偏光顯微鏡診斷早期尿石病

李永嵐，王維民，王 由，張亞強(qiáng)

偏光顯微鏡診斷早期尿石病

李永嵐1，王維民1，王 由1，張亞強(qiáng)2

目的：尿石發(fā)生早期難以確診，本研究對(duì)有臨床癥狀但影像學(xué)陰性的腎內(nèi)微結(jié)石探索早期的診斷方法。方法：用乙二醇制作大白鼠草酸鈣尿石動(dòng)物模型，用偏光顯微鏡對(duì)模型動(dòng)物的尿沉渣和對(duì)30例已確診尿石患者的尿沉渣進(jìn)行比較，觀察尿沉渣中的紅細(xì)胞、管型和晶體類型，找出其中相同的組分作為診斷指標(biāo)；尿石患者用葉金膠囊治療。結(jié)果：模型動(dòng)物及尿石患者的尿沉渣中多數(shù)有晶化紅細(xì)胞、少數(shù)有晶體管型，并伴有大量晶體。動(dòng)物模型晶體可見(jiàn)一水、二水草酸鈣晶，十字型晶或無(wú)定型尿酸晶。尿石患者晶體特點(diǎn)同時(shí)有微晶、亦可見(jiàn)晶體鑄型。30例尿石患者口服葉金膠囊，其中有8例排出小結(jié)石或鏡下結(jié)石。結(jié)論：用偏光顯微鏡診斷早期尿石病，方法簡(jiǎn)單可靠，具有可行性。

尿石病；顯微鏡技術(shù)；草酸鈣動(dòng)物模型

尿石病是泌尿外科最常見(jiàn)疾病。目前診斷尿石病的主要方法是用影像學(xué)手段。但用影像學(xué)確診的尿石直徑大小均已超過(guò)0.4 cm，對(duì)影像學(xué)陰性的早期尿石病和腎內(nèi)微石患者仍難以確診。我們采用偏光顯微鏡觀察快速草酸鈣模型動(dòng)物的尿沉渣和臨床尿石患者的尿沉渣中的晶化紅細(xì)胞、管型和晶體作為基礎(chǔ)指標(biāo)，建立了早期尿石病的診斷方法。結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料和方法

1.1 材料 Westar大鼠，70只雌雄不限，體質(zhì)量（200±20）g，隨機(jī)分為正常組20只，模型組50只，由遼寧省沈陽(yáng)藥科大學(xué)動(dòng)物室提供。藥品：乙二醇，葉金膠囊（由槲葉、金錢(qián)草、氧化鎂、維生素B6組成），沈陽(yáng)市東陵制藥廠生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字Z2000137。

1.2 儀器 OLIMPAS萬(wàn)能生物顯微鏡(帶偏光系統(tǒng))。

1.3 方法 快速草酸鈣模型的制作：50只大鼠用乙二醇（按每公斤體重12 g）灌胃法代替口服法，1周成石。用動(dòng)物腎縱行軟組織剖面制成供偏光顯微鏡觀察的透明厚切片(＞60μ)。偏光顯微鏡代替普通光學(xué)顯微鏡觀察腎軟組織厚切片。單偏光相當(dāng)于生物鏡，正交偏光是觀察晶體（有光性）的形態(tài)、結(jié)構(gòu)。生物體軟組織不是晶體，無(wú)光性，視野黑暗。

1.4 臨床資料 30例患者均來(lái)源于遼寧省人民醫(yī)院泌尿外科，其中男性23例，女性7例。年齡23歲至54歲，平均36.8歲。病程3～54 d。所有患者均經(jīng)超聲波，腹部平片及偏光顯微鏡檢查確認(rèn)診斷。其中腎結(jié)石7例，輸尿管結(jié)石3例，腎內(nèi)微結(jié)石20例。

2 結(jié)果

2.1 動(dòng)物和尿石患者的尿沉渣紅細(xì)胞、管型和晶體（見(jiàn)圖1～圖7）

2.1.1 紅細(xì)胞 草酸鈣模型動(dòng)物和早期尿石病患者的尿沉渣中紅細(xì)胞形態(tài)大多數(shù)是缺蝕狀晶化球形、少量是生芽、中空穿刺、面包圈、影細(xì)胞等（見(jiàn)圖1，圖2）。

圖1 紅細(xì)胞（晶化紅紅細(xì)胞）

圖2 早期尿石者晶化球形RBC

2.1.2 管型 偏光顯微鏡下可以在尿沉渣中區(qū)分出晶體管型和非晶體管型（見(jiàn)圖3）。

圖3 早期尿石者尿沉渣中晶體管型

2.1.3 晶體 根據(jù)動(dòng)物模型在給乙二醇模型動(dòng)物尿中出現(xiàn)的晶體定為病理性晶體。經(jīng)與人類尿結(jié)石患者的尿沉渣晶體對(duì)照觀察，基本符合（一水草酸鈣的啞鈴晶、二水草酸鈣成團(tuán)的大小不等四方晶，尿酸晶等）。

動(dòng)物模型晶體特點(diǎn)：晶體可以有一水草酸鈣、大小不等聚合成團(tuán)的二水草酸鈣晶，十字型晶或無(wú)定型尿酸晶?？梢猿霈F(xiàn)2種以上的混合晶體尿（圖4～圖5）。

圖4 乙二醇草酸鈣腎內(nèi)微石模型

圖5 乙二醇草酸鈣腎內(nèi)微石模型

尿石患者尿沉渣中晶體特點(diǎn)：一般早期尿石患者血尿中很少同時(shí)有晶體出現(xiàn)。但復(fù)發(fā)尿結(jié)石患者血尿中同時(shí)有微晶或一水、二水草酸鈣晶體出現(xiàn)。一些尿石患者在血尿停止后，可排出晶體和晶體鑄型（圖6～圖7）。

圖6 尿石者血尿與晶體尿

圖7 尿石者尿沉渣中十字晶

2.2 證實(shí)偏光顯微鏡檢查晨尿沉渣作為診斷指標(biāo)的可行性 快速乙二醇動(dòng)物模型尿中出現(xiàn)的晶化紅細(xì)胞、晶體管鑄型和晶體與人類尿石病患者尿沉渣出現(xiàn)的紅細(xì)胞、晶體管鑄型、晶體非常類似。尿石影像學(xué)陰性的患者尿沉渣出現(xiàn)晶化紅細(xì)胞、管型（晶體管型）和特征型晶體，對(duì)30例懷疑尿石患者口服葉金膠囊，其中有8例排出小結(jié)石或鏡下結(jié)石，同時(shí)排出大量晶體尿。見(jiàn)圖8。

圖8 早期尿石者服排石方劑后，排出鏡下結(jié)石（＜0.2 cm）

3 討論

泌尿系結(jié)石是泌尿系統(tǒng)最常見(jiàn)疾病，近年一組報(bào)告統(tǒng)計(jì)年發(fā)病率為人口的0.1%～0.4%，10年內(nèi)尿石病復(fù)發(fā)率在50%～70%[1]。我國(guó)是尿石病高發(fā)地區(qū)之一[2-3]，個(gè)別地區(qū)出現(xiàn)一家三代同患尿石病，70%～80%的尿石病是含草酸鈣的上尿路結(jié)石，至今形成原因不清。確診尿石病的方法是用影像學(xué)。用影象學(xué)確診的尿石直徑大小均已超過(guò)0.4 cm。但尿石影像學(xué)陰性的早期尿石病和腎內(nèi)微石患者，由于沒(méi)有早期尿石病診斷方法，對(duì)這些患者的診斷，多徘徊在腎炎、泌尿系腫瘤、泌尿系感染或尿石病之間，不能確診。早期尿石病診斷是用偏光顯微鏡觀察快速草酸鈣模型動(dòng)物的尿沉渣和臨床尿石患者的尿沉渣中的晶化紅細(xì)胞、晶體管型和晶體作為診斷指標(biāo)而建立起來(lái)的[4]。偏光顯微鏡是觀察無(wú)機(jī)晶體礦物磨片的重要儀器，很少用于醫(yī)學(xué)界。草酸鈣模型動(dòng)物的腎內(nèi)，雖然包含有大量的晶體，由于腎臟是軟組織不能制成磨片，如果用偏光顯微鏡觀察普通組織H.E染色切片，不能觀察到晶體沉積在小管內(nèi)的情況。經(jīng)改進(jìn)后的快速草酸鈣動(dòng)物模型特點(diǎn)是成石期由1個(gè)月縮短為1周（早期腎內(nèi)微石）；同時(shí)還可以用偏光顯微鏡觀察到腎內(nèi)微石的分布、成石程度和模型動(dòng)物排出尿沉渣中的成分以及觀察到成石程度與尿沉渣中出現(xiàn)的成分之間的關(guān)系?？焖俨菟徕}動(dòng)物模型是早期尿石病的研究基礎(chǔ)，依快速動(dòng)物模型作為標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)合臨床患者尿沉渣的觀察建立起早期尿石病的診斷指標(biāo)。用這些診斷指標(biāo)診斷出的早期尿石病的患者，服用排石藥物，有部分患者排出小結(jié)石或鏡下結(jié)石，同時(shí)排出大量晶體尿。

早期尿石病診斷是目前國(guó)內(nèi)外研究中的一個(gè)空白，本研究對(duì)一部分懷疑尿石病的血尿患者確診，防止尿石增大和預(yù)防尿石病復(fù)發(fā)找到了一個(gè)簡(jiǎn)便、可靠的診斷方法。隨著生活水平的提高，尿石病越來(lái)越多的困擾著人們。食物與尿石形成的關(guān)系已經(jīng)得到科學(xué)的證實(shí)，如動(dòng)物蛋白、菠菜、可可等，多食會(huì)引起尿路結(jié)石。因此，早期發(fā)現(xiàn)尿結(jié)石（腎內(nèi)微石階段），早期治療，防止尿石繼續(xù)長(zhǎng)大，促使微小結(jié)石排出，是預(yù)防可見(jiàn)尿石的積極措施。

[1]Saita A,Bonaccorsi A,Motta M,et al.Stone composition:where do we stand[J].Urol Int,2007,79(Suppl 1):16-19.

[2]葉章群.應(yīng)重視尿石病的病因診斷和防治[J].中華泌尿外科雜志，2011，32（1）：6.

[3]江寧,章碌,王國(guó)增,等.上海市浦東新區(qū)腎結(jié)石流行病學(xué)調(diào)查報(bào)告[J].中華泌尿外科雜志,2008,29（10）：687-690.

[4]李永嵐.尿石病[M].北京:科學(xué)出版社,2011:95-136.

（收稿：2012-12-26 修回：2013-08-10）

（責(zé)任編輯 劉 任）

Diagnostic Method for Early Urolithiasis with Polarizing Microscopy

LI Yong-Lan，WANG Wei-Min，Wang You et al.Department of Clinical Lab,People's Hospital of Liaoning Province,Shenyang(110016),China.

Objective It is difficult to diagnose the early stage of urolithiasis.The aim of this study is to search the diagnostic method of intrarenal microstones for patients with clinical manifestations but negative imag?ing.MethodsThe calcium oxalate rat model is made by glycol,Urine sediments such as red blood cell,uri?nary cylinder,crystal type were observed by polarizing microscopy between rat model and 30 patients diagnosed with urinary stone.Same components were used for diagnostic index,the patients are treated by yejing capsule.ResultsUrine sediments in rat model and patients both have crystallization of red blood cells mostly,crystal type and urinary cylinder in small numbers accompanied lots of crystals.The rat model have calcium oxalate monohydrate and crystal calcium oxalate crystal,cross crystal or the amorphous uric acid crystals.the character of crystal in patient is both have microcrystal crystal mold,8 cases in 30 are discharge small stone or the microscop?ic calculi.ConclusionIt is easy and feasible to use polarizing microscopy to diagnose early urolithiasis.

Urolithiasis;microtechnique;calcium oxalate rat model

R692.4

A

1007-6948(2013)06-0643-03

10.3969/j.issn.1007-6948.2013.06.010

1.遼寧省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科（沈陽(yáng) 110016）

2.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院廣安門(mén)醫(yī)院泌尿外科（北京 100053）

張亞強(qiáng)，E-mail：yaqiang712@sina.com