快速生物監(jiān)測(cè)儀在高壓蒸汽滅菌效果監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用

葉稱梅，華春燕（廣東省英德市人民醫(yī)院供應(yīng)室，廣東 英德 513000）

生物監(jiān)測(cè)是一種可靠的監(jiān)測(cè)方法，是衡量滅菌質(zhì)量的金標(biāo)準(zhǔn)，但傳統(tǒng)的生物監(jiān)測(cè)手段需要進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)48 h才能出測(cè)試結(jié)果，特別是在植入物零風(fēng)險(xiǎn)管理應(yīng)用上顯得時(shí)效性很差。2010年12月購(gòu)置了一臺(tái)3M公司生產(chǎn)的快速培養(yǎng)自動(dòng)閱讀器，并立即投入使用。對(duì)所有滅菌物品除進(jìn)行1次/周常規(guī)傳統(tǒng)生物監(jiān)測(cè)外，對(duì)植入性手術(shù)器械，植入物，外租手術(shù)器械進(jìn)行每包每鍋次快速生物監(jiān)測(cè)，自2010年12月～2012年5月開(kāi)展253例次植入物及外租器械快速生物監(jiān)測(cè)，全部合格，臨床沒(méi)有與植入物及滅菌后的無(wú)菌物品相關(guān)的感染報(bào)導(dǎo)。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：自2010年12月～2012年5月開(kāi)展253例次植入物及外租器械快速生物監(jiān)測(cè)，應(yīng)用快速生物監(jiān)測(cè)的同時(shí)，每周同時(shí)在同一標(biāo)準(zhǔn)包中放入傳統(tǒng)的生物監(jiān)測(cè)指示劑進(jìn)行生物監(jiān)測(cè)1次，對(duì)2臺(tái)山東新華醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn)的XG1.D型脈動(dòng)真空壓力蒸汽滅菌器進(jìn)行傳統(tǒng)生物監(jiān)測(cè)分別為130次及123次。監(jiān)測(cè)材料選用3M公司的3MTMAttestTM290快速生物培養(yǎng)監(jiān)測(cè)/自動(dòng)閱讀器及配套使用的3MTMAttseTM1292快速生物指示劑（嗜熱脂肪桿菌芽孢菌片）。滅菌器械是山東新華醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn)的XG1.D型脈動(dòng)真空壓力蒸汽滅菌器2臺(tái)，設(shè)定蒸汽壓力0.21 MPa、滅菌溫度132℃、脈動(dòng)真空3次、滅菌時(shí)間10 min，測(cè)試包采用標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試包。

1.2 監(jiān)測(cè)方法

1.2.1 操作要求：具備醫(yī)院消毒員資格，持有高壓滅菌器操作上崗證，經(jīng)過(guò)3M快速生物監(jiān)測(cè)培養(yǎng)/自動(dòng)閱讀器知識(shí)培訓(xùn)。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試包制作與器械包準(zhǔn)備：取16條已洗滌的棉布巾（40 cm×65 cm），長(zhǎng)邊折三折，然后對(duì)折，最后將折好的棉布巾疊放在一起（折疊邊左右擺放），制成15 cm×23 cm×23 cm的標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試包，將嗜熱脂肪芽孢菌片小試管及第五類(lèi)化學(xué)指示卡置于標(biāo)準(zhǔn)包的中心。為了證實(shí)該鍋的可靠性，在快速生物監(jiān)測(cè)的同時(shí)，每周在同一標(biāo)準(zhǔn)包中放入傳統(tǒng)的生物監(jiān)測(cè)指示劑進(jìn)行生物監(jiān)測(cè)1次，嗜熱脂肪桿菌芽胞菌片用小試管裝好，芽胞菌片含量為（5×105～5×106）cfu/片，兩種生物指示劑放于標(biāo)準(zhǔn)包的中央。測(cè)試包放在排氣口上方的滅菌筐內(nèi)。盡量將植入物或外來(lái)器械放于滅菌器上層，裝載時(shí)為便于蒸汽穿透，物品不得超過(guò)柜室容積的90%或＜5%。包與包之間需相隔2.5 cm，最上層滅菌包距柜室頂部至少7.5 cm。

1.2.3 快速生物監(jiān)測(cè)自動(dòng)培養(yǎng)/閱讀器準(zhǔn)備：檢查快速生物監(jiān)測(cè)培養(yǎng)/自動(dòng)閱讀器性能是否良好，設(shè)置參數(shù)，并提前預(yù)熱半小時(shí)。

1.2.4 培養(yǎng)操作：待滅菌周期結(jié)束后，取出標(biāo)準(zhǔn)包內(nèi)菌片試管。戴好護(hù)目眼鏡、手套，按壓關(guān)閉生物指示劑帽，在壓碎孔擠破含培養(yǎng)基的小試管，捏住指示劑帽端，在桌面上輕敲試管的底部，使培養(yǎng)基濕潤(rùn)在試管底部的芽孢片，輕輕搖混勻，再將生物指示劑放進(jìn)合適的培養(yǎng)/閱讀孔，同時(shí)設(shè)同一批次未經(jīng)滅菌的嗜熱脂肪桿菌芽孢片試管為陽(yáng)性對(duì)照管，插入對(duì)照培養(yǎng)/閱讀孔，關(guān)閉自動(dòng)閱讀器孔蓋，等待綠色或紅色指示燈來(lái)顯示結(jié)果。放入培養(yǎng)/閱讀孔后不要移動(dòng)地方，如果不小心取出生物指示劑，必須在10 s內(nèi)放回原位，否則會(huì)導(dǎo)致監(jiān)測(cè)結(jié)果丟失。傳統(tǒng)的生物監(jiān)測(cè)嗜熱脂肪桿菌芽胞菌片，送檢驗(yàn)科在無(wú)菌操作下從試管中取出并移種菌片溴甲酚紫蛋白胨培養(yǎng)液中，使培養(yǎng)基與菌片混合在一起，置于56℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)48 h，同時(shí)接種陰性和陽(yáng)性對(duì)照，觀察結(jié)果。

1.2.5 結(jié)果讀?。嚎焖偕锉O(jiān)測(cè)經(jīng)3 h培養(yǎng)，自動(dòng)培養(yǎng)/閱讀器顯示滅菌后試管為“綠色”陰性，對(duì)照管顯示“紅燈”為陽(yáng)性。傳統(tǒng)的生物監(jiān)測(cè)在48 h后觀察結(jié)果，判斷培養(yǎng)管內(nèi)培養(yǎng)基不變色為無(wú)菌生長(zhǎng)，培養(yǎng)基由紫色變?yōu)辄S色時(shí)則滅菌失敗，滅菌處理后菌片和陰性對(duì)照培養(yǎng)全部無(wú)菌生長(zhǎng)，陽(yáng)性對(duì)照有菌生長(zhǎng)，即可判定為滅菌合格。

1.2.6 記錄：植入物放行實(shí)施可追溯管理，可提高醫(yī)院無(wú)菌保證水平和實(shí)施植入物零風(fēng)險(xiǎn)[1]。根據(jù)WS/310.3-2009規(guī)范要求，我院消毒供應(yīng)室設(shè)計(jì)了快速生物監(jiān)測(cè)記錄本，內(nèi)容包括手術(shù)器械名稱，包內(nèi)器械總件數(shù)、植入物數(shù)量、生產(chǎn)廠家及外租器械廠家名、滅菌器爐號(hào)、爐次、滅菌溫度、壓力、時(shí)間、滅菌日期、失效日期、滅菌操作者及核對(duì)者姓名、快速生物監(jiān)測(cè)結(jié)果陰性標(biāo)簽、對(duì)照管陽(yáng)性標(biāo)簽、第五類(lèi)化學(xué)指示卡。監(jiān)測(cè)完成后由觀察者記錄生物監(jiān)測(cè)結(jié)果，張貼生物監(jiān)測(cè)標(biāo)簽及化學(xué)指示卡，觀察者及核對(duì)者簽名，實(shí)行雙人簽名負(fù)責(zé)制。傳統(tǒng)的生物監(jiān)測(cè)結(jié)果由檢驗(yàn)科醫(yī)生監(jiān)測(cè)，發(fā)放檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告。每批次生物監(jiān)測(cè)均歸檔留存，并保存B-D試驗(yàn)結(jié)果、滅菌過(guò)程記錄、批量監(jiān)測(cè)、化學(xué)監(jiān)測(cè)，資料留存3年，一旦發(fā)生植入物術(shù)后感染可進(jìn)行無(wú)過(guò)錯(cuò)舉證[2]。

2 結(jié)果

253例次植入物及外租器械快速生物監(jiān)測(cè)，全部合格，臨床沒(méi)有與植入物及滅菌后的無(wú)菌物品相關(guān)的感染報(bào)導(dǎo)。253管做對(duì)照的末經(jīng)滅菌的快速生物指示劑均為陽(yáng)性。經(jīng)滅菌后的快速生物指示劑在培養(yǎng)3 h后即變?yōu)樽仙?53次監(jiān)測(cè)結(jié)果與傳統(tǒng)培養(yǎng)48 h監(jiān)測(cè)結(jié)果相一致。

3 小結(jié)

傳統(tǒng)的生物監(jiān)測(cè)是將生物指示劑經(jīng)過(guò)一個(gè)滅菌周期，在無(wú)菌操作下從試管中取出并移種菌片溴甲酚紫蛋白胨培養(yǎng)液中，使培養(yǎng)基與菌片混合在一起，置于56℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)48 h，方可人工對(duì)比判斷結(jié)果?？焖偕锉O(jiān)測(cè)指示劑與傳統(tǒng)方法相比，具有操作簡(jiǎn)單、方便，并不需無(wú)菌移種和無(wú)菌配制培養(yǎng)基，可避免假陽(yáng)性結(jié)果，準(zhǔn)確性高，監(jiān)測(cè)效果理想，結(jié)果可靠，所需時(shí)間短，與傳統(tǒng)生物監(jiān)測(cè)方式相比，縮短了檢測(cè)等待報(bào)告時(shí)間45 h，能夠做到即時(shí)監(jiān)測(cè)。它的使用意義在于出現(xiàn)不合格產(chǎn)品可以在4 h內(nèi)召回，查找原因重新滅菌，確保滅菌物品使用安全，進(jìn)而達(dá)到減少和控制感染的發(fā)生，為外科植入性手術(shù)急診手術(shù)器械的安全使用提供更有利保障，值得推廣應(yīng)用。

[1] 李麗華,杜秋煥,王江濱,等.可追溯管理在消毒滅菌物品管理中的應(yīng)用[J].中華感染學(xué)雜志,2009,19(7)：802.

[2] 趙香玉,邸 欣,生晶輝,等.骨科植入物器械在消毒供應(yīng)室的安全管理[J].中華感染學(xué)雜志,2010,20(17)：2648.