毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定武打?qū)④娋浦斜『赡X的含量

陳錫琨

廣西壯族自治區(qū)南寧市食品藥品檢驗(yàn)所，廣西 南寧 530001

毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定武打?qū)④娋浦斜『赡X的含量

陳錫琨

廣西壯族自治區(qū)南寧市食品藥品檢驗(yàn)所，廣西 南寧 530001

目的：建立武打?qū)④娋浦斜『赡X含量測(cè)定方法。方法：采用毛細(xì)管氣相色譜法，色譜柱為stabiwax－DA石英毛細(xì)管柱（30m×0.53 mm×0.25μm），載氣為氮?dú)?，水楊酸甲酯為?nèi)標(biāo)物，F(xiàn)ID檢測(cè)器，檢測(cè)器溫度為250℃，進(jìn)樣口的溫度為250℃，柱溫160℃，分流進(jìn)樣，分流比（10∶1）。結(jié)果：薄荷腦和水楊酸甲酯能達(dá)到良好分離；薄荷腦的線性范圍0.20～1.20mg·ml－1（r＝0.9996）；薄荷腦的回收率98.28%。結(jié)論：方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于武打?qū)④娋频馁|(zhì)量控制。

武打?qū)④娋疲槐『赡X；氣相色譜法

武打?qū)④娋茷槊褡逅帲撍帪榛⒄?、芒硝、龍血竭、莪術(shù)、徐長(zhǎng)卿、川芎、骨碎補(bǔ)、蓽茇、乳香、三七、飛龍掌血、豆豉姜、薄荷腦等中藥加工而成的純中藥復(fù)方制劑，具有活血祛瘀、舒筋活絡(luò)、消腫止痛等功效。用于跌打損傷，筋骨扭傷，風(fēng)濕骨痛，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)痛，骨質(zhì)增生性刺痛，神經(jīng)痹痛，肌肉疼痛，牙痛，凍瘡等癥狀。方中的薄荷腦具有清熱疏風(fēng)，消腫止痛。其能選擇性地刺激皮膚或黏膜的冷覺感受器，引起皮膚黏膜血管收縮從而產(chǎn)生消炎、止痛、止癢等作用。薄荷腦為揮發(fā)類物質(zhì)，沸點(diǎn)較低，對(duì)其含量測(cè)定方法多采用氣相色譜法測(cè)定［1～3］。按目前標(biāo)準(zhǔn)［4］只對(duì)薄荷腦進(jìn)行薄層鑒別，未對(duì)其含量進(jìn)行控制。為了更好地控制該制劑質(zhì)量，本文采用毛細(xì)管氣相色譜法對(duì)武打?qū)④娋浦斜『赡X的含量測(cè)定。方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于標(biāo)準(zhǔn)中薄荷腦的質(zhì)量控制。

1 儀器和試藥

2010氣相色譜儀（日本島津）；BP211D電子天平（瑞士梅特勒公司）。

薄荷腦對(duì)照品 （中國(guó)藥品生物制品檢驗(yàn)所，批號(hào)：110728－201008含量測(cè)定用）；水楊酸甲酯、無水乙醇均為分析純；武打?qū)④娋疲ㄅ?hào)：20120306 20120408 20120525 20121023 20121103）及陰性樣品（缺薄荷腦）均由廣西壯族自治區(qū)壯醫(yī)醫(yī)院制劑室提供。

2 實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果

2.1 內(nèi)標(biāo)溶液的制備 取水楊酸甲酯適量，精密稱定，加無水乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為內(nèi)標(biāo)溶液。

2.2 對(duì)照品溶液的制備

2.2.1 取薄荷腦對(duì)照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對(duì)照品儲(chǔ)備溶液。

2.2.2 精密量取內(nèi)標(biāo)溶液、對(duì)照品儲(chǔ)備溶液各2m l，置同一10ml量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備 取本品3瓶，混勻，精密量取1ml，置10m l量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液2ml，加無水乙醇至刻度，搖勻，即得。

2.4 陰性樣品溶液制備 按處方比例制成不含薄荷腦的陰性樣品溶液。精密量取陰性樣品溶液1ml，置10m l量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液2ml，加無水乙醇至刻度，搖勻，即得。2.5 色譜條件 采用2010GC氣相色譜儀，色譜柱為stabiwax－DA石英毛細(xì)管柱（30 m×0.53 mm×0.25μm）；載氣為氮?dú)?；水楊酸甲酯為?nèi)標(biāo)物；FID檢測(cè)器；檢測(cè)器和進(jìn)樣口的溫度均為250℃；柱溫160℃；分流進(jìn)樣，分流比（10∶1）。N2流速3ml·min－1；H2流速30ml·min－1；空氣流速400ml·min－1；尾吹氣N2流速30m l·min－1；進(jìn)樣量為1μL，結(jié)果見圖1。

2.6 工作曲線的繪制 分別精密吸取對(duì)照品溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0ml置10mL量瓶中，分別加入內(nèi)標(biāo)溶液2.0ml，加無水乙醇稀釋并至刻度，搖勻。依次進(jìn)樣1μl，測(cè)定峰面積，以對(duì)照品與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比作為縱坐標(biāo)，對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程：Y＝0.0443X＋0.0198，r：0.9996。

2.7 精密度試驗(yàn) 取同一對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，按“2.5”項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)行測(cè)定，求出薄荷腦的峰面積和

內(nèi)標(biāo)物的峰面積的比值，結(jié)果RSD為0.56%。實(shí)驗(yàn)表明其精密度良好。

2.8 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批號(hào)供試品，按“2.3”項(xiàng)下的方法分別配制9份，按 “2.5“項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)行測(cè)定，求出薄荷腦的含量，結(jié)果RSD為0.41%。實(shí)驗(yàn)表明其重復(fù)性良好。

2.9 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一批號(hào)的供試品溶液，在室溫下放置，分別在0、2、6、8、12、18、24小時(shí)按“2.5“項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果薄荷腦含量的RSD為0.78%。表明供試品溶液在24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

2.10 加樣回收試驗(yàn) 在已知含量的供試品溶液中加入一定量的對(duì)照品溶液和內(nèi)標(biāo)物溶液，按 “2.5”項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果回收率為98.28%，見表1。

表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果（n＝9）

2.11 供試品中薄荷腦的含量測(cè)定 按“2.5”項(xiàng)下的方法，分別對(duì)5個(gè)批號(hào)的武打?qū)④姙⒅斜『赡X含量分別進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見表2。

表2 樣品測(cè)定結(jié)果（n＝5）

3 討論

本方法曾參照文獻(xiàn)［5～7］方法制備樣品溶液試驗(yàn)，結(jié)果采用直接取樣定溶測(cè)出的含量和回收率均較為理想。故此，采用直按取樣法，方法快速、簡(jiǎn)單。

本方法在實(shí)驗(yàn)過程中，曾選用萘、水楊酸甲酯和環(huán)已酮作內(nèi)標(biāo)物試驗(yàn)，均能獲得較好的實(shí)驗(yàn)效果。通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果相比較，選用水楊酸甲酯作為內(nèi)標(biāo)物效果更為理想。

本實(shí)驗(yàn)曾考察了3根不同商品規(guī)格的色譜柱（stabiwax－DA石英毛細(xì)管柱，phenomenex ZB－Wax石英毛細(xì)管柱及Agilent DB－17石英毛細(xì)管柱）并探索不同的進(jìn)樣口溫度和不同檢測(cè)器的溫度；色譜柱溫為程序升溫和色譜柱為恒溫等條件作實(shí)驗(yàn)比較。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明3根不同商品規(guī)格的色譜柱均能達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康模鴖tabiwax－DA石英毛細(xì)管柱在檢測(cè)器溫度為250℃；進(jìn)樣口的溫度為250℃；柱溫160℃；分流進(jìn)樣，分流比（10∶1）的條件下能使實(shí)驗(yàn)中的薄荷腦和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)水楊酸甲酯在短時(shí)間（10min）內(nèi)完全分離（峰分離度均大于1.5）；理論塔板數(shù)不低于10000；色譜基線平穩(wěn)，符合 《中國(guó)藥典》要求，故選用之。

樣品中薄荷腦的含量在3.6023mg·m l－1～3.9831 mg· ml－1之間；但處方中薄荷腦是揮發(fā)性物質(zhì)，在生產(chǎn)、包裝、儲(chǔ)存過程中，如果操作方法不當(dāng)或高溫存放，很容易造成薄荷腦含量偏低，從而影響藥品的處方比例組成，進(jìn)而影響藥品的療效。因此，筆者認(rèn)為，制定武打?qū)④娋茰y(cè)定薄荷腦含量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，產(chǎn)品在有效期內(nèi)薄荷腦含量應(yīng)得不少于3.60 mg·ml－1，這樣才能保證藥品的療效。

［1］李彥超，李宜鮮，宋漢敏等.GC法同時(shí)測(cè)定安陽精制膏中薄荷腦、冰片和水楊酯甲酯的含量［J］.中醫(yī)研究，2011，24（2）：25～26.

［2］蔡冰，李堅(jiān).氣相色譜法對(duì)正骨水中樟腦、薄荷腦的含量測(cè)定 ［J］.河北醫(yī)藥，2008，30（6）：879.

［3］張曉霞，陳安家，張一鳴，等.毛細(xì)管氣相色譜測(cè)定消腫止痛酊中樟腦與薄荷腦的含量［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2009，20（7）：1645～1646.

［4］廣西壯族自治區(qū)壯醫(yī)醫(yī)院標(biāo)準(zhǔn)［S］.2002：29.

［5］楊宗輝，惠濤.GC法測(cè)定川貝枇杷露中薄荷腦的含量 ［J］.西北藥學(xué)雜志，2008，23（5）：262～263.

［6］鄧祖磊，張青云.氣相色譜測(cè)定復(fù)方桑菊感冒沖劑中薄荷腦的含量［J］.海峽藥學(xué)，2010，22（10）：46～47.

［7］中國(guó)藥典［S］.2010年版.一部.528.

Capillary gas chromatography determination of menthol in Wudajianjun liquor

Chen Xi kun
Nanning Institute for Food and Drug Control，Nanning，guangxi530001，China

Objective：To establish a method for the determination of menthol in Wudajianjun lquor.Methods：Using capillary gas chromatography，column was stabiwax－DA fused silica capillary column（30 m×0.53 mm×0.25μm），contained gas was nitrogen，methyl salicylate as an internal standard and FID detector，the detector temperature 250℃，inlet temperature of250℃，column temperature 160°C，split injection，split ratio（10：1）.Results：Menthol and methyl salicylate can achieve good separation；the menthol linear range 0.20～1.20mg.ml－1（r＝0.9996）；menthol recovery was98.28%.Conclusion：The method is simple，accurate，reproducible and can be used for Wudajianjun liquor quality control.

capillary gas chromatography；Wudajianjun liquor；menthol

R284

A

1007－8517（2013）09－0020－02

2013.03.07）