畜禽免疫抗體監(jiān)測(cè)采血技術(shù)及注意事項(xiàng)

羅士仙,康修田,梁盛,饒鳴鵬,曾梅群,張有美

（1.泰和縣畜牧獸醫(yī)局，江西 吉安 343700；2 馬市畜牧獸醫(yī)站；3 沙村畜牧獸醫(yī)站；4 澄江畜牧獸醫(yī)站）

畜禽采血是疫病監(jiān)測(cè)、檢測(cè)、診斷和評(píng)估免疫效果的一項(xiàng)前提性工作，采血質(zhì)量的好壞，直接影響到監(jiān)測(cè)結(jié)果，所以作為基層獸醫(yī)人員，畜禽的采血技術(shù)是必須掌握的常規(guī)技術(shù)之一。現(xiàn)介紹幾種常用的采血方法及注意事項(xiàng)供同行參考。

1 采血樣前器具的準(zhǔn)備

根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目準(zhǔn)備一次性手套、真空采血管、防護(hù)服、口罩、防護(hù)帽、采血針、離心管、套豬器、鐵鏈條、一次性注射器、75%酒精棉球、橡皮筋、剪毛剪、滅菌脫脂棉球、采樣單、油性記號(hào)筆、冷藏包、采樣登記表等采樣工具。檢查真空采血管管蓋是否松動(dòng)，一次性注射器安裝是否密封等。

2 畜禽血樣采集的常用方法

2.1 牛血樣的采集

一般多采用頸靜脈采血方法或耳靜脈采血方法采集血樣。

2.1.1 牛頸靜脈采血。牛頸靜脈分為頸內(nèi)靜脈和頸外靜脈，頸內(nèi)靜脈較小，頸外靜脈較粗，位于頸部肩骨乳突肌與胸頭肌間的凹窩內(nèi)。采血前助手要用鐵鏈栓樹樁或電線桿保定好牛頸部，使其頭向一側(cè)上仰，讓牛側(cè)頸靜脈充分暴露出來(lái)，采血者站立于牛頸部頸靜脈暴露一側(cè)，取真空采血針頭，以拇指、食指和中指夾住，依靠腕力陰勁，沿頸靜脈線走向垂直扎進(jìn)頸靜脈上的皮膚，然后調(diào)整位置，針頭一旦進(jìn)入血管，血液馬上會(huì)噴射而出。待血量達(dá)到要求后，拔出針頭，用消毒過(guò)的干棉球按壓針眼，輕壓止血。采血完畢后，及時(shí)做好血樣的編號(hào)和采樣表的填寫工作。

2.1.2 牛耳靜脈采血。①真空采血管牛耳靜脈采血。采血地點(diǎn)選擇要平整、松軟、干燥、有栓樁的場(chǎng)地，防止牛掙扎導(dǎo)致懸掛被勒死而出意外。采血前助手用繩子把牛鼻栓兩側(cè)同時(shí)綁牢，先用鐵鏈條栓樹樁或電線桿保定好牛頸部，鐵鏈條要調(diào)緊點(diǎn)，固定時(shí)先松后緊，避免采血時(shí)牛掙扎，同時(shí)用繩子把牛的雙角固定在樹樁或電線桿上，接著用一手壓迫耳靜脈近心端，或用皮筋綁緊耳根，另一手用75%酒精棉球涂擦牛耳靜脈，使其耳靜脈充盈。采血者用75%酒精棉球消毒采血部位,接著用干棉球擦干采血部位，之后一手固定耳部皮膚，防止靜脈滑動(dòng)，另一手持采血針成15°角刺入，有破空的感覺(jué)、見(jiàn)采血針回血后繼續(xù)推進(jìn)針頭少許，防止針頭滑出，緊接著把采血針另一針頭插入真空采血管內(nèi)，此時(shí)真空采血管應(yīng)該傾斜讓血液沿管壁流入管內(nèi)，待血量達(dá)到要求后，拔出針頭，用消毒過(guò)的棉球按壓針眼，輕壓止血。采血完畢后，及時(shí)做好血樣的編號(hào)和采樣表的填寫工作。若血流速度較慢，可稍調(diào)整針頭位置或往前推進(jìn)針頭即可；若采血針血管端針頭未見(jiàn)回血，一般是針頭沒(méi)插入血管內(nèi)，應(yīng)該重插；若采血針血管端針頭見(jiàn)回血，另一端針頭插入真空采血管內(nèi)不見(jiàn)血液流入管內(nèi)，一般是提示采血管失去真空，此時(shí)應(yīng)該換另一根真空采血管。注意拔針頭時(shí)應(yīng)該先拔插入真空管端的針頭，可避免因操作失誤時(shí)真空采血管失去真空而浪費(fèi)。②一次性注射器、靜脈輸液針牛耳靜脈采血。保定方法和助手操作同真空采血管采血方法。采血者用75%酒精棉球消毒采血部位,接著用干棉球擦干采血部位，之后一手固定耳部皮膚，防止靜脈滑動(dòng)，另一手持一次性輸液針成15°角刺入，有破空的感覺(jué)、見(jiàn)針頭回血后繼續(xù)推進(jìn)針頭少許，此時(shí)血液一直順著輸液管直流，待血液流至輸液針連接處時(shí)馬上用一次性注射器連接，連接處注意盡量不留空氣柱，形成真空，慢慢抽動(dòng)注射器活塞柄，讓血液沿管壁流入注射器內(nèi)，待采集到適量血液后，一手拔出輸液針頭，另一手用消毒過(guò)的棉球按壓針眼，輕壓止血，不出血后即可松手。采血完畢后，及時(shí)做好血樣的編號(hào)和采樣表的填寫工作。

2.2 豬血樣的采集

一般多采用前腔靜脈采血法或耳靜脈采血法采集血樣。

2.2.1 豬耳靜脈采血。本方法適用于母豬和大豬。繩套（或套豬器）保定，在繩一端做一個(gè)活套，在豬張口時(shí)，用繩活套（或套豬器）套住豬上頜，勒緊，由一人拉緊，或?qū)⒗K（或套豬器）的一端栓在欄桿或木樁上，這時(shí)，豬呈現(xiàn)用力后退姿勢(shì)，可保持安全站立姿勢(shì)。豬站立保定后，耳靜脈局部消毒，助手用力在耳根捏壓靜脈近心端或用膠帶在耳根部結(jié)扎，亦或用酒精反復(fù)涂擦耳靜脈，使血管怒張。采血者先用75%酒精棉球消毒采血部位,接著用干棉球擦干采血部位，然后用左手平拉豬耳并使部位稍高，右手持注射器或真空采血針，針頭斜面朝上，以30°～45°角沿血管刺入，隨即輕抽注射活塞柄，如見(jiàn)回血即為已刺入血管，再順血管向內(nèi)插入1cm 或把采血針頭另一端針頭插入真空采血管內(nèi)，然后去除捏壓血管的手指或膠帶，左手將注射器與耳一起固定，右手緩緩地將血液抽出或傾斜真空采血管讓血液沿管壁流入管內(nèi)。待血量達(dá)到要求后，拔出針頭，用消毒過(guò)的棉球按壓針眼，輕壓止血。采血完畢后，及時(shí)做好血樣的編號(hào)和采樣表的填寫工作。

2.2.2 豬前腔靜脈采血。豬前腔靜脈采血的穿刺位置—前腔窩。采血者蹲于豬的右前側(cè)，首先觸摸豬的前胸骨，通過(guò)前胸骨柄和肩部平行于地面劃1 條想象中的橫線，然后再找到右側(cè)第一肋骨，由胸骨、右側(cè)第一肋骨、氣管三者圍成的一個(gè)三角區(qū)域俗稱前腔窩。根據(jù)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，一般30kg 以下的小豬進(jìn)針部位應(yīng)在兩前肢與氣管交匯處，30kg 以上的中大豬進(jìn)針部位可選在氣管兩側(cè)的低凹處。小豬采用仰臥保定，助手一手抓住兩后肢，一手抓住一前肢，另一助手一手按住小豬下頜，一手抓住另一前肢，使頭、胸、后肢在一直線上，并充分暴露兩側(cè)胸前窩，靜脈充脹。大豬和母豬采用保定繩（或套豬器）站立保定，助手用保定繩套住豬上頜，向前向上拉，使豬前腔靜脈充脹，頭部和軀干成30°角，充分暴露兩側(cè)胸前窩。采血者用75%酒精棉球消毒采血部位，接著用消毒過(guò)的干棉球擦干采血部位后，持一次性注射器或采血管針 (小豬7號(hào)或9號(hào)針頭，大豬和母豬12號(hào)針頭)成45°角插入，邊插邊抽動(dòng)活塞柄，見(jiàn)針管內(nèi)有血液涌入，持續(xù)抽血至需要血量，即可拔出針頭，用消毒過(guò)的棉球按壓針眼，輕壓止血。采血完畢后，及時(shí)做好血樣的編號(hào)和采樣表的填寫工作。若進(jìn)針后當(dāng)針管內(nèi)未溢入血液時(shí)，可向前后左右來(lái)回調(diào)整方向及進(jìn)針深度，一旦有血液溢入，此時(shí)一定要固定好采血針管，轉(zhuǎn)動(dòng)旋桿柄收集血液，直到取足血液后小心拔出針頭。豬站立保定前腔靜脈采血方便實(shí)用，且采血量大，對(duì)豬只的刺激較小。

2.3 家禽血樣的采集

一般多采用翅靜脈采血法采集血樣。助手用左手抓住禽的兩只腳，右手將兩翅重疊后捏緊掌骨，使禽背部貼住助手上腹部，助手右手稍高于左手，兩手輕輕用力，使禽體伸展，暴露出翅內(nèi)側(cè)。采血者左手撥開(kāi)左側(cè)翅內(nèi)側(cè)靜脈上的羽毛使靜脈暴露，消毒擦干后右手持真空采血管采血針或一次性注射器針頭6號(hào)(7號(hào))與皮膚呈45°角方向進(jìn)針，持針時(shí)手要穩(wěn)，進(jìn)針不宜過(guò)深，如刺穿血管，則很快引起皮下血腫，導(dǎo)致采血失敗。一旦刺入皮膚進(jìn)入血管，即可回抽一次性注射器抽動(dòng)活塞柄，使管內(nèi)形成負(fù)壓，血液會(huì)自然流進(jìn)注射器管內(nèi)；或見(jiàn)采血針針頭血管端回血，即把采血針另一端針頭插入真空管內(nèi)，這樣能夠準(zhǔn)確判定血液是否進(jìn)入血管。抽血時(shí)，一定要緩慢、輕柔，否則會(huì)使靜脈癟陷而采不出血。采血完畢，拔出采血針，采血部位用消毒過(guò)的棉球按壓針眼，輕壓止血。采血完畢后，及時(shí)做好血樣的編號(hào)和采樣表填寫工作。

3 采血、分離血清的注意事項(xiàng)

3.1 選擇合適的保定方法

應(yīng)根據(jù)不同品種、大小、選擇不同的保定方法。牛一般采用鐵鏈條鏈頸部挽角栓柱保定。豬前腔靜脈采血時(shí)大豬保定繩或套豬器套住上頜向前上拉，頭與軀干成30°角，小豬應(yīng)使頭、軀干、后肢成一條直線，充分暴露靜脈窩，使前腔靜脈充盈。雞保定應(yīng)先抓住雙腳，再小心合攏雙腳保定雙翅，抓單翅應(yīng)防止拍翅而折斷翅膀。

3.2 選擇合適的采樣用具

豬、牛采用一次性注射器或真空采血管，雞鴨采用5mL 一次性注射器或真空采血管，每采完一畜一禽后更換注射器和針頭。大豬前腔靜脈采血時(shí)可選用12號(hào)針頭，小豬選用7 或9號(hào)針頭。選用真空采血管采血時(shí)，采血針針頭一端先刺入血管，待見(jiàn)回血后，另一端針頭再插入真空采血管內(nèi)。

3.3 采樣部位選擇

根據(jù)畜禽的品種、年齡、大小選擇采樣部位。耳靜脈采血時(shí)，選擇較直較粗的血管，先從耳根部采血，如遇針頭被甩出或血管被刺穿，靜脈堵塞時(shí)，針頭向耳尖移動(dòng)2～5cm 刺入靜脈采血。前腔靜脈靠近心端粗且深，靠近頭部淺且細(xì)。仔豬選擇靜脈窩心處垂直刺入，中豬適當(dāng)靠前，母豬可在靜脈窩2cm處刺入，如未見(jiàn)回血，擺動(dòng)針頭，直至有血液涌入針筒，抽足血液拔出注射器即可。

3.4 采血前的準(zhǔn)備

采血場(chǎng)所要有充足的光線，地勢(shì)要平坦、干燥。夏季采血應(yīng)攜帶有冰塊的冷藏包，及時(shí)將采集的血樣保存在冷藏包內(nèi)。采血人員應(yīng)認(rèn)真做好自身安全防護(hù)工作。采血用具、采血部位要進(jìn)行消毒，并用滅菌干棉球擦干，已用過(guò)的采血器具要帶回深埋，不得隨便亂丟。采血用的采血器和注射器必須保持清潔干燥。采血前，應(yīng)事先通知被采血養(yǎng)殖場(chǎng)或農(nóng)戶，在采血當(dāng)天采血前不要飼喂畜禽。

3.5 血樣的采集和處理

采血過(guò)程中禁止洗手，否則會(huì)出現(xiàn)溶血，影響檢查的準(zhǔn)確性。靜脈采血對(duì)畜禽的影響不大。動(dòng)物機(jī)體有儲(chǔ)備血量，采少量的血液對(duì)機(jī)體影響很小。所采血樣必須沿著試管壁或瓶子壁流入試管或瓶子中。每頭(羽)動(dòng)物采血量必須在2mL 以上。采血器或注射器采集血液后應(yīng)留足空間，呈45°角傾斜靜置，有利于血清析出，同時(shí)按規(guī)定編號(hào)并詳細(xì)填寫采樣表。在血樣還沒(méi)離心前，不宜把所采血樣放入冰箱，以免血球破裂發(fā)生溶血現(xiàn)象。待血清析出后，要盡快(1d內(nèi))把血清倒入離心管內(nèi)，并按原編號(hào)編好后把分離好的血清放入冷冰箱內(nèi)保存。短時(shí)間保存宜放入冷藏層，長(zhǎng)時(shí)間保存宜放入冷凍層。分離的血清，一般不加防腐劑。血清應(yīng)放在冰箱內(nèi)冷凍保存。運(yùn)送血清時(shí)可將血清放在盛有冰塊的冷藏包中運(yùn)送。