?；撬釋Υ笫箬F利用和抗氧化能力的影響

王芙蓉， 謝中國， 葉興乾， 鄧尚貴， 陳士國*， 胡亞芹， 肖定福

（1.舟山普陀海洋高科技園區(qū)，浙江 舟山316100；2.浙江大學 生物工程與食品學院，浙江 杭州 310029；3.浙江海洋學院食品與藥學學院、醫(yī)學院，浙江舟山316000；4.湖南農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院，湖南長沙410128）

鐵是人和動物必需的一種微量元素，在體內(nèi)參與血紅蛋白、肌紅蛋白、細胞色素及某些酶的合成，在機體代謝過程中起著極其重要的作用，缺鐵嚴重時會導致缺鐵性貧血（IDA）。IDA是常見的一種營養(yǎng)性貧血，其發(fā)病遍及世界各地。世界衛(wèi)生組織調(diào)查報告顯示，IDA患者占世界總?cè)丝?0%～30%左右[1]。研究發(fā)現(xiàn)IDA可引起機體的脂質(zhì)過氧化，導致機體抗氧化能力的下降[2]。

牛磺酸是一種條件性必需氨基酸，具有抗氧化、提高免疫力等[3-4]多種功能。文獻報道，?；撬釋Ω纳曝氀幸欢ǖ男Ч鸞5]，對鐵過載小鼠引起的心臟損傷有保護作用[6-7]，牛磺酸對正常大鼠和缺鐵性貧血大鼠的抗氧化作用鮮有報道，本文主要探討?；撬釋Υ笫箬F利用及抗氧化作用的影響。

1 材料與方法

1.1 實驗材料與設(shè)備

?；撬幔徲跐摻腊菜帢I(yè)股份有限公司，質(zhì)量分數(shù)99%；FeSO4.7H2O，分析純，國藥集團產(chǎn)品；SD大鼠，購于上海斯萊克生物有限公司；UV-2550型分光光度計，日本Shimadzu公司產(chǎn)品；AA700型原子吸收分光光度計，美國Perkin Elmer公司產(chǎn)品。

1.2 動物分組和喂養(yǎng)

健康雄性 SD 大鼠 40只，體質(zhì)量（80±5）g，以基礎(chǔ)飼料適應(yīng)喂養(yǎng)3 d。隨即分為4組，其中16只整個實驗過程都飼喂正常飼料，另外24只喂缺鐵飼料，耗空28 d建造缺鐵性貧血模型。缺鐵飼料參照AIN-76飼料配方[8]，其中的礦物元素添加劑不添加鐵劑。缺鐵大鼠根據(jù)Hb含量隨機分為3組:缺鐵組、缺鐵加?；撬峤M和補鐵加?；撬峤M。缺鐵組和缺鐵加牛磺酸組繼續(xù)飼喂缺鐵飼料，補鐵加?；撬峤M改喂正常飼料。整個實驗飼喂正常飼料的16只大鼠根據(jù)體質(zhì)量分為正常對照組和正常+?；撬峤M。添加牛磺酸組的大鼠每天灌胃?；撬?.5 g/kg，缺鐵組和正常對照組灌胃等體積去離子水，共21 d。

動物飼養(yǎng)在不銹鋼籠中，環(huán)境溫濕度恒定（（24±1） ℃，（55±5）%），自由采食、自由飲用去離子水，光照12 h/d，實驗過程避免鐵污染。灌胃結(jié)束后，40只大鼠分別用巴比妥鈉腹腔注射麻醉，在大鼠深度麻醉狀態(tài)下剖開腹部，從腹主動脈取血10 mL左右，從中取一部分全血測定Hb，另一部分取血清測血清鐵（SI）、血清鐵蛋白（SF）、總鐵結(jié)合力（TIBC）和血清抗氧化酶活性。

1.3 檢測指標

1.3.1 血液指標的測定 Hb的測定:氰化高鐵血紅蛋白法[9]；血清SI和TIBC，采用南京建成生物工程研究所試劑盒測定。SF采用ELASA法測定，試劑盒購于美國R&D公司。

1.3.2 肝臟和脾臟中鐵含量的測定 待測肝臟和脾臟樣品分別加混合酸（V（硝酸）∶V（高氯酸）=4∶1）10 mL緩緩加熱，待溶液變成無色時，蒸發(fā)余酸至近干，冷卻，定容，稀釋到合適的倍數(shù)后用美國Perkin Elmer公司AA700型火焰原子吸收分光光度計測定鐵含量。

1.3.3 血清抗氧化指標的測定 總抗氧化能力（TAOC）、總超氧化物歧化酶（SOD）活力、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）活力及丙二醛（MDA）含量用試劑盒測定。試劑盒購于南京建成生物工程研究所。

1.4 統(tǒng)計分析

采用SPSS18.0軟件中的單因子方差分析進行統(tǒng)計分析，并用Duncan氏新復極差法進行多重比較。

2 結(jié)果與討論

2.1 ?；撬釋Υ笫笱褐笜说挠绊?/h3>

牛磺酸對大鼠血液指標的影響見表1。經(jīng)28 d的缺鐵造模，大鼠 Hb 含量為（86.07±3.40）g/L，說明大鼠已經(jīng)處于缺鐵性貧血狀態(tài)。對缺鐵性貧血大鼠補充?；撬?1 d后，缺鐵+?；撬峤M大鼠Hb含量已恢復正常，與缺鐵組比較差異顯著（P＜0.05），但低于其他3組（P＜0.05）。

缺鐵組大鼠SI和SF含量顯著低于其他4組（P＜0.05），缺鐵+?；撬峤M大鼠SI和SF含量低于正常組（P＜0.05），補鐵+?；撬峤MSI和SF含量顯著高于缺鐵+牛磺酸組 （P＜0.05），而正常組和正常+牛磺酸組大鼠SI和SF含量差異不顯著 （P＞0.05）。缺鐵組大鼠TIBC顯著高于其他4組 （P＜0.05）。

表1 牛磺酸對大鼠血液指標的影響Table 1 Effect of taurine supplements on blood indexs of rats

2.2 ?；撬釋Υ笫蟾闻K、脾臟中鐵含量的影響

?；撬釋Υ笫蟾闻K、脾臟中鐵含量的影響見表2。缺鐵組大鼠肝臟和脾臟中鐵的含量顯著低于正常組（P＜0.05）。正常大鼠補充?；撬釋Υ笫蟾闻K和脾臟中鐵的含量有一定的提高，并可顯著提高脾臟鐵含量（P＜0.05），缺鐵大鼠補充?；撬岷罂纱龠M肝臟和脾臟中鐵的含量，補鐵+?；撬峤M與缺鐵組比較可顯著提高肝臟和脾臟中鐵的含量（P＜0.05）。

2.3 ?；撬釋Υ笫笱蹇寡趸芰Φ挠绊?/h3>

?；撬釋Υ笫笱蹇寡趸芰Φ挠绊懸姳?。缺鐵組大鼠血清T-AOC、SOD和 GSH-PX活性均低于正常組大鼠，而MDA含量高于正常組（P＜0.05），表明缺鐵可引起機體抗氧化能力的降低。正常+?；撬峤M與正常組比較對大鼠的抗氧化能力沒有顯著影響（P＞0.05）。缺鐵+?；撬峤M和補鐵+牛磺酸組大鼠均可提高血清T-AOC、SOD和 GSH-PX活性，降低MDA含量，補鐵+?；撬峤M大鼠血清MDA含量和SOD活性與缺鐵組大鼠比較差異顯著 （P＜0.05）。

表2 ?；撬釋Υ笫蟾闻K、脾臟鐵含量的影響Table 2 Effects of taurine on iron contents of liver and spleen of rats

表3 ?；撬釋Υ笫笱蹇寡趸芰Φ挠绊慣able 3 Effects of taurine on serum antioxidative ability of rats

2.4 討論

正常組大鼠添加牛磺酸對Hb含量影響不大，而缺鐵和缺鐵后補鐵大鼠添加?；撬峥商岣叽笫驢b含量，表明?；撬崮艽龠M缺鐵大鼠鐵的吸收，而對正常大鼠鐵吸收的促進效果不明顯。

鐵蛋白是體內(nèi)含鐵最豐富的一種蛋白質(zhì)，在鐵的代謝方面起著重要作用。SF能反映體內(nèi)鐵存儲量及機體的營養(yǎng)狀態(tài)，是判定體內(nèi)鐵缺乏的有效指標[10]。TIBC代表血清鐵運鐵蛋白含量，缺鐵性貧血時血清總鐵結(jié)合力可升高[11]。IDA可引起機體SI、SF下降，TIBC含量偏高。缺鐵組大鼠添加?；撬岷骃I、SF含量升高，TIBC含量降低，說明?；撬峥商岣逫DA大鼠對鐵的利用。

肝臟和脾臟是機體鐵主要的儲存部位，在機體鐵代謝平衡中具有重要作用。

IDA大鼠肝臟和脾臟鐵含量與正常組比較顯著降低，說明缺鐵嚴重時可引起機體儲存鐵顯著降低。添加牛磺酸和補鐵后可提高IDA大鼠肝臟和脾臟鐵含量。

SOD與GSH-Px構(gòu)成人體重要抗氧化酶系統(tǒng)，二者協(xié)同作用以減少活性氧自由基的產(chǎn)生，防止脂質(zhì)過氧化及其中間代謝產(chǎn)物對機體的損害。MDA是脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物，測定MDA的量可反映機體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度，間接反映細胞損傷程度[12]。因此，檢測血清T-AOC、SOD、GSH-Px和MDA的變化，可以反映機體的抗氧化能力的變化。本實驗缺鐵組大鼠血清MDA升高，而SOD、GSH-Px和T-AOC下降，表明IDA大鼠體內(nèi)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)增強，抗氧化能力下降，存在明顯的脂質(zhì)過氧化損傷。通過灌胃?；撬峥梢种艻DA大鼠MDA的升高及SOD、GSH-Px、T-AOC的下降，表明?；撬峥杀ＷoIDA大鼠體內(nèi)的抗氧化酶活性，從而維持機體氧化及抗氧化系統(tǒng)的動態(tài)平衡，減少自由基對機體的損傷作用。前期也有研究發(fā)現(xiàn)缺鐵可加重脂質(zhì)過氧化，認為自由基的產(chǎn)生和清除均需要含鐵酶類的參與，而缺鐵時清除自由基的酶活性降低，自由基清除障礙，過多的自由基可引起脂質(zhì)過氧化[13]。?；撬峋哂锌寡趸饔?，因此IDA大鼠添加?；撬岷罂商岣邫C體的抗氧化能力，且補鐵+?；撬峤M大鼠改善IDA效果更佳。

3 結(jié)語

?；撬峥娠@著提高缺鐵性貧血大鼠血紅蛋白、血清鐵、血清鐵蛋白和肝臟鐵含量，顯著降低血清總鐵結(jié)合力，提高血清抗氧化酶活性，降低脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛的產(chǎn)生，表明?；撬峥商岣呷辫F性貧血大鼠鐵的利用和抗氧化能力；?；撬釋φ４笫箬F利用和抗氧化能力的作用效果不顯著。因此，?；撬峥捎行У母纳迫辫F性貧血。

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