桑椹采摘后白藜蘆醇含量的變化

朱祥瑞，楊逸文，占鵬飛，沈建棟

（1.浙江大學(xué)應(yīng)用生物資源研究所，杭州 310058；2.安吉縣超龍蠶業(yè)發(fā)展有限公司，浙江湖州 313300；3.湖州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，浙江湖州 313060；4.湖州市南潯尚豪蠶桑專業(yè)合作社，浙江湖州 313000）

桑椹采摘后白藜蘆醇含量的變化

朱祥瑞1，楊逸文2，占鵬飛3，沈建棟4

（1.浙江大學(xué)應(yīng)用生物資源研究所，杭州 310058；2.安吉縣超龍蠶業(yè)發(fā)展有限公司，浙江湖州 313300；3.湖州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，浙江湖州 313060；4.湖州市南潯尚豪蠶桑專業(yè)合作社，浙江湖州 313000）

為探索采摘后的桑椹白藜蘆醇含量的變化，將采摘后放置1～30 h的桑椹，進(jìn)行HPLC分析，結(jié)果顯示，采摘后1～4 h，白藜蘆醇含量略有上升，隨后開始迅速下降，18 h后白藜蘆醇已下降約3/4。

桑椹；白藜蘆醇；含量；變化

桑椹（mulberry fruit）是桑樹（Morus alba L.）的成熟果實，又名桑果、桑棗，屬漿果，營養(yǎng)豐富，功能獨特，是一種寶貴的天然資源。桑椹可以鮮食，也可加工成果汁、果酒等食品。據(jù)文獻(xiàn)報道［1］，桑椹含有白藜蘆醇，這為桑椹在功能性食品的開發(fā)利用，提供了新的途徑。但是，對于桑椹采摘后一定時間內(nèi)的白藜蘆醇含量變化尚未見報道。為充分利用桑椹白藜蘆醇，了解桑椹采摘后其含量的變化，筆者進(jìn)行這方面的實驗，結(jié)果如下。

1 材料與方法

1.1 材料

桑椹：大10成熟果實，2012年5月，采摘于湖州市南潯尚豪蠶桑專業(yè)合作社桑園。

白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)樣品：美國Sigma Chemical Co．LTD產(chǎn)品。

乙腈：美國霍尼韋爾公司（Honeywell）色譜級產(chǎn)品。

1.2 儀器

LC-6A高效液相色譜儀、UV檢測器：日本島津公司。

色譜柱：Hypersil ODS柱（250 mm×416 mm，5 μm），美國Thermo Scientific公司。

分析天平：賽多利斯BSA124S，賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司。

1.3 方法

1.3.1 白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備

精密稱取白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)樣品2.5 mg，用無水乙醇溶解并定容于25 ml容量瓶中。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

分別吸取白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml，用無水乙醇定容于100 ml容量瓶中，搖勻，得濃度分別為1、2、3、4、5 mg/L白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)系列。以無水乙醇為空白對照，各進(jìn)樣10 μl，在306 nm波長下進(jìn)行HPLC分析。以樣品白藜蘆醇量為橫坐標(biāo)（x），峰面積為縱坐標(biāo)（y），計算曲線方程（n=5）和相關(guān)系數(shù)（R2）。

1.3.3 桑椹試樣的制備

采摘適熟的桑椹，平鋪，不重疊、擠壓，以免桑椹受損。在桑椹采摘后的1、2、3、4、5、6、8、10、12、18、24、30 h，分別稱取桑椹100 g，經(jīng)高速勻漿器勻漿，微孔過濾，收集濾液，即為試樣，供HPLC測試之用。測試前，試樣置于低溫冰箱-50℃保存。

1.3.4 桑椹試樣的HPLC測定

（1）色譜條件

流動相：乙腈：水（35：65）

檢測波長：306 nm

柱溫：室溫

流速：1 ml/min

進(jìn)樣：10 μl

（2）樣品分析

在與測定白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)樣品相同的條件下，測試各桑椹試樣的白藜蘆醇含量。

2 結(jié)果與分析

2.1白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)曲線

按1.3.2方法，白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)樣品以及桑椹試樣的HPLC分析圖分別見圖1和圖2。

圖1 白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)樣的HPLC圖Fig 1HPLC chromatogram of resveratrol

圖2 桑椹試樣HPLC圖Fig 2 HPLC chromatogram of mulberry fruit sample

以白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸分析，繪制標(biāo)準(zhǔn)樣品的標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖3。

圖3 白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)樣品的標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig 3The standard graph of resveratrol

圖3曲線經(jīng)計算得出回歸方程為：y=136 520x-709.42，R2=0.9999，說明線性關(guān)系良好。

2.2 精密度和重現(xiàn)性

精密吸取白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)樣品，在同樣條件下用HPLC分別測定5次，其RSD為0.65，實驗精密度良好。

取同一桑椹試樣，制備5份樣品，測定白藜蘆醇含量，其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.79，實驗重現(xiàn)性良好。

2.3 桑椹試樣白藜蘆醇含量變化

將采摘后放置不同時間后處理的桑椹試驗，經(jīng)HPLC測定后，結(jié)果見圖4。

從圖4可以看出，桑椹剛采摘的時候，從1～4 h，白藜蘆醇含量略有上升，從9.5 mg/L到10.6 mg/L。從第5h開始，白藜蘆醇含量逐漸下降，且隨著放置的時間延長，下降幅度增大，到第18 h，白藜蘆醇的含量僅為1.7 mg/L左右，約為1～4 h時的1/4。

圖4 桑椹采摘后白藜蘆醇含量的變化Fig 4 The content change of resveratrol after mulberry fruit was

3 討論

（1）白藜蘆醇是植物在抵抗真菌的侵染、機(jī)械和紫外線等傷害時產(chǎn)生的植保素類次生代謝產(chǎn)物［2］。因此，采摘后1～4 h，桑椹白藜蘆醇含量略有上升的原因，可能是桑椹采摘時受到一定的機(jī)械刺激所致。

（2）采摘后5 h，隨著放置時間的延長，桑椹白藜蘆醇含量逐漸下降，這可能是桑椹采摘后，逐漸變質(zhì)，桑椹細(xì)胞內(nèi)的某些分解酶類開始作用，轉(zhuǎn)變?yōu)榘邹继J醇的代謝產(chǎn)物［3］。

（3）在開發(fā)白藜蘆醇產(chǎn)品時，為了獲得和保持較高含量的白藜蘆醇，應(yīng)該在桑椹采摘后4 h內(nèi)進(jìn)行處理。

（4）本試驗測得的桑椹（汁）的白藜蘆醇最高含量，比前期試驗結(jié)果［4］偏高，接近于桑椹果皮中的白藜蘆醇含量，這可能與采用高速勻漿器粉碎桑椹，造成桑椹細(xì)胞充分破碎有關(guān)，也可能與機(jī)械損傷的誘導(dǎo)以及白藜蘆醇苷轉(zhuǎn)化為白藜蘆醇有關(guān)［5］。

［1］朱祥瑞，費建明，楊逸文，等.桑椹和桑枝中白藜蘆醇的提取及含量測定［J］.蠶業(yè)科學(xué)，2007，33（1）：110～112.

［2］Leila Belguendouz，Lucie Fremont，Alain Linard.Resveratrol inhibits metal ion-dependent and independent peroxidation of porcine low-density lipoproteins Original Research Article［J］.Biochemical Pharmacology，1997，53（9）：1347～1355.

［3］王婭寧，尉亞輝，郝浩永，等.白藜蘆醇代謝物的研究進(jìn)展［J］.西北植物學(xué)報，2007，27（4）：0852～0857.

［4］占鵬飛，張燕，朱祥瑞.桑樹各部位中白藜蘆醇的提取與測定［J］.蠶桑通報，2008，39（4）：19～22.

［5］董學(xué)偉，余慧琳，陳莉，等.酶轉(zhuǎn)化虎杖苷制備白藜蘆醇［J］.食品與發(fā)酵工業(yè)，2008，34（12）：122～124.

“浙鳳一號”等2對桑蠶新品種通過審定

由浙江省農(nóng)科院蠶桑研究所育成的桑蠶新品種“浙鳳一號”和“華菁×平72”在2013年1月28日召開的第45次省農(nóng)作物品種審定會議上通過審定。

“浙鳳一號”是以降低蠶種生產(chǎn)成本為目標(biāo)的我省首個中絲量單交新品種，原名雌29×卵36，于2007年育成，2008～2012年完成新品種實驗室、農(nóng)村試驗。該品種具有發(fā)育齊整、繭形大、繭絲質(zhì)優(yōu)的特點，蠶種生產(chǎn)成本較常規(guī)品種可降低20%以上。適宜在我省各蠶區(qū)飼養(yǎng)，尤其在環(huán)境、葉質(zhì)條件較好的季節(jié)和區(qū)域更能發(fā)揮其優(yōu)勢。

“華菁×平72”是我省首個多絲量雄蠶品種，于2008年育成，2009～2012年完成新品種實驗室、農(nóng)村試驗。該品種具有發(fā)育整齊，體形大，繭型勻整、繭絲質(zhì)優(yōu)的特點，我省各蠶區(qū)均可飼養(yǎng)，尤宜在環(huán)境、葉質(zhì)條件較好的季節(jié)和區(qū)域飼養(yǎng)。

（浙江省農(nóng)科院蠶桑研究所）

Content Change of Resveratrol in Fresh Mulberry Fruit after Picked up

ZHU Xiang-rui1，YANG Yi-wen2，ZHAN Peng-fei3，SHEN Jian-dong4
（1.Institute of applied bioresources,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China;2.Anji Chaolong Sericultural Development Company,Anji 313300 Zhejiang,China;3.Huzhou Academy of Agricultural Science，Huzhou 313000 Zhejiang,China;4.Shanghao Sericultural Professional Cooperation.Nanxun 313000 Zhejiang,China）

To investigate the content change of resveratrol in fresh mulberry fruit after picked up,the resveratrol in fresh mulberry fruit was determined by HPLC after picked 1～30 hours.The experiment result showed that the content of resveratrol had slight increase after picked 1～4 h,then it decreased fast,at last,the resveratrol was left 1/4 of the original content after picked up 18 h.

fresh mulberry fruit;resveratrol;content;change

S886.9

A

0258-4069（2013）01-

項目來源：湖州市科技局攻關(guān)計劃農(nóng)業(yè)項目（2012C22154）

朱祥瑞（1957-），男，副教授，從事蠶業(yè)資源開發(fā)利用研究。Email：xrzhu@zju.edu.cn