紫外分光光度法測(cè)定苯酚滴耳液中苯酚的含量

鄧慧穎

紫外分光光度法測(cè)定苯酚滴耳液中苯酚的含量

鄧慧穎

目的建立紫外分光光度法測(cè)定苯酚滴耳液中苯酚的含量。方法采用紫外分光光度法測(cè)定苯酚滴耳液中苯酚的含量，并與藥典規(guī)定的溴量法比較。結(jié)果通過實(shí)驗(yàn)苯酚在270nm波長(zhǎng)處有最大吸收，在10～50ug/ml范圍內(nèi)，濃度與吸收度線性關(guān)系良好，其回歸方程A=0.0155C+0.0089,(r=0.9999),平均回收率為99.71%，RSD為0.31%(n=9)，測(cè)定結(jié)果與溴量法結(jié)果一致。結(jié)論此法操作簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確可靠，快速穩(wěn)定，與溴量法含量測(cè)定比較無顯著差異(P>0.05)，可作為苯酚滴耳液的含量測(cè)定方法，適用于基層醫(yī)院制劑的快速檢查。

苯酚滴耳液；含量測(cè)定；紫外分光光度法

苯酚滴耳液作為醫(yī)院常用制劑,收載于《中國醫(yī)院制劑規(guī)范》中，具有消炎、止痛的作用，臨床主要用于治療早期急性中耳炎及外耳道炎，制劑中主要成分苯酚具有刺激性及腐蝕性，故必須嚴(yán)格控制其含量。苯酚及其制劑的含量測(cè)定方法，《中華人民共和國藥典》(2010年版)[1]和《中國醫(yī)院制劑規(guī)范》均采用溴量法[2]，該法需要進(jìn)行硫代硫酸鈉標(biāo)定以及剩余滴定，操作繁瑣費(fèi)時(shí)，測(cè)定結(jié)果常受一些因素干擾且不易掌握，不能適應(yīng)制劑配制時(shí)快速測(cè)定的要求。本文根據(jù)苯酚滴耳液的紫外吸收特性，即苯酚在270nm波長(zhǎng)處有最大吸收，而制劑中其它成分甘油在此波長(zhǎng)處幾乎無吸收，建立紫外分光光度法用于苯酚滴耳液的快速含量測(cè)定，并對(duì)其科學(xué)性、準(zhǔn)確性和可行性進(jìn)行驗(yàn)證。

1 儀器與試藥

1.1儀器 UV-2550PC紫外可見分光光度計(jì)(日本島津)，AB104-S電子天平(梅特勒-托利多)。

1.2試藥 苯酚(分析純，揚(yáng)子化工有限公司，批號(hào)20110927，符合《中國藥典》2010年版規(guī)定)；甘油(分析純，石家莊帥華工貿(mào)有限公司，批號(hào)20111019，符合《中國藥典》2010年版規(guī)定)；蒸餾水(本院制劑室自制)；苯酚滴耳液(本院制劑室配制)。

2 處方與制備

2.1處方苯酚20 g，甘油適量。制備取苯酚加入適量甘油中，攪拌至溶解，再加甘油配成1000 ml，混勻，即得。

3 測(cè)定波長(zhǎng)的選擇

3.1對(duì)照品貯備液的制備 精密稱取苯酚0.2003 g，置100 ml容量瓶中，加水溶解并稀釋到刻度，搖勻，制成濃度為2.003 mg/ml的苯酚貯備液。

3.2紫外吸收光譜的測(cè)定 精密量取苯酚貯備液1 ml，置100 ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，得濃度為20.03ug/ml的苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液；另取輔料甘油2.5 ml，置100 ml容量瓶中，同法稀釋，得到按苯酚滴耳液處方相當(dāng)于含苯酚20ug/ml的甘油輔料溶液，以蒸餾水為空白，狹縫5nm，分別在200～400nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行紫外光譜掃描，結(jié)果顯示苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液在210nm和270nm處有吸收峰，而甘油溶液在210nm波長(zhǎng)處有少量吸收，在270nm處幾乎無吸收，與文獻(xiàn)報(bào)道的一致[3]。故選用270nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

4 線性關(guān)系考查

精密量取上述苯酚貯備液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5 ml,置100 ml容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，配制成10.0,20.0,30.0,40.0,50.0ug/ml五種不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。以蒸餾水為空白，在270nm波長(zhǎng)處測(cè)定各溶液的吸收度，以苯酚濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算得回歸方程為A=0.0155C+0.0089，(r=0.9999)。結(jié)果表明，苯酚濃度在10.0150～50.0750ug/ml的范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好。

5 精密度試驗(yàn)

精密量取本院制劑室配制的2%苯酚滴耳液10 ml，置100 ml容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。再精密吸取稀釋液1 ml，置100 ml容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，即得標(biāo)示量為20.00ug/ml的溶液。采用紫外分光光度法在270nm波長(zhǎng)處，以蒸餾水為空白，測(cè)定吸光度，連續(xù)測(cè)定6次。結(jié)果表明紫外分光光度法用于苯酚滴耳液的含量測(cè)定具有良好的精密度，RSD=0.20%。

6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密量取本院制劑室配制的2%苯酚滴耳液10 ml，置100 ml容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。再精密吸取稀釋液1 ml，置100 ml容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。在室溫下密封、避光保存0、2、4、6、8、24、48 h后，采用紫外分光光度法在270nm波長(zhǎng)處，以蒸餾水為空白，重復(fù)測(cè)定吸光度。結(jié)果表明，苯酚滴耳液供試品在48h內(nèi)吸光度基本不變，穩(wěn)定性良好，以吸光度計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD=0.65%。

7 回收率試驗(yàn)

精密量取甘油10 ml共9份，分別置250 ml容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，按處方比例10 ml苯酚滴耳液中苯酚含量的80%、100%及120%，分別精密稱取已知含量的苯酚置上述250 ml容量瓶中，振搖使溶解，加蒸餾水至刻度，搖勻，以蒸餾水為空白，在270nm波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸光度，代入上述標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程中計(jì)算苯酚的含量，并計(jì)算回收率。結(jié)果表明輔料甘油對(duì)主成分苯酚的測(cè)定結(jié)果無影響，平均回收率為99.71%,RSD=0.31%(n=9)。

8 樣品的測(cè)定

取本院制劑室配制的2%苯酚滴耳液5批，精密量取10 ml，置100 ml容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。再精密量取稀釋液1 ml，置100 ml容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，即得標(biāo)示量為20.00ug/ml的溶液。采用紫外分光光度法在270nm波長(zhǎng)處，以蒸餾水為空白，測(cè)定吸光度，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算以標(biāo)示量為100%的含量，并與溴量法測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比較。對(duì)兩種方法的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行t檢驗(yàn)，結(jié)果表明紫外分光光度法與溴量法無顯著差異(P>0.05)。

9 討論

《中國醫(yī)院制劑規(guī)范》采用溴量法測(cè)定苯酚滴耳液中苯酚的含量，操作步驟復(fù)雜、費(fèi)時(shí)且終點(diǎn)不易判斷，試驗(yàn)誤差較大。本文采用紫外分光光度法測(cè)定苯酚滴耳液的含量，具有回收率高，精密度良好及簡(jiǎn)便快速、適用性廣、干擾小等特點(diǎn)，對(duì)兩種方法的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行t檢驗(yàn)無顯著性差異(P>0.05)，符合《分析方法驗(yàn)證》中“簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好”的要求，說明紫外分光光度可代替溴量法用于苯酚滴耳液的含量測(cè)定，適用于醫(yī)院自制制劑的快速檢測(cè)。

[1] 中國國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典(二部).2010年版.北京：人民衛(wèi)生出版社.

[2] 潘學(xué)田.中國醫(yī)院制劑規(guī)范.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，1995.

[3] 周蕾，邵麗曉.紫外分光光度法測(cè)定苯酚滴耳液的含量.海峽藥學(xué)，2005，17(4)：55-56.

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