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    補(bǔ)骨脂對(duì)去卵巢大鼠體重和腫瘤壞死因子-α的影響

    2013-02-01 08:02:10常燕琴藺美玲鄭天珍張小郁
    中國(guó)老年學(xué)雜志 2013年23期
    關(guān)鍵詞:水煎劑補(bǔ)骨脂飲水量

    常燕琴 藺美玲 岳 嘉 鄭天珍 張小郁 李 偉

    (內(nèi)蒙古科技大學(xué)包頭醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院,內(nèi)蒙古 包頭 014040)

    補(bǔ)骨脂對(duì)去卵巢大鼠體重和腫瘤壞死因子-α的影響

    常燕琴 藺美玲 岳 嘉1鄭天珍2張小郁2李 偉2

    (內(nèi)蒙古科技大學(xué)包頭醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院,內(nèi)蒙古 包頭 014040)

    目的 觀察補(bǔ)骨脂水煎劑對(duì)去卵巢肥胖大鼠體重和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的影響。方法 將SD大鼠隨機(jī)分為:假手術(shù)組、手術(shù)組和補(bǔ)骨脂組。手術(shù)組和補(bǔ)骨脂組行雙側(cè)卵巢切除術(shù),假手術(shù)組只切除卵巢周圍同卵巢大小相似的脂肪組織觀察補(bǔ)骨脂水煎劑對(duì)去卵巢肥胖大鼠的體重、攝食量和飲水量的影響。術(shù)后55 d,股動(dòng)脈取血并測(cè)定血糖、胰島素、雌激素、白細(xì)胞介素-6(IL-6)和TNF-α水平,并測(cè)量其體長(zhǎng),計(jì)算Lee's指數(shù)。結(jié)果 雙側(cè)卵巢切除術(shù)后,手術(shù)組體重、攝食量、TNF-α水平和Lee's指數(shù)均高于假手術(shù)組(P均<0.01)。飲用補(bǔ)骨脂水煎劑后,補(bǔ)骨脂組的體重、攝食量、TNF-α水平和Lee's指數(shù)均低于手術(shù)組(P均<0.05)。結(jié)論 補(bǔ)骨脂水煎劑通過(guò)抑制攝食達(dá)到降低去卵巢肥胖大鼠體重的作用。

    補(bǔ)骨脂水煎劑;去卵巢大鼠;肥胖;腫瘤壞死因子-α

    婦女進(jìn)入更年期后,機(jī)體內(nèi)分泌失調(diào),自主神經(jīng)功能紊亂,出現(xiàn)脂肪堆積、體重增加導(dǎo)致肥胖,成為高血壓、冠心病、糖尿病等慢性疾病的重要危險(xiǎn)因素之一。補(bǔ)骨脂性溫、味辛,具有溫腎助陽(yáng)、納氣、止瀉之功效〔1〕。本研究觀察補(bǔ)骨脂水煎劑對(duì)去卵巢肥胖大鼠體重和腫瘤壞死因子(TNF)-α的影響。

    1 材料與方法

    1.1 動(dòng)物及藥物 三月齡健康SD雌性成年大鼠24只,體重(220±3)g,由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供,合格證號(hào)是SCXX(京)2002-0003。飼料由蘇州雙獅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料科技有限公司提供。補(bǔ)骨脂(產(chǎn)地:四川)水煎劑由甘肅省藥品檢驗(yàn)所鑒定并制備,濃度為100%,4℃冰箱保存,臨用時(shí)與自來(lái)水配成所需要的濃度。氯胺酮購(gòu)于福建古田藥業(yè)有限公司,批號(hào)050309。TNF-α試劑盒購(gòu)于北京晶美生物工程有限公司,批號(hào)20061201。白細(xì)胞介素-6(IL-6)試劑盒購(gòu)于美國(guó)R&D systems公司,批號(hào)R6000B。

    1.2 方法

    1.2.1 分組 24只大鼠隨機(jī)分假手術(shù)組、手術(shù)組和補(bǔ)骨脂組,每組8只。術(shù)前禁食12 h,自由飲水。次日清晨氯胺酮(劑量為100 mg/kg)腹腔注射麻醉后,將手術(shù)組和補(bǔ)骨脂組大鼠的雙側(cè)卵巢切除,假手術(shù)組只切除卵巢周圍同卵巢大小相似的脂肪組織。術(shù)后手術(shù)組和假手術(shù)組自由飲用自來(lái)水,而補(bǔ)骨脂組飲用1%補(bǔ)骨脂水煎劑,在不影響其日飲水量的基礎(chǔ)下,逐漸將濃度增加到12%,該濃度一直維持到55 d。術(shù)后第2天給予普通飼料,攝食量不限。室溫保持(24±2)℃,濕度維持在50%左右,光照晝夜間隔12 h。

    1.2.2 觀察指標(biāo) 每隔5 d定時(shí)稱體重并記錄,每日定時(shí)稱攝食量和飲水量并記錄,共55 d。在55 d后處死大鼠,股動(dòng)脈取血,測(cè)定血糖、胰島素、雌激素水平(三種指標(biāo)均由蘭州軍區(qū)總醫(yī)院安寧分院測(cè)定)、TNF-α和IL-6(此兩種指標(biāo)均在蘭州大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心按照試劑盒說(shuō)明自行測(cè)定)。測(cè)量體長(zhǎng),計(jì)算評(píng)價(jià)Lee's指數(shù)。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用±s表示,各組間體重比較采用單因素方差分析,其他指標(biāo)采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。

    2 結(jié)果

    2.1 補(bǔ)骨脂水煎劑對(duì)去卵巢肥胖大鼠體重的影響 與假手術(shù)組比較,術(shù)后第10天手術(shù)組的體重明顯增加,隨后兩者體重的差距增加;第10天開始補(bǔ)骨脂組體重低于手術(shù)組,50 d時(shí)手術(shù)組和補(bǔ)骨脂組之間的體重差距趨于平穩(wěn)。見表1。

    2.2 補(bǔ)骨脂水煎劑對(duì)去卵巢肥胖大鼠的Lee's指數(shù)、攝食量、飲水量和雌激素水平的影響 手術(shù)組的Lee's指數(shù)高于假手術(shù)組和補(bǔ)骨脂組(分別為P<0.001,P<0.05),假手術(shù)組和補(bǔ)骨脂組之間的Lee's指數(shù)無(wú)差異。手術(shù)組高于假手術(shù)組和補(bǔ)骨脂組(P均<0.001);補(bǔ)骨脂組低于假手術(shù)組(P<0.05)。三組飲水量之間的無(wú)差異。手術(shù)組和補(bǔ)骨脂組的雌激素水平均低于假手術(shù)組(分別為P=0.009,P=0.007)。見表2。

    2.3 補(bǔ)骨脂水煎劑對(duì)去卵巢肥胖大鼠血糖、胰島素、TNF-α和IL-6的影響 三組血糖水平之間的無(wú)差異。三組胰島素水平之間的無(wú)差異。三組IL-6水平之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。手術(shù)組的TNF-α水平高于假手術(shù)組和補(bǔ)骨脂組(分別P<0.001,P<0.01);假手術(shù)組和補(bǔ)骨脂組無(wú)差異。見表3。

    表1 補(bǔ)骨脂水煎劑對(duì)去卵巢肥胖大鼠體重的影響(±s,n=8)

    表1 補(bǔ)骨脂水煎劑對(duì)去卵巢肥胖大鼠體重的影響(±s,n=8)

    與假手術(shù)組比較:1)P<0.05,2)P<0.01,3)P<0.001;與手術(shù)組比較:4)P <0.05,5)P <0.01,6)P <0.001,下表同

    時(shí)間(d) 假手術(shù)組(g) 手術(shù)組(g) 補(bǔ)骨脂組(g)0 219.29±1.55 220.46±1.83 220.35±1.51 5 236.33±3.04 241.46±5.16 234.70±8.69 10 253.04±10.29 276.70±4.483) 258.73±12.005)15 276.35±17.24 308.28±12.102)280.29±13.725)20 279.93±23.01 336.56±15.113)299.01±10.865)25 291.56±21.68 349.64±17.553) 309.35±9.426)30 296.48±19.03 359.96±18.983)319.48±9.301)6)35 300.08±15.14 372.86±19.303)325.49±10.861)6)40 308.61±21.54 383.03±21.633)332.49±11.956)45 315.46±20.74 395.66±22.333)338.38±13.456)50 321.15±21.07 403.18±21.853)343.61±14.876)55 328.30±23.26 406.11±24.813)343.91±15.466)

    表2 補(bǔ)骨脂水煎劑對(duì)去卵巢肥胖大鼠Lee's指數(shù)、攝食量、飲水量和雌激素的影響(±s,n=8)

    表2 補(bǔ)骨脂水煎劑對(duì)去卵巢肥胖大鼠Lee's指數(shù)、攝食量、飲水量和雌激素的影響(±s,n=8)

    組別 Lee's指數(shù) 攝食量(m/g)飲水量(ml)雌激素(pg/ml)假手術(shù)組 321.64±6.01 20.55±1.11 38.32±5.43 17.57±8.96手術(shù)組 338.51±5.443)23.67±1.906)38.55±6.95 7.86±1.015)補(bǔ)骨脂組 326.94±9.251)19.35±1.182)3)41.72±8.20 7.57±1.002)

    表3 補(bǔ)骨脂水煎劑對(duì)去卵巢肥胖大鼠血糖、胰島素、TNF-α和IL-6的影響(±s,n=8)

    表3 補(bǔ)骨脂水煎劑對(duì)去卵巢肥胖大鼠血糖、胰島素、TNF-α和IL-6的影響(±s,n=8)

    組別 血糖(mmol/L)胰島素(μIU/ml)TNF-α(pg/ml)IL-6(pg/ml)假手術(shù)組 6.06±0.50 17.31±7.45 23.77±9.38 84.08±10.76手術(shù)組 6.11±0.59 17.12±8.80 52.86±15.922)85.13±8.23補(bǔ)骨脂組 6.00±0.44 20.23±7.52 30.45±10.091)85.96±9.17

    3 討論

    雌激素可調(diào)節(jié)脂代謝,主要通過(guò)以下幾條途徑減少脂肪的堆積過(guò)程:直接影響下丘腦,減少攝食〔2〕。降低脂蛋白脂肪酶(LPL)活性,抑制脂肪的形成。誘導(dǎo)激素敏感性脂肪酶(HSL)的活性或通過(guò)增加腎上腺素的脂解作用來(lái)間接地增加脂肪的分解〔3〕。增加脂肪酸的β氧化過(guò)程,減少脂質(zhì)在脂肪組織中沉積〔4〕。本實(shí)驗(yàn)SD大鼠由于雌激素水平下降,腹部?jī)?nèi)臟脂肪明顯增加,導(dǎo)致去卵巢大鼠肥胖。

    肥胖實(shí)際上是一種由食欲和能量調(diào)節(jié)紊亂引起的疾病。下丘腦是中樞神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)攝食的基本部位,下丘腦存在一個(gè)調(diào)節(jié)攝食的網(wǎng)絡(luò)環(huán)路。此網(wǎng)絡(luò)環(huán)路有增食信號(hào)和抑食信號(hào),它們之間有精確的聯(lián)系通路,兩種信號(hào)神經(jīng)元的活性會(huì)受到內(nèi)環(huán)境中多種激素和活性分子的影響。如果某個(gè)或某幾個(gè)環(huán)節(jié)受到損害,將導(dǎo)致多食、體重增加或厭食、體重下降。

    TNF-α是調(diào)節(jié)攝食網(wǎng)絡(luò)環(huán)路中的一種抑食因子,是Carswell等〔5〕首次報(bào)道在經(jīng)卡介苗注射或細(xì)菌內(nèi)毒素感染小鼠血清中含有一種能引起腫瘤組織出血壞死的物質(zhì)。這種物質(zhì)對(duì)體外培養(yǎng)的多種腫瘤細(xì)胞株具有細(xì)胞毒性作用,但對(duì)正常細(xì)胞無(wú)殺傷作用。它是一種主要由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞分泌的含有157個(gè)氨基酸的可溶性多肽,與其受體結(jié)合發(fā)揮其功能。TNF-α其功能之一是抑制攝食,降低體重〔6〕。TNF-α參與脂肪分解作用,防止自身脂肪過(guò)度積累。TNF-α可通過(guò)抑制LPL的活性并降低其mRNA的表達(dá),抑制脂肪細(xì)胞對(duì)外源性脂質(zhì)的攝取,降低脂肪酸合成關(guān)鍵酶乙酰CoA羧化酶mRNA水平,抑制脂肪合成,促進(jìn)脂肪分解。TNF-α還能增加HSL活性,促進(jìn)脂肪分解〔7〕。

    研究發(fā)現(xiàn),超重、肥胖者和胰島素抵抗等人群中血清TNF-a水平是升高的,并且與心血管疾病的發(fā)生密切相關(guān)〔8~10〕。在肥胖大鼠中,TNF-α水平升高,但體重不會(huì)下降。因此,有學(xué)者認(rèn)為可能在肥胖時(shí)存在有TNF-α受體敏感性下降或受體后缺陷,即產(chǎn)生了TNF-α抵抗,從而導(dǎo)致肥胖加重〔11〕。

    本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示去卵巢的肥胖大鼠產(chǎn)生了TNF-α抵抗。但有學(xué)者〔12〕認(rèn)為肥胖時(shí)脂肪細(xì)胞合成并分泌較多的可能是一種保護(hù)性生理反應(yīng)機(jī)制,有利于抑制食物攝入和促進(jìn)能量消耗,在某種程度上限制了體重進(jìn)一步增長(zhǎng)。通過(guò)飲用補(bǔ)骨脂水煎劑后,血清TNF-α水平下降,并且體重降低以及攝食量也減少,可能是補(bǔ)骨脂水煎劑中的物質(zhì)使TNF-α水平下降,增加了TNF-α受體敏感性或改善受體后缺陷的途徑,使得TNF-α能夠發(fā)揮其抑制攝食的作用,從而使體重下降。

    綜上,補(bǔ)骨脂水煎劑主要通過(guò)抑制攝食,降低去卵巢肥胖大鼠體重。

    1 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)〔S〕.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:129-30.

    2 Wade GN,Gray JM,Bartness TJ.Gonadal influences on adiposity〔J〕.Int JObes,1985;9(Suppl1):83-92.

    3 Palin SL,McTernan PG,Anderson LA,etal.17Beta-estradioland anti-estrogen ICI:compound 182,780 regulate expression of lipoprotein lipase and hormone-sensitive lipase in isolated subcutaneous abdominal adipocytes〔J〕.Metabolism,2003;52(4):383-8.

    4 Misso ML,Murata Y,Boon WC,et al.Cellular and molecular characterization of the adipose phenotype of the aromatase-deficient mouse〔J〕.Endocrinology,2003;144(4):1474-80.

    5 Carswell EA,Old LJ,Kassel RL,etal.An endotoxin-induced serum factor that causes necrosis of tumors〔J〕.Proc Nat Acad Sci,1975;72(9):3666-70.

    6 Plata-Salaman CR.Anorexia during acute and chroni disease〔J〕.Nutrition,1996;12(2):67-78.

    7 Kern PA,Saghizadeh M,Ong JM,et al.The expression of TNF-α in human adipose tissue regulation by obesity,weightloss and relationship to lipoprotein lipase〔J〕.JClin Invest,1995;95(5):2111-9.

    8 Winkler G,Lakatos P,Salamon F,et al.Elevated serum TNF-alpha level as a link between endothelial dysfunction and insulin resistance in normotensive obese patients〔J〕.DiabetMed,1999;16(3):207-11.

    9 Demirbas B,Guler S,Cakir B,et al.Plasma tumor necrosis factor alpha levels and insulin resistance in nondiabetic hypertensive subjects〔J〕.Horm Res,2002;58(6):283-6.

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    11 謝 軍,鄒潔寧,劉良培,等.高脂誘導(dǎo)性肥胖大鼠的胰島素敏感性與TNF-α及FFAs水平〔J〕.實(shí)用醫(yī)藥雜志,2004;21(4):334-6.

    12 Argiles JM,Lopez-Soriano J,Busquets S,et al.Journey from cachexia to obesity by TNF〔J〕.FASEB J,1997;11(10):743-51.

    Effects of Pructus Psoraleae on weight and level of tumor necrosis factor-αin ovarietom ized rats

    CHANG Yan-Qin,LIN M ei-Ling,YUE Jia,et al.
    Basic M edical College,Baotou M edical College,Inner Mongolia University of Science & Technology,Baotou 014040,Inner Mongolia,China

    Objective To observe the effects ofwater extracts from Fructus Psoraleae on theweight and level of tumor necrosis factor-α (TNF-α)in ovariectomized rats.M ethods Adult female SD ratsweighted(220 ±3)gwere randomly divided into three groupswith 8 rats in each group:sham-operated,ovariectomized and Fructus Psoraleae groups.The rats were underwent a bilateral ovariectomy except those in the sham-operated group which were subjected to the removal of bilateral fat asmuch as ovariectomized group with the ovaries remained.The rats in sham-operated and ovariectomized groups freely drank waterwhile the rats in Fructus Psoraleae group freely took 1%water extracts from Fructus Psoraleae and the concentration of Fructus Psoraleae gradually increased to 12%which was continued for the end of the experiment(55 days).The food-intake and water-intake of the rats in each group wereweighed daily and the body weightwasmeasured every five days.At the end of the experiment,femoral artery blood samples of the ratswere collected to determine the levels of plasma glucose,insulin and estrogen.At the same time,the levels of interleukin-6 and TNF-α weremeasured according to the kits.Finally Lee's index was calculated bymeasuring their body length.Results The weight,food-intakes,Lee's index and the level of TNF-α in ovariectomized group were higher than those in sham operated group(P <0.001,P <0.001,P <0.01,P <0.001 respectively).After the rats in Fructus Psoraleae group drank the water extracts from Fructus Psoraleae,their weight,food-intake,level of TNF-α and Lee's index were lower than those of the rats in ovariectomized group(P <0.001,P <0.05,P <0.01,P <0.05 respectively).Conclusions The water extracts from Fructus Psoraleae could reduce the body weight of ovariectomized rats by inhibiting food-intake.

    Water extracts from Fructus Psoraleae;Ovariectomized rats;Obesity;Tumor necrosis factor-α

    R71

    A

    1005-9202(2013)23-5886-03;

    10.3969/j.issn.1005-9202.2013.23.50

    國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.30572428)

    1 甘肅中醫(yī)學(xué)院護(hù)理學(xué)院

    2 蘭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理與心理學(xué)研究所

    常燕琴(1975-),女,碩士,主要從事內(nèi)分泌代謝與肥胖研究。

    book=1,ebook=2374

    〔2012-05-08收稿 2012-09-10修回〕

    (編輯 安冉冉 曹夢(mèng)園)

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