xiàn)的病毒,與其有關(guān)的疾病已經(jīng)成為世界養(yǎng)豬業(yè)的重要傳染病,給養(yǎng)豬業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。盡管世界上許多實(shí)驗(yàn)室對PPV和PRRSV與PCV-2在致病方面的協(xié)同機(jī)制,該病毒對其所導(dǎo)致的各種疾病及PMWS的人工復(fù)制等方面進(jìn)行了大量的研究,獲得了大量的相關(guān)知識(shí)。然而,我們對其分子生物學(xué)特性、病毒對動(dòng)物免疫系統(tǒng)的影響、致病機(jī)理、有效預(yù)防和如何控制該病毒引發(fā)其他疾病以及存在的一些問題等缺乏全面而系統(tǒng)的了解。因此,我們必須對這些方面進(jìn)行更詳細(xì)、更深層的研究。由于該病毒較廣泛地存在于豬體內(nèi),與豬的健康密切相關(guān),尤其是考慮到可能會(huì)用豬的器官進(jìn)行人的異體移植,所以更應(yīng)當(dāng)進(jìn)一步加強(qiáng)對該病原體的研究。另外,目前國內(nèi)關(guān)于PCV的分子生物學(xué)和基因工程方面的研究鮮有報(bào)道,這也給國內(nèi)的獸醫(yī)科技工作者提出了一個(gè)新的課題。我們相信,通過對PCV-2更深入的研究,最終會(huì)發(fā)現(xiàn)并研制出一種有效的疫苗來預(yù)防此病,這將對降低全球養(yǎng)豬業(yè)的經(jīng)濟(jì)損失發(fā)揮不可估量的作用。

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