不同產(chǎn)區(qū)三種吳茱萸有效成分的研究

王承南，王紅娟，李 平，林凌秋

不同產(chǎn)區(qū)三種吳茱萸有效成分的研究

王承南，王紅娟，李 平，林凌秋

（中南林業(yè)科技大學(xué) 林學(xué)院，湖南 長沙410004 )

對我國吳茱萸、吳茱萸變種石虎和變種疏毛吳茱萸的主要藥用成分吳茱萸堿和吳茱萸次堿進(jìn)行了分析。研究結(jié)果表明：吳茱萸3品種中，吳茱萸的藥用有效成分最高；3個品種中，廣西灌陽縣種植的吳茱萸和石虎含堿量分別是2.846%和1.34%，明顯高于其他產(chǎn)區(qū)；疏毛吳茱萸含堿量最高的是貴州余慶縣，含堿量為0.33%，明顯低于吳茱萸和石虎。建議在發(fā)展吳茱萸的種類時，應(yīng)重點考慮發(fā)展吳茱萸，從產(chǎn)地的規(guī)劃上應(yīng)重點考慮廣西的北部和湖南的西南部及貴州的東南地區(qū)。

吳茱萸；疏毛吳茱萸；石虎；生物堿；HPLC指紋圖譜

吳茱萸為蕓香科落葉灌木或小喬木植物吳茱 萸 Evodia rutoecarpa （Juss.） Benth.、 石 虎 E.rutaecarpa （Juss.） Benth. var. officinalis （Dode）Huang 或疏毛吳茱萸 E. rutaecarpa （Juss.） Benth.var. bodinieri （Dode） Huang的干燥接近成熟的果實，前者藥材名為大花吳萸，后二者為小花吳萸，三者均含有藥用成分吳茱萸堿、吳茱萸次堿。吳茱萸主產(chǎn)于貴州、廣西、湖南、浙江、四川等地，8～11月果實尚未開裂時采收。曬干或低溫烘干。其用途始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，味苦性溫，有小毒，歸肝、脾、胃、腎經(jīng)，為溫中散寒、疏肝止痛的常用藥，

主要用于厥陰頭痛、寒腹疝痛、寒濕腳氣、經(jīng)行腹痛、脘腹?jié)q痛、嘔吐吞酸、五更泄瀉、高血壓等癥[1]。吳茱萸堿和吳茱萸次堿是吳茱萸的主要活性成分,其含量直接影響藥材的質(zhì)量。近年來,有關(guān)吳茱萸中生物堿含量的研究工作較多[2-8]，為研究其含堿量對本身產(chǎn)生的經(jīng)濟效益，筆者選取我國吳茱萸主要產(chǎn)區(qū)，主要是對湖南、廣西、浙江、江西、湖北等幾個傳統(tǒng)產(chǎn)區(qū)進(jìn)行實地調(diào)查、取樣分析，研究了其主要藥用成分，分布區(qū)域，栽培發(fā)展規(guī)劃。

1 試驗地環(huán)境條件及材料

1.1 產(chǎn)區(qū)環(huán)境條件

通過實地采樣進(jìn)行檢測，主要有吳茱萸、石虎、疏毛吳茱萸等三種材料。由于環(huán)境條件的關(guān)系，檢測來自不同產(chǎn)地和不同種類的吳茱萸藥材的生物堿含量。吳茱萸喜陽光充足、溫暖、濕潤的氣候條件，適宜在低海拔、質(zhì)地疏地肥沃、排水良好的酸性壤土中生長。要求年均氣溫16℃以上，全年≥10℃積溫5 300℃，年降雨量1 200 mm ～1 400 mm，全年相對濕度78%，全年日照時數(shù)1 158 h，無霜期305 d。植株每年11～12月開始落葉，次年3月上旬返青發(fā)芽。一般定植后第3年開始結(jié)果?；ㄆ?～8月，果期9～10月。植株壽命一般5～20年，最長者達(dá)30～40年。采樣地點即吳茱萸產(chǎn)地，采樣地點的環(huán)境條件均符合國家環(huán)境質(zhì)量的要求。

1.2 試驗材料

采樣地點主要有湖南、貴州、廣西、江西、浙江等省區(qū)。吳茱萸的種類包括吳茱萸、石虎及疏毛吳茱萸。湖南產(chǎn)區(qū)的吳茱萸主要分布在懷化中方縣和新晃縣、岳陽汩羅縣、常德津市市。主栽種類是石虎和疏毛吳茱萸。貴州產(chǎn)區(qū)，貴州產(chǎn)區(qū)的吳茱萸資源主要分布銅仁、遵義及黔東南等地，銅仁地區(qū)的印紅、玉屏等縣，以石虎和疏毛吳茱萸為主。廣西產(chǎn)區(qū) 廣西桂林灌陽縣、靈川縣以及百色、賀州等地。廣西產(chǎn)區(qū)主要種植石虎和疏毛吳茱萸，種江西產(chǎn)區(qū) 樟樹市、新干縣、進(jìn)賢縣等縣市，主栽種類是石虎，有少量的吳茱萸種植。浙江產(chǎn)區(qū) 浙江產(chǎn)區(qū)分布在建德、平陽、磐安等地，主栽種類為吳茱萸。

2 試驗方法

對照品溶液制備：精密稱取吳茱萸堿、吳茱萸次堿對照品各 0.1 mg, 置 10 mL 容量瓶中，用乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻作為儲備液（C=10 μg/mL），放于 4℃冰箱備用。

色譜條件：Agilent Eclipse c18色譜柱（4.6 mm×250 mm,10 μm），對吳茱萸、疏毛吳茱萸、石虎中的吳茱萸堿和吳茱萸次堿進(jìn)行高效液相色譜法含量測定，流速為1.0 mL·min-1，柱溫 30℃；檢查波長為260 nm。色譜分析方法參見文獻(xiàn)[7-8]。

3 結(jié)果與分析

經(jīng)隨機人工采集，利用峰面積歸一化法定量。數(shù)據(jù)處理采用EXCEL2003進(jìn)行分析。

3.1 吳茱萸種類樣本分析

測定3個種類吳茱萸中的吳茱萸堿、吳茱萸次堿，結(jié)果如表1所示。

表1 吳茱萸樣品分析Table 1 Contents of evodiamine and rutaecarpine in different Evodia rutaecarpa species

通過對湖南、貴州、廣西、江西、浙江等24個產(chǎn)區(qū)的吳茱萸揮發(fā)堿提取量的分析。吳茱萸主要成分為生物堿和檸檬苦素[1]，生物堿中主要成分為吳茱萸堿和吳茱萸次堿。24個地區(qū)的吳茱萸測出含堿量的結(jié)果如上表1。

3.2 不同種類及產(chǎn)地含堿率方差分析

3個種類吳茱萸產(chǎn)區(qū)的種類含堿量的方差分析結(jié)果見下表2，由表2可知，通過計算，F(xiàn)=（12.07 10.284 17.795）＞ F0.05，故拒絕H0，也就是說3種吳茱萸的總堿及吳茱萸堿與吳茱萸次堿的含堿量的差異達(dá)到了顯著差異，那么我們在選擇栽種吳茱萸時有必要考慮種類間的差異，選擇含量較高的吳茱萸種類栽種。

由表2可知，不同產(chǎn)地吳茱萸的含堿量方差分析表明，其總自由度fa1=fa2=fa3=82，通過計算，F(xiàn)=（12.07 10.284 17.795） ＞ F0.05， 故 拒 絕 H0，也就是說不同產(chǎn)地吳茱萸的含堿量的差異達(dá)到了0.05顯著差異。經(jīng)方差分析顯示，多重比較（q檢驗）可知，江西吉安市、江西樟樹市和浙江建安市的吳茱萸含堿率之間的差異未達(dá)到極顯著水平，湖南新晃縣及江西樟樹市兩地的石虎也未達(dá)到極顯著水平。

表2 不同種類含堿率的方差分析Table 2 Variance analysis of alkalinity in different Evodia rutaecarpa species

以上結(jié)果說明，（1）不同種類在吳茱萸主產(chǎn)區(qū)的分析有顯著差異，吳茱萸種類的有效成分最高；（2）不同產(chǎn)區(qū)由于生態(tài)環(huán)境條件的差異較大的區(qū)域，吳茱萸含堿率有一定的差異，在環(huán)境條件接近或相似的區(qū)域，吳茱萸含堿率差異不顯著。

3.3 三種吳茱萸不同產(chǎn)區(qū)含堿率差異

本研究分別對3種吳茱萸的吳茱萸堿、吳茱萸次堿及總堿含量進(jìn)行分析。

3.3.1 不同產(chǎn)地吳茱萸含堿量分析

對9個產(chǎn)區(qū)：1湖南中方縣、2湖南津市保河堤、3湖南津市市、4廣西灌陽縣、5江西吉安市、6江西樟樹市7、貴州余慶縣、8浙江建安市、9四川內(nèi)江縣等9個產(chǎn)區(qū)（圖1中9個阿拉伯?dāng)?shù)字代表該9個產(chǎn)區(qū)）的吳茱萸進(jìn)行吳茱萸堿與吳茱萸次堿進(jìn)行分析，結(jié)果見圖1。

圖1 吳茱萸的吳茱萸堿及吳茱萸次堿產(chǎn)地對照分析Fig. 1 Comparative analysis of evodiamine and rutaecarpine of E. rutoecarpa in different production areas

圖1 說明：以吳茱萸堿、吳茱萸次堿及總堿含量為質(zhì)量指標(biāo)來看：廣西灌陽縣種植吳茱萸含堿量最高,為2.846%，明顯高于其他產(chǎn)區(qū)；其次湖南津市為1.260%；第三為貴州余慶縣總堿量為1.210%；第四為湖南中方縣總堿為1.210%，該4個區(qū)的總堿含量明顯高于其他產(chǎn)區(qū)。吳茱萸堿和吳茱萸次堿的含量無線性交叉，也基本上按總堿分布規(guī)律。

3.3.2 疏毛吳茱萸不同產(chǎn)地含堿量分析

研究對7個產(chǎn)區(qū)的疏毛吳茱萸進(jìn)行吳茱萸堿、吳茱萸次堿進(jìn)行分析，圖中7個阿拉伯?dāng)?shù)字代表以下7個產(chǎn)區(qū)：1湖南中方縣2湖南津市保河堤3湖南瀏陽市大圍山4湖南湘陰縣5湖南津市市6貴州余慶縣7浙江建安市，分析結(jié)果如圖2所示。

圖2 疏毛吳茱萸的吳茱萸堿及次堿產(chǎn)地對照分析Fig.2 Comparative analysis of evodiamine and rutaecarpine of E. rutaecarpa var. bodinieri in production areas

圖2 說明：疏毛吳茱萸以吳茱萸堿和吳茱萸次堿總含量為質(zhì)量指標(biāo)來看：種植吳茱萸含堿量為0.33%，明顯高于其他產(chǎn)區(qū)；其次湖南津市市為0.27%；第三為湖南津市保河堤總堿量為0.266%。該3個產(chǎn)區(qū)的總堿含量明顯高于其他產(chǎn)區(qū)。但是，吳茱萸堿和吳茱萸次堿的含量沒有按其分布規(guī)律，湖南津市市和湖南津市保河堤的吳茱萸堿明顯高于其它產(chǎn)區(qū)，而湖南湘陰縣的吳茱萸次堿含量明顯高于其它產(chǎn)區(qū)。

3.3.3 石虎不同產(chǎn)地含堿量分析

研究對8個石虎產(chǎn)區(qū)的進(jìn)行吳茱萸堿與吳茱萸次堿進(jìn)行分析，圖中8個阿拉伯?dāng)?shù)字代表以下8個產(chǎn)區(qū)：1湖南新晃縣2湖南中方縣3湖南津市保河堤4湖南津市市5廣西灌陽縣6江西樟樹市7貴州江口市8浙江建安市。

圖3 石虎吳茱萸堿及次堿產(chǎn)地對照分析Fig. 3 Comparative analysis of evodiamine and rutaecarpine of E. rutaecarpa var. officinalis in production areas

圖3說明：石虎以吳茱萸堿和吳茱萸次堿總含量為質(zhì)量指標(biāo)來看：廣西灌陽縣種植吳茱萸含堿量為1.34%，明顯高于其他產(chǎn)區(qū)；其次湖南中方縣總堿含量為1.275%；明顯高于其它產(chǎn)區(qū)。吳茱萸堿和吳茱萸次堿的含量無線性交叉，含量也基本上按總堿含量的分布規(guī)律。

4 討論與建議

（1）不同種類在吳茱萸主產(chǎn)區(qū)的分析有顯著差異，吳茱萸種類的有效成分最高,其次石虎,疏毛吳茱萸的總堿含量最低；不同產(chǎn)區(qū)由于生態(tài)環(huán)境條件的差異較大的區(qū)域，吳茱萸含堿率有一定的差異，在環(huán)境條件接近或相似的區(qū)域，吳茱萸含堿率差異不顯著。

(2) 以吳茱萸種類的主要藥用成分來看，廣西灌陽縣種植吳茱萸含堿量為2.846%，明顯高于其他產(chǎn)區(qū)；其次湖南津市市為1.260%；第三為貴州余慶縣總堿量為1.210%；第四為湖南中方縣總堿為1.210%，該4個區(qū)的總堿含量明顯高于其他產(chǎn)區(qū)。吳茱萸堿和吳茱萸次堿的含量無線性交叉，也基本上按總堿分布規(guī)律。

（3）疏毛吳茱萸種類以吳茱萸堿和吳茱萸次堿總含量為質(zhì)量指標(biāo)來看：種植吳茱萸含堿量為0.33%，明顯高于其他產(chǎn)區(qū)；其次湖南津市市為0.27%；第三為湖南津市保河堤總堿量為0.266%。該3個產(chǎn)區(qū)的總堿含量明顯高于其他產(chǎn)區(qū)。但是，吳茱萸堿和吳茱萸次堿的含量沒有按其分布規(guī)律，湖南津市市和湖南津市保河堤的吳茱萸堿明顯高于其它產(chǎn)區(qū)，而湖南湘陰縣的吳茱萸次堿含量明顯高于其它產(chǎn)區(qū)。

（4）石虎以吳茱萸堿和吳茱萸次堿總含量為質(zhì)量指標(biāo)來看：廣西灌陽縣種植吳茱萸含堿量為1.34%，明顯高于其他產(chǎn)區(qū)；其次湖南中方縣總堿含量為1.275%；明顯高于其它產(chǎn)區(qū)。吳茱萸堿和吳茱萸次堿的含量無線性交叉，含量也基本上按總堿含量的分布規(guī)律。

（5）由于吳茱萸種類及產(chǎn)地間的含堿量呈明顯差異，在目前已有的野生狀態(tài)的資源要保護(hù)的同時，要科學(xué)規(guī)劃吳茱萸產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，建議在發(fā)展吳茱萸的種類上應(yīng)重點考慮發(fā)展吳茱萸，從產(chǎn)地的規(guī)劃上應(yīng)重點考慮廣西桂北和湖南的湘西南及貴州的黔東南地區(qū)。

致謝：本研究在分析方面得到湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)曾建國教授的幫助，在此表示感謝。

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Studies on effective components of three kinds of Evodia rutoecarpa in different producing areas

WANG Cheng-nan, WANG Hong-juan, LI Ping, LIN Ling-qiu
(School of Forestry, Central South University of Forestry and Technology, Changsha 410004, Hunan, China)

The main medicinal components (evodiamine, rutaecarpine etc.) in Evodia rutoecarpa, E. rutaecarpa var. officinalis and E.rutaecarpa var. bodinieri in Chinese main production areas were studied. The results reveal that E. rutaecarpa had the highest effective component of E. rutaecarpa and 2 varieties, the alkali contents in E. rutaecarpa and E. rutaecarpa var. officinalis were 2.846% and 1.340% respectively in Guanyang county, Guangxi autonomous, China, which were more higher than that in other producing areas; E.rutaecarpa var. bodinieri growing in Yuqing county, Guanzhou province had the highest alkali content (0.33%), which was significantly lower than that in E. rutaecarpa and E. rutaecarpa var. officinalis. It is suggested that E. rutaecarpa should be vigorously developed, and in the aspect of producing area planning, the northern Guangxi, southwest of Hunan and southeast of Guizhou should be emphatically take into account.

Evodia rutoecarpa; E. rutaecarpa var. officinalis; E. rutaecarpa var. bodinieri; alkaloids; effective components; different producing areas

S792; S789.5

A

1673-923X(2012)08-0086-04

2012-03-25

國家林業(yè)局項目“吳茱萸栽培技術(shù)規(guī)程”（2011-LY-134）

王承南（1956—），男,湖南長沙人，教授.主要從事經(jīng)濟林栽培育種的教學(xué)與科研工作；E-mail:wchengnan@163.com

[本文編校：邱德勇]