毛細管氣相色譜法測定海參口服液中甲基汞的含量

魯 剛，宗萬里

（威海市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗所，山東威海 264209）

汞在自然界中，能被動植物富集，經(jīng)生物轉(zhuǎn)化作用而轉(zhuǎn)變?yōu)槎拘愿蟮募谆ㄟ^食物鏈進入人體后，對機體產(chǎn)生毒性作用。甲基汞是一種脂溶性化合物，易經(jīng)消化道、呼吸道、皮膚黏膜吸收；進入血液后，除與血漿蛋白結(jié)合外，大部分與血紅蛋白結(jié)合，由血液逐漸向器官分布；在體內(nèi)代謝成汞離子而發(fā)揮毒性作用。由于甲基汞與巰基的高親和性和有效的腸肝循環(huán)使甲基汞不易排出，而在體內(nèi)蓄積。甲基汞中毒是以神經(jīng)系統(tǒng)為主的全身性損害[1]。我國現(xiàn)行國家標準GB 2762—2005《食品中污染物限量》中對海參口服液中甲基汞的殘留量有一定要求[2]，因此對海參口服液中的甲基汞的快速準確檢測方法的研究十分必要。測定甲基汞的檢測方法有氣相色譜法[3-8]、液相色譜串聯(lián)原子熒光光度計法[9-10]、液相色譜串聯(lián)電感耦合等離子體質(zhì)譜法[11]。本文以弱性毛細管柱DB-5分離測定中海參口服液中甲基汞的殘留量，前處理簡單，所使用試劑對實驗人員的健康危害小，靈敏度高，甲基汞出峰時間快，是一種準確、可靠、快速的分析方法。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

氣相色譜儀：GC2010型，帶電子捕獲檢測器（ECD），日本島津公司；分析天平：FC204型，精度為0.1mg，上海精密科學儀器有限公司；氯化甲基汞標準品：10.0μg/mL，2mL/瓶，環(huán)境保護部標準樣品研究所；毛細管色譜柱：DB-5(弱極性，30m×0.53 mm×0.5μm)，J&W Scientific；氯化銅：分析純，天津市標準科技有限公司；甲苯：分析純，煙臺市雙雙化工有限公司；濃鹽酸:優(yōu)級純，天津市耀華化學試劑有限責任公司；氯化銅溶液（42.5g/L）：稱取8.5克氯化銅加水定容至200mL。鹽酸溶液（1+4）：量取100mL濃鹽酸，加水400mL，混勻。

1.2 色譜參考條件

色譜柱：毛細管色譜柱D B-5 (弱極性，30m×0.53 mm×0.5μm)；載氣（氮氣）流速為10mL/min，恒定流速控制；WBI進樣口溫度:200℃；柱溫：100℃保持2min，以5℃/min升至230℃； 檢測器溫度：300℃，尾吹50mL/min，檢測器電流：0.5nA；進樣方式:直接注入；進樣量：1μL。

1.3 溶液配制

1.3.1 標準溶液的配制

分別精密量取0.1、0.2、0.4、0.5、1.0mL的甲基汞標準溶液（10.0μg/mL）至10.0mL容量瓶中,用甲苯稀釋至刻度,得甲基汞濃度為0.1μg/mL 、0.2μg /mL、0.4μg /mL 、0.5μg /mL、1.0μg /mL的系列混合標準溶液。每個濃度取1μL直接注入氣相色譜儀進行分析。

1.3.2 供試品溶液的配制(樣品前處理)

準確稱取5.0g海參口服液樣品加入到30mL具賽刻度管中，加入2mL氯化銅溶液（42.5g/L），充分振蕩搖勻，再加入5mL鹽酸溶液(1+4)置于30mL具塞刻度試管中，充分振蕩搖勻、靜置30分鐘后，再加入甲苯5mL，充分振蕩搖勻，靜置分層后，吸取上層提取液1μL注進氣相色譜儀進行分析。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜圖

在1.2色譜條件下, 得到氯化甲基汞標準樣品、空白樣品、空白加標樣品的色譜圖, 如圖1所示, 氯化甲基汞保留時間分別為1.7分鐘左右，峰型尖銳，出峰時間快，有效縮短分析時間。

2.2 樣品前處理

Cu2+能與組織中結(jié)合的甲基汞交換，在樣品中加入氯化銅與鹽酸溶液，可以把樣品中的甲基汞轉(zhuǎn)移到鹽酸溶液中，最后再加入甲苯能把氯化甲基汞萃取到甲苯溶液之中[8]。本文在甲苯與苯常用的兩種有機溶劑之間選擇甲苯是因為甲苯的毒性相對苯要小的多。

2.3 標準曲線和最低檢出限

在實驗條件下，以峰面積y為縱坐標、質(zhì)量濃度c/(μg/ml)為橫坐標繪制標準曲線，得線性方程，以基線噪聲3倍峰面積對應(yīng)的質(zhì)量濃度為檢出限(RSN=3)[12]，回歸方程、相關(guān)系數(shù)及檢出限見表1。

表1 回歸曲線的基本參數(shù)Table 1 Regression equation

2.4 精密度和加標回收試驗

圖1 各樣品的色譜圖Fig.1 Chromatography of each sample

取不含甲基汞的海參口服液空白樣品進行加標回收試驗，向5.0g海參口服液樣品中分別添加10.0μg/mL甲基汞標準溶液0.05 mL、0.1mL、0.25mL即樣品中甲基汞含量為0.1mg／kg 、0.2mg／kg、0.5mg／kg。按上述提取步驟進行提取，重復(fù)6次。按1.2色譜條件進行測定，精密度和回收率計算結(jié)果列于表2。

表2 按照本方法樣品添加回收和精密度實驗（n=6）Table 2 Spiked recovery and precision by this method(n=6)

3 結(jié)語

本實驗采用大口徑弱極性毛細管氣相色譜法對海參口服液中甲基汞的含量進行測定, 并進行了方法學考察。實驗結(jié)果表明本方法前處理簡單、出峰時間快, 靈敏度高，方法可行, 結(jié)果準確。適用于海參口服液中甲基汞的檢測，在實際的檢測工作中具有一定的參考價值。

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