蜂蜜中摻入不同類型果葡糖漿的檢測

摘要：采用薄層色譜法檢測蜂蜜中摻有的不同類型的果葡糖漿。果葡糖漿中的高分子糖經(jīng)活性炭-硅藻土柱的富集、濃縮，再用（1+1）乙醇溶液洗脫，最后用薄層色譜法分離、檢測。實驗證明，薄層色譜法可檢測出蜂蜜中摻入的F42和F55類型的果葡糖漿，而無法鑒別摻入的F90類型的果葡糖漿。

關(guān)鍵詞：蜂蜜；果葡糖漿；薄層色譜；檢測

中圖分類號：S896.8文獻(xiàn)標(biāo)識號：A文章編號：1001-4942（2013）02-0117-03

蜂蜜是一種營養(yǎng)豐富、組成復(fù)雜的天然食品，能為人類提供各種營養(yǎng)元素以滿足正常的生理需要，還有增進(jìn)食欲、改善腸胃功能、治療貧血、保護(hù)肝臟、提高人體免疫能力等多種功能[1]，因此成為消費者青睞的營養(yǎng)保健品，但摻偽現(xiàn)象也隨之增多。

蜂蜜含有70%以上的果糖和葡萄糖，能夠被人體腸壁細(xì)胞直接吸收利用，對兒童、老年人以及病后恢復(fù)者來說尤為重要。果葡糖漿的制備是將含淀粉的漿液經(jīng)過α-淀粉酶的催化作用形成糊精，糊精經(jīng)過糖化酶的催化作用形成葡萄糖；葡萄糖在葡萄糖異構(gòu)酶的催化作用下，分子結(jié)構(gòu)發(fā)生變化形成果糖。因此果葡糖漿中果糖和葡萄糖含量較高，與蜂蜜成分相仿。正因如此，不法廠商向蜂蜜中摻入廉價易得的果葡糖漿以欺騙消費者。

關(guān)于蜂蜜中摻假問題國內(nèi)研究主要集中于蜂蜜中摻入低聚糖的研究，如薄層色譜法研究與探討蜂蜜中摻入低聚糖[2，3]、采用同位素比率法測定碳-4植物糖[4]等。隨著生產(chǎn)工藝的進(jìn)步，根據(jù)果葡糖漿組分不同，目前市場上主要有三種類型的果葡糖漿[5，6]：第一代F42果葡糖漿、第二代F55果葡糖漿和第三代F90果葡糖漿。對于蜂蜜中摻入不同類型的果葡糖漿，國內(nèi)外尚未見報道。本實驗探索采用薄層色譜法鑒別蜂蜜中摻入的上述三種果葡糖漿。

1材料與方法

1.1儀器、試劑與材料

1.1.1儀器真空干燥箱；電熱干燥箱；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器；真空抽氣泵；薄層色譜展開槽；微量注射器；電子天平：感量0.1 mg；電吹風(fēng)機。

1.1.2材料純蜂蜜；三種類型果葡糖漿：F42、F55、F90。

1.1.3試劑無水乙醇；正丁醇；乙酸；丙酮；磷酸（優(yōu)級純）；活性碳（100目）；硅藻土；二苯胺鹽酸鹽；苯胺；薄層層析板（硅膠G型）；薄層展開劑：正丁醇+乙酸+水（2+1+1）；顯色劑：稱取1.0 g二苯胺鹽酸鹽至盛有50.0 ml丙酮的燒杯中，再加入1 ml苯胺，混合攪拌，同時加入85%磷酸5 ml，完全溶解后，冷凍保存或使用當(dāng)日配制。

1.2實驗方法

1.2.1活性碳柱的制備在內(nèi)徑20～22 mm、長300～400 mm、上端帶有口徑5 cm的漏斗、下端帶有活塞的玻璃管底部塞少量的玻璃棉，關(guān)掉活塞，加水到玻璃管的中部。在小燒杯中稱取2.0 g硅藻土，加入少量的水?dāng)嚢韬笞⑷牍苤?，自然沉降形成約1 cm厚的硅藻土層。然后稱取6 g活性碳和6 g硅藻土，加入少量水，混勻，注入玻璃管中。打開活塞，使活性碳、硅藻土混合物自然沉降，再次注入用水混合后的2.0 g硅藻土，使其自然沉降。通過調(diào)節(jié)真空抽氣泵的真空度控制流速在8.5 ml/min左右。然后，在真空抽氣泵吸引下，用500 ml水預(yù)洗活性碳柱，再用200 ml乙醇溶液（1+1）活化柱子，過樣前先用500 ml蒸餾水沖洗柱子。

柱子暫時不用時，可用乙醇溶液（1+1）浸泡，用前再用250 ml水預(yù)洗。整個實驗過程中，柱子填充物不能暴露在空氣中。

1.2.2樣品處理稱取1 g試樣于燒杯中，精確至1 mg，溶于10 ml水中，緩慢加到活性碳柱上，打開活塞，使樣品溶液自然流過活性柱。分兩次各用5 ml水沖洗燒杯，沖洗液也轉(zhuǎn)入柱中，液面下降到柱面上端時關(guān)閉活塞，不要抽干液體。用300 ml乙醇溶液（7+93）洗滌柱子，棄掉流出液，洗去小分子糖；再用100 ml乙醇溶液（1+3）沖洗；最后用100 ml乙醇溶液（1+1）洗脫柱子，收集洗脫液于旋蒸瓶中，蒸干后放入真空干燥箱，在65℃、26～33 kPa條件下干燥30 min。稱取溶出物的質(zhì)量。加入1 ml水溶解后，作為薄層層析用點樣液。

以上述方法分別處理純F42、純F55、純F90果葡糖漿；在蜂蜜中分別加入5%、10%的上述三種類型果葡糖漿，同上述方法檢測。

1.2.3薄層層析用10 μl微量注射器在距離薄層板下端2.0 cm位置，點入5 μl待測點樣液，觀察結(jié)果。

2結(jié)果與分析

2.1純蜂蜜及純果葡糖漿圖譜對比

從圖1可以看出，純F42和F55果葡糖漿洗脫之后均在原點和Rf值0.35之間出現(xiàn)藍(lán)色帶狀斑點群；但沒有摻入果葡糖漿的純蜂蜜和純F90果葡糖漿洗脫之后在原點與Rf值0.35之間未出現(xiàn)藍(lán)色帶狀斑點群。這主要是因為純蜂蜜中幾乎不含低聚果糖，而F90果葡糖漿含有90%以上的果糖，低聚果糖含量極少，無法檢測出來。