菌尿?qū)δ蛞悍治鰞x測定尿紅細胞的影響

郭瑞瑩

鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院檢驗科，河南鄭州450000

泌尿系疾病、特別是腎病診斷的診斷，尿紅細胞檢測是重要實驗指標(biāo)之一。評價腎臟濃縮稀釋功能，用尿液滲透壓的測定方法相對較準(zhǔn)確，但這種方法測定不僅需要特殊的儀器，而且操作起來十分繁瑣。一般情況下，檢測尿液有形成分多是采取顯微鏡尿沉渣檢查，自動尿液沉渣分析儀的出現(xiàn)，方便了尿常規(guī)的過篩檢測，不但檢測速度快，使人為的誤差減小，相對安全，而且具有高精密度，同時，在實際檢測過程中，菌尿在對尿液分析儀檢測法和人工鏡檢法的結(jié)果不一致，引發(fā)尿路感染的細菌可能影響到尿紅細胞的測定，本實驗通過兩種檢測儀器和方法，采用不同的菌株分析研究。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 標(biāo)本來源 菌尿：患者因在醫(yī)院泌尿系和門診感染而住院中，用無菌的操作原則，采集患者的新鮮正常的晨尿液標(biāo)本1120份；非菌尿：同樣用無菌的操作原則，隨機收集非泌尿系感染患者的新鮮正常晨尿液標(biāo)本1120份，經(jīng)過篩查，全部為陰性。用UF－1000全自動尿沉渣分析儀采用120份樣本；IQ-200全自動尿液分析儀采用1000份樣本。將相對濃度、不同種類的細菌，加入到這些結(jié)果正常的部分尿液標(biāo)本中，使之達到105-106個／mL細菌總數(shù)，并與不加細菌的尿液做比較。

1.1.2 試驗器材UF－1000全自動尿沉渣分析儀及其配套試劑、IQ-200全自動尿液分析儀及配套試劑；顯微鏡、改良血細胞計數(shù)板。

2 UF－1000全自動尿沉渣分析儀的方法

1.2 方法

1.2.1 菌株 大腸桿菌（大腸埃希菌）、綠膿桿菌（銅綠假單胞菌）、金葡菌（金黃色葡萄球菌）為質(zhì)控菌株 ，尿紅細胞的測定：取10 mL尿液，把尿液混合均勻，依照UF－1000的說明書進行嚴(yán)格的操作，把試驗的結(jié)果記錄下來，同時把尿液用一次性滴管滴入到一次性的尿板中，10大方格的紅細胞數(shù)采用顯微鏡計數(shù)，以紅細胞平均數(shù)／μL報告，試驗必須在2 h內(nèi)完成。

1.2.2 尿潛血的測定 把尿液混合均勻，取4～5滴后直接滴入潛血板反應(yīng)孔內(nèi)，需在5 min內(nèi)完成并觀察結(jié)果。

1.2.3 統(tǒng)計處理 數(shù)據(jù)統(tǒng)計選用SPSS 17.0統(tǒng)計學(xué)軟件包，t檢驗進行計量資料，采用χ2檢驗處理計數(shù)資料，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

對尿紅細胞的測定，不同菌尿有不同的結(jié)果，綠膿桿菌影響最大，金葡菌影響最小，大腸桿菌比金葡菌影響較大一些，見下表1。

表1 不同各類菌尿?qū)δ蚣t細胞測定結(jié)果的影響

以鏡檢法作為標(biāo)準(zhǔn)，UF－1000檢測尿紅細胞比較菌尿組假陽性率高于非菌尿組，兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0．01），見表2。

表2 以鏡檢法為標(biāo)準(zhǔn)UF－1000檢測尿紅細胞假陽性率（%）

3 IQ-200全自動尿液分析儀方法

3.1 方法

3.1.1 菌株 大腸桿菌（大腸埃希菌）、綠膿桿菌（銅綠假單胞菌）、金葡菌（金黃色葡萄球菌）為質(zhì)控菌株。

3.1.2 紅細胞尿液的配制 尿液分200份一組，共分為4組，將留取的尿液標(biāo)本混合，以5mL/管分裝試管。取門診血常規(guī)標(biāo)本，根據(jù)測出的紅細胞數(shù)進行稀釋，以50～150/μL的濃度滴入到分裝好的尿液標(biāo)本中。

3.1.3 菌尿的配制 首先計數(shù)標(biāo)準(zhǔn)菌株，再把細菌加入到尿液中，使糞腸球菌、金葡菌、大腸桿菌的濃度分別為104、105、106、107cfu/mL， 白色念珠菌濃度分別為10×104、8.5×104、7×104、6.5×104cfu/mL。

3.1.6 統(tǒng)計學(xué)處理使用SPSS 12.0統(tǒng)計軟件包進行分析，所有數(shù)據(jù)均以（±s）表示，顯著性檢驗采用方差分析檢驗、配對t檢驗。

3.2 結(jié)果

白色念珠菌對IQ-200分析儀檢測紅細胞的影響明顯，白念珠菌的濃度在6.5×104紅細胞與明顯差異；放置一定時間后，霉菌大部分孢子長出菌絲，可以被IQ-200的軟件識別。

4 討論

此實驗用培養(yǎng)細菌來作成菌尿，進行測定其紅細胞得出的結(jié)果，可以肯定菌尿?qū)δ蚣t細胞測定有一定的影響。臨床中采用顯微鏡檢測的方法居多，雖然鏡檢結(jié)果準(zhǔn)確可靠，但是此方法效率低，很難滿足臨床檢測的需要。尿液分析儀的各類較多，不同的類型設(shè)計原理也一樣，所以對細菌的識別能力也會有不同程度的差別，細菌的種類對紅細胞的檢測影響程度也不同。此次實驗結(jié)果證明，在不同菌尿的影響下，和使用不同分析儀會有不同的結(jié)果，

UF-1000的原理是采用激光流式細胞技術(shù)，及多項領(lǐng)域技術(shù)于一體，對單個細胞進行多參數(shù)的快速定量分析和分選，對診斷泌尿系感染方面有很大的作用。此次得到結(jié)果，綠膿桿菌影響最大，假陽性的結(jié)果中發(fā)現(xiàn)有大腸桿菌、腸球菌、葡萄球菌屬和真菌等，原因是儀器在多種原因影響下造成漏檢。

IQ-200全自動分析儀解決了尿沉渣檢查不能達不到標(biāo)準(zhǔn)化的問題。此方法不用對尿液離心，對尿液分析全自動化，最適用批量樣本檢測。IQ-200的精密度高，攜帶污染率低，同時，在臨床應(yīng)用中也有不足之處，由其是在對紅細胞進行檢測時非常容易受到影響。此次試驗得出，由于大腸桿菌、金葡菌和糞腸球菌的形態(tài)與紅細胞的形態(tài)有差異，IQ-200的自動微粒識別軟件對其識別十分準(zhǔn)確，而對霉菌會造成誤差，原因是霉菌在形態(tài)上與紅細胞相似，如有這種情況，可以向標(biāo)本中加入幾滴冰醋酸，便能夠區(qū)別開來。

綜上所述，干擾尿液分析儀檢測紅細胞結(jié)果的原因很多，其中來自以部分細菌的影響為一種，尿液分析儀不但可以把紅細胞完整檢測，又能檢測游離的血紅蛋白，同時，由于尿液中有肌紅蛋白也可呈陽性反應(yīng)，使鏡檢與尿液分析儀測定結(jié)果不一致，出現(xiàn)假陽性。

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