煙嘧磺隆中間體2—氨基磺酰基—N，N—二甲基煙酰胺的高效液相色譜法測(cè)定

摘 要：采用高效液相色譜法，以甲醇的醋酸水溶液為流動(dòng)相、Simpack-VP-ODS為分離柱，在可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器254nm波長(zhǎng)下，對(duì)磺酰胺進(jìn)行定量分析。結(jié)果表明，該方法的線性相關(guān)系數(shù)為0.999 9，標(biāo)準(zhǔn)偏差為 0.43，平均回收率為99.94%，變異系數(shù)為0.44%。

關(guān)鍵詞：中間體；2-氨基磺酰基-N，N-二甲基煙酰胺（磺酰胺）；高效液相色譜法

中圖分類號(hào) S13 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-7731（2013）03-24-02

Determination of 2-aminosulfonyl-N，N-dimetylnicotinamide by HPLC

Xu Qingfeng1 et al.

（1 Hefei Juji Agriculture develorment Co. LTD ，Hefei 230088，China）

Abstract：A method for analysis of 2-aminosulfonyl-N，N-dimetylnicotinamide（sulphonamide） by HPLC was developed. Samples were dissolved in methanol and acetic acid as mobile phase，Simpack-VP-ODS column and UV detector （254nm） were used for quantitative determination. The results showed that the linear correlaion coefficient was 0.999 9， the standard deviation was 0.43，the average recovery rate was 99.94%，the variation coefficient was 0.44%.

Key words：Intermediate；2-aminosulfonyl-N，N-dimetylnicotinamide（sulphonamide）；HPLC

煙嘧磺?。╪icosulfuron）化學(xué)名稱為1-（4，6-二甲氧基嘧啶-2-基）-3-（3-二甲基氨基甲磺吡啶-2-基磺酰）脲，是一種新型玉米專用除草劑，具有高效低毒、環(huán)境相容性好等特點(diǎn)[1-3]。2-氨基磺酰基-N，N-二甲基煙酰胺（以下簡(jiǎn)稱磺酰胺）是合成煙嘧磺隆的重要中間體，是合成路線中反應(yīng)時(shí)間最長(zhǎng)、收率最低的一步，用最佳的方法迅速分析出其準(zhǔn)確含量，對(duì)于下一步生產(chǎn)有著重要意義?；酋ｋ孱惓輨┓肿咏Y(jié)構(gòu)中脲橋的熱不穩(wěn)定性，使得其無(wú)法直接用GC 或GC–MS 分析測(cè)定，目前對(duì)煙嘧磺隆原藥定量分析基本上都采用高效液相色譜法，而對(duì)磺酰胺的分析測(cè)定方法尚未見報(bào)道[4-8]。本文采用高效液相色譜法，對(duì)磺酰胺進(jìn)行定量分析試驗(yàn)研究，以期得到一個(gè)操作簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的分析測(cè)定方法，為企業(yè)生產(chǎn)過程中的質(zhì)量控制和質(zhì)檢機(jī)構(gòu)質(zhì)量檢測(cè)提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

11 試劑與材料 甲醇、冰醋酸 （色譜純，天津四友）； 2-氨基磺?；?N，N-二甲基煙酰胺（磺酰胺）（98%，青島寒冰化工有限公司）；磺酰胺試樣（合肥久易農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司）；超純水。

12 儀器和設(shè)備 島津高效液相色譜儀，配高壓泵、可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器、Simpack-VP-ODS分離色譜柱、色譜工作站等；過濾器；微量進(jìn)樣器；超聲波清洗器等。

13 試驗(yàn)方法

131 溶液的配制 （1）標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制。稱取磺酰胺標(biāo)準(zhǔn)品002g（準(zhǔn)確至0000 2g）于50mL容量瓶中，加入適量甲醇溶解，置此容量瓶于超聲波浴槽中約5min，取出冷卻至室溫后，用甲醇定容至刻度，搖勻備用。（2）試樣溶液的配制。稱取磺酰胺試樣002g（準(zhǔn)確至0000 2g）于50mL容量瓶中，加入適量甲醇溶解，置此容量瓶于超聲波浴槽中約5min，取出冷卻至室溫后，用甲醇定容至刻度，搖勻備用。

132 高效液相色譜分析條件 試樣用甲醇溶解，以甲醇-冰醋酸水溶液為流動(dòng)相，用Simpack-VP-ODS分離色譜柱和紫外檢測(cè)器（254nm）對(duì)試樣進(jìn)行高效液相色譜分離和測(cè)定。具體分析條件如下：色譜柱：Simpack-VP-ODS，250mm×46mm（id）不銹鋼柱，粒徑：5μm；柱溫：室溫（溫差變化不大于2℃）；流動(dòng)相：甲醇/水/冰醋酸=55/45/02（V/V），經(jīng)045μm孔徑的濾膜過濾，并在超聲波浴槽中超聲脫氣15min，流速：10mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm；進(jìn)樣體積：20μL；保留時(shí)間：32min。

133 標(biāo)準(zhǔn)曲線、準(zhǔn)確度和精密度 （1）標(biāo)準(zhǔn)曲線。稱取磺酰胺標(biāo)準(zhǔn)品（準(zhǔn)確至0000 2g）于50mL容量瓶中，按試驗(yàn)方法配制磺酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，移取該溶液1、2、3、4、5、6、8mL于7個(gè)10mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻。并用高效液相色譜分析進(jìn)行測(cè)定，以磺酰胺溶液的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)作圖，得到相應(yīng)的線性關(guān)系曲線。（2）添加回收率。稱取5份已知確切含量的磺酰胺試樣，分別加入磺酰胺標(biāo)準(zhǔn)品20mg進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果要滿足農(nóng)藥原藥分析的要求。 （3）精密度。稱取磺酰胺標(biāo)準(zhǔn)品002g（準(zhǔn)確至0000 2g）于50mL容量瓶中，余同標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制，8 次重復(fù)。

134 測(cè)定與計(jì)算方法 在高效液相色譜操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至相鄰2針的峰面積<15%時(shí)，按標(biāo)準(zhǔn)溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。將測(cè)得的2針試樣溶液和試樣溶液前后2針標(biāo)準(zhǔn)溶液中的磺酰胺的峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中磺酰胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù)X（%），以式計(jì)算：

X=A2m1PA1m2

式中：A1——標(biāo)樣溶液中磺酰胺的峰面積平均值；A2——樣品溶液中磺酰胺的峰面積平均值；m1——磺酰胺標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2——磺酰胺試樣的質(zhì)量，g；P ——磺酰胺標(biāo)樣的含量，%。

2次平行測(cè)定結(jié)果之差不大于15%，其算術(shù)平均值為測(cè)定值。

2 結(jié)果與分析

21 高效液相色譜分析條件選擇結(jié)果 （1）檢測(cè)波長(zhǎng)選擇。通過多次波長(zhǎng)調(diào)解實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：磺酰胺在254nm下雜質(zhì)吸收較小，主峰和雜質(zhì)峰（溶劑峰）的分離效果較好，因此，本實(shí)驗(yàn)選擇254nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。（2）流動(dòng)相選擇。經(jīng)多次配比實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，用Simpack-VP-ODS分離色譜柱，以甲醇∶ 水∶ 冰醋酸=55∶ 45∶ 02（V/V/V）的混合液為流動(dòng)相，流速為10mL/min時(shí)，分析時(shí)間較短，峰形尖銳、對(duì)稱，且保留時(shí)間適中，可使樣品中有效成分及其雜質(zhì)得到較好的分離。以上述色譜分析條件測(cè)定的磺酰胺標(biāo)樣和典型的磺酰胺樣品的高效液相色譜圖如圖1和圖2所示：

圖1 磺酰胺標(biāo)樣高效液相色譜圖

圖2 磺酰胺樣品高效液相色譜圖

22 標(biāo)準(zhǔn)曲線 標(biāo)準(zhǔn)曲線方程及相關(guān)系數(shù)為：y= 651 110x + 28 501， R2 = 0999 9。

23 準(zhǔn)確度與精密度 平均回收率為9952%，RSD為085%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為043，變異系數(shù)為044%。

3 結(jié)論

建立了用Simpack-VP-ODS分離色譜柱，以甲醇∶ 水∶ 冰醋酸=55∶ 45∶ 02（V/V/V）的混合液為流動(dòng)相，254nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)的煙嘧磺隆中間體2-氨基磺酰基-N，N-二甲基煙酰胺的高效液相色譜分析方法，該方法具有定量準(zhǔn)確、重復(fù)性好、分析速度快，線性關(guān)系良好、操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn)，是目前測(cè)定2-氨基磺?；?N，N-二甲基煙酰胺較為理想的方法。

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（責(zé)編：張宏民） 19卷03期張賢萍 藍(lán)莓組培分化苗瓶外架空生根育苗關(guān)鍵技術(shù)研究