六堡茶毒性研究

覃 良 黃宇聲 劉冠萍

廣西壯族自治區(qū)中醫(yī)藥研究院，廣西 南寧 530022

六堡茶毒性研究

覃 良 黃宇聲 劉冠萍

廣西壯族自治區(qū)中醫(yī)藥研究院，廣西 南寧 530022

目的：觀察六堡茶一日灌胃后產(chǎn)生的急性毒性反應(yīng)和死亡情況，以及長(zhǎng)期重復(fù)給藥對(duì)大鼠可能產(chǎn)生的蓄積性毒性和延遲性毒性反應(yīng)。方法：急性毒性試驗(yàn)一天內(nèi)給小鼠灌胃給藥2次，每次0.4ml/10g，給藥后觀察兩周內(nèi)動(dòng)物的一般活動(dòng)情況及存活情況。長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)設(shè)六堡茶提取物高劑量（49.6g藥材/kg），中劑量（24.8g藥材/kg）和低劑量（12.4g藥材/kg），給大鼠連續(xù)灌胃給藥3個(gè)月，觀察對(duì)大鼠可能產(chǎn)生的蓄積性毒性和延遲性毒性反應(yīng)。結(jié)果：急性毒性試驗(yàn)最大給藥量為99.2g/Kg，相當(dāng)于成人日用量的661倍，未見毒性反應(yīng)發(fā)生及死亡。長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)三個(gè)劑量組動(dòng)物的體重增長(zhǎng)、攝食情況正常，對(duì)大鼠血液學(xué)指標(biāo)、血液生化指標(biāo)和主要臟器指數(shù)無(wú)明顯影響，主要器官病理組織學(xué)檢查均未見異常。結(jié)論：六堡茶提取物對(duì)小鼠最大耐受量為99.2g/Kg，對(duì)大鼠無(wú)明顯蓄積性毒性和延遲性毒性反應(yīng)。

六堡茶提取物；最大給藥量；血液學(xué)指標(biāo)；血液生化指標(biāo)；臟器系數(shù)

廣西梧州制藥（集團(tuán)）股份有限公司生產(chǎn)的六堡茶，用法用量為開水沖服，一次3g，一日3次。因其口感好，深受消費(fèi)者喜歡。本文報(bào)導(dǎo)其對(duì)小鼠急性毒性及大鼠長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)研究結(jié)果。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 受試物 六堡茶提取物，批號(hào)20100408，性狀為棕褐色浸膏（每毫升相當(dāng)于藥材1.87g）。用蒸餾水配成1.24g/m l供試驗(yàn)用。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：KM小鼠，體重19～22g，雌雄各半；清潔級(jí)Wistar大鼠80只，190～220g，雌雄各半。由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，生產(chǎn)許可證SCXK2009－0003，動(dòng)物質(zhì)量合格證0009963。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果［1］

2.1 急性毒性試驗(yàn)

預(yù)試結(jié)果0.4m l/10g動(dòng)物全部存活，測(cè)不到LD50，故進(jìn)行最大給藥量試驗(yàn)。取小鼠40只，給藥組及對(duì)照組各20只，雌雄各半。給藥組一天內(nèi)灌胃給藥3次，每次0.4m l/10g，間隔4h，對(duì)照組同法給蒸餾水，給藥后觀察兩周內(nèi)動(dòng)物的一般活動(dòng)情況及存活情況。結(jié)果給藥組小鼠給藥后無(wú)興奮、不安、竄動(dòng)、跳躍、豎毛、流淚、流涎、凸眼、扭體反應(yīng)現(xiàn)象。觀察14天，全部動(dòng)物存活。

2.2 長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)

2.2.1 一般情況與體重 實(shí)驗(yàn)用Wistar大鼠80只，隨機(jī)分為4組，每組20只，雌雄各半。室溫（27±2）℃，濕度50－70%。雌雄分開群養(yǎng)，每籠10只大鼠。灌胃給藥（20m l/kg），每天1次，連續(xù)90天（3個(gè)月），停藥觀察2周。給藥及停藥期間，六堡茶提取物高、中、低劑量組和空白對(duì)照組動(dòng)物活動(dòng)、攝食量及排泄等均未見異常，毛色光澤，動(dòng)物生長(zhǎng)良好，體重普遍增加。與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2.2 血液常規(guī) 給藥3個(gè)月，對(duì)照組和六堡茶提取物組各取12只動(dòng)物，停藥2周各組取8只，雌雄各半，腹主動(dòng)脈取血，進(jìn)行血液學(xué)指標(biāo)測(cè)定［2］。六堡茶提取物組大鼠各指標(biāo)與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異，見表1。表明六堡茶提取物對(duì)大鼠血液學(xué)指標(biāo)無(wú)影響。

表1 六堡茶提取物對(duì)大鼠血液學(xué)指標(biāo)的影響（給藥3個(gè)月）

2.2.3 血液生化 六堡茶提取物給藥3個(gè)月及停藥14天后各劑量組大鼠各指標(biāo)，與對(duì)照組比較均無(wú)顯著性差異，見表2、表3。表明六堡茶提取物對(duì)大鼠血液生化學(xué)指標(biāo)無(wú)影響。

2.2.4 臟器指數(shù) 給藥3個(gè)月，對(duì)照組和六堡茶提取物組處死12只動(dòng)物，停藥2周各組處死8只，雌雄各半，取心、肝、脾、肺、腎、腦、腎上腺、睪丸、子宮、卵巢進(jìn)行稱量，計(jì)算臟器指數(shù)（器官重量×100/體重），結(jié)果各劑

量組大鼠的臟器指數(shù)與對(duì)照組比較無(wú)顯著差異見表4。表明 六堡茶提取物對(duì)大鼠主要臟器指數(shù)無(wú)影響。

表2 六堡茶提取物對(duì)大鼠血液生化的影響（給藥3個(gè)月）

表3 六堡茶提取物對(duì)大鼠血液生化的影響（給藥3個(gè)月）

表4 六堡茶提取物對(duì)大鼠臟器指數(shù)的影響（給藥3個(gè)月）

2.2.5 病理學(xué)檢查 給藥3個(gè)月，對(duì)照組和六堡茶提取物組處死12只動(dòng)物，停藥2周各組處死8只，雌雄各半，取心、肝、脾、肺、腎、腦（大腦、小腦、腦干）、脊髓（頸、胸、腰段）、垂體、胸腺、食管、胃、小腸、大腸、腎上腺、附睪、睪丸、卵巢、子宮、膀胱、骨髓、腸系膜淋巴結(jié)等組織，先肉眼觀察各臟器外觀有無(wú)異常，再以10%的福爾馬林將全部器官組織固定，進(jìn)行病理組織學(xué)檢查，檢查結(jié)果未見異常改變。

3 討論

急性毒性試驗(yàn)灌胃給藥測(cè)不到LD50，最大給藥量為99.2g/Kg，相當(dāng)于成人日用劑量的661倍，未見毒性反應(yīng)發(fā)生及死亡。長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)大鼠高劑量（49.6 g藥材/kg/d，相當(dāng)人用量0.15g藥材/kg/d的330倍），中劑量（24.8g藥材/kg/d，相當(dāng)人用量的165倍）和低劑量（12.4g藥材/kg/d，相當(dāng)人用量的83倍）每天灌胃給藥六堡茶提取物一次，連續(xù)給藥3個(gè)月。結(jié)果各組動(dòng)物活動(dòng)、攝食量及排泄等均未見異常，毛色光澤，動(dòng)物生長(zhǎng)良好，體重普遍增加；血液常規(guī)檢查、血液生化指標(biāo)、主要臟器指數(shù)無(wú)顯著改變；病理組織學(xué)檢查未見異常。提示六堡茶灌胃給藥對(duì)大鼠無(wú)明顯蓄積性毒性和延遲性毒性作用。

［1］國(guó)家藥品監(jiān)督管理局.中藥、天然藥物長(zhǎng)期毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則，指導(dǎo)原則編號(hào)：【Z】GPT3－1，2005.3.

［2］U.S.Department of Health and Human Services，F(xiàn)ood and Drug Administration，Center for Drug Evaluation and Research（CDER），Center for Biologics Evaluation and Research（CBER）.Guidance for Industry and Reviewers：Estimating the Safe Starting Dose in Clinical Trials for Therapeutics in Adult Healthy Volunteers，December 2002，pp 7.

R965.3

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1007－8517（2013）03－0039－02

2013.01.03）