色素上皮衍生因子與氧化應(yīng)激

李瑞霞(綜述)，陳海冰(審校)

(上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院內(nèi)分泌代謝科，上海市糖尿病研究所，上海市糖尿病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海市糖尿病臨床醫(yī)學(xué)中心，上海 200233)

色素上皮衍生因子與氧化應(yīng)激

李瑞霞△(綜述)，陳海冰※(審校)

(上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院內(nèi)分泌代謝科，上海市糖尿病研究所，上海市糖尿病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海市糖尿病臨床醫(yī)學(xué)中心，上海 200233)

色素上皮衍生因子(PEDF)是一種糖蛋白，屬于絲氨酸蛋白酶抑制劑超家族，它首次從人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的條件培養(yǎng)基中被純化出來，具有很強(qiáng)的神經(jīng)分化活性。之后被發(fā)現(xiàn)有抗氧化應(yīng)激，抗血管新生，抗炎，抗血小板活化、聚集抑制血栓形成，抗細(xì)胞凋亡，營(yíng)養(yǎng)保護(hù)神經(jīng)等作用，并且它的一系列性能無一例外均涉及其抗氧化應(yīng)激性能?，F(xiàn)將PEDF與氧化應(yīng)激的相互作用以及作用機(jī)制進(jìn)行綜述。

色素上皮衍生因子;氧化應(yīng)激;炎癥;凋亡;血栓形成

色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor，PEDF)作為一種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子而首次被發(fā)現(xiàn)，是1989年Tombran-Tink等［1］從胎兒視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)液中分離純化的一種可溶性糖蛋白，屬于絲氨酸蛋白酶抑制劑超家族。在人類，其染色體定位于17p13.3［2］。它是一種有效的內(nèi)生性多功能因子，近年來又發(fā)現(xiàn)其具有抗血小板活化聚集、抑制血栓形成性能。眾多研究證明PEDF可以通過其抗氧化應(yīng)激作用及與此相關(guān)的抗血管新生，抗炎，抗血小板活化、聚集等作用達(dá)到對(duì)機(jī)體的保護(hù)作用?，F(xiàn)對(duì)PEDF的不同保護(hù)作用及其作用機(jī)制進(jìn)行綜述。

1 PEDF的抗新生血管、抑制血管通透性增高作用

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是一種有效的促血管生長(zhǎng)因子，調(diào)節(jié)血管的發(fā)生、發(fā)展，在細(xì)胞的增殖、遷移、增加通透性方面有重要作用［3］。PEDF能夠有效地抑制血管新生，它與VEGF比值的失衡和新生血管的形成密切相關(guān)。Zheng等［4］研究發(fā)現(xiàn)培哚普利(血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑)可通過降低線粒體活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)的生成而降低牛視網(wǎng)膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞中VEGF/PEDF的比值(降低VEGF，升高PEDF)，ROS降低的原因是培哚普利上調(diào)過氧化物酶體增生物激活受體γ(peroxisome proliferator-activated receptor-γ，PPAR-γ)及解耦聯(lián)蛋白 2(uncoupling protein-2，UCP-2)的表達(dá)而降低線粒體膜電位;PEDF可誘導(dǎo)高糖及正糖條件下牛視網(wǎng)膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞中線粒體PPAR-γ及UCP-2的表達(dá)，進(jìn)而降低膜電位，抑制線粒體ROS的生成，并且經(jīng)不可逆性 PPAR-γ抑制劑GW9662處理后，PEDF上調(diào)UCP-2 的性能被阻斷［5］。由此可見，氧化應(yīng)激狀態(tài)也是血管新生的使動(dòng)因素，而PEDF可以抑制線粒ROS的生成從而緩解氧化應(yīng)激，以致抑制血管新生。其作用靶點(diǎn)在線粒體PPAR-γ及UCP-2。

此外，Yamagishi等［6］研究發(fā)現(xiàn)給正常的大鼠靜脈注射糖基化終產(chǎn)物(advanced glycosylation end product，AGE)不僅可通過刺激VEGF的表達(dá)增加視網(wǎng)膜血管的通透性，還可降低視網(wǎng)膜PEDF的水平;給予PEDF干預(yù)治療，發(fā)現(xiàn)PEDF可抑制AGE誘導(dǎo)的VEGF介導(dǎo)的血管通透性增加。研究發(fā)現(xiàn)［6］，PEDF一方面可通過下調(diào)p22phox和gp91phox(NADPH氧化酶的膜組成部分)的mRNA水平來抑制NADPH氧化酶的活性，降低AGE暴露下的內(nèi)皮細(xì)胞的ROS生成;另一方面PEDF還通過降低RAGE的表達(dá)而抑制AGE與其受體的作用，降低ROS生成，從而抑制血管新生及血管通透性的增高。此研究并沒有明確PEDF抑制RAGE基因表達(dá)的分子機(jī)制。然而，近來有報(bào)道［7-9］，PPAR-γ 激動(dòng)劑可下調(diào) AGE 誘導(dǎo)的RAGE基因表達(dá)，因?yàn)?PEDF可活化多種細(xì)胞中PPAR-γ信號(hào)通路。

2 PEDF的抗炎作用

近年來的研究已揭示AGE及其受體系統(tǒng)可在多種細(xì)胞中誘導(dǎo)氧化應(yīng)激以及炎性反應(yīng)［10-11］。在人腎小球系膜細(xì)胞的體外實(shí)驗(yàn)中Ide等［12］發(fā)現(xiàn)AGE可顯著地刺激系膜細(xì)胞內(nèi)ROS的生成，活化核因子κB(nuclear factor κB，NF-κB)，上調(diào)炎性因子、單核細(xì)胞趨化蛋白1、血管細(xì)胞黏附分子1的RNA水平，而PEDF及NF-κB抑制劑可完全阻抑這一效應(yīng)，由此可見，PEDF通過抑制AGE誘導(dǎo)的ROS的產(chǎn)生而抑制NF-κB的活化，最終阻抑炎性因子單核細(xì)胞趨化蛋白1、血管細(xì)胞黏附分子1的轉(zhuǎn)錄表達(dá)，以達(dá)到抗炎效果。Yamagishi等［13］研究發(fā)現(xiàn)，PEDF可抑制內(nèi)皮細(xì)胞中腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)的白細(xì)胞介素6基因的表達(dá)，并且更進(jìn)一步證實(shí)，其作用是通過抑制NADPH氧化酶介導(dǎo)的ROS的生成進(jìn)而阻滯NF-κB活化實(shí)現(xiàn)的。其中PEDF對(duì)NADPH氧化酶抑制的作用靶點(diǎn)在Rac-1(NADPH氧化酶膜組成成分)。腫瘤壞死因子α、白細(xì)胞介素6是經(jīng)典的炎性因子，事實(shí)上ROS通過NF-κB的激活調(diào)節(jié)很多基因的表達(dá)，包括很多炎性因子都可被PEDF抑制。

另外，Zheng等［5］研究指出，PEDF通過線粒體途徑及NADPH氧化酶途徑抑制高糖誘導(dǎo)ROS的生成，阻抑Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活子3(STAT3)信號(hào)通路的活化，從而部分下調(diào)VEGF的表達(dá)，現(xiàn)經(jīng)發(fā)現(xiàn)STAT3與天然及適應(yīng)性免疫反應(yīng)密切相關(guān)，所以這也是PEDF通過其抗氧化應(yīng)激性調(diào)節(jié)炎性反應(yīng)的一個(gè)重要途徑。

3 PEDF的抑制血栓形成作用

Takenaka等［14］曾用結(jié)扎大鼠頸動(dòng)脈的方法誘導(dǎo)血栓形成的模型并研究PEDF的抗血栓形成作用：①PEDF以劑量依賴形式抑制結(jié)扎大鼠頸動(dòng)脈的血栓形成。②PEDF抑制P選擇蛋白(血塊中血小板活化的標(biāo)志物)的表達(dá)。③PEDF抑制血塊中過氧化物的形成以及NADPH氧化酶的活化。④PEDF以劑量依賴式阻斷膠原誘導(dǎo)的ROS的形成、P選擇蛋白的表達(dá)以及血小板的聚集。由此可見，PEDF的抑制血栓形成性能可能是通過其抗氧化應(yīng)激抑制血小板的活化聚集而實(shí)現(xiàn)的，并且其作用靶點(diǎn)在NADPH氧化酶。血小板功能的改變與微血栓的形成有著緊密的聯(lián)系，可能在糖尿病血管并發(fā)癥的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮重要作用，并且越來越多的研究證實(shí)氧化應(yīng)激的形成與血小板的活化聚集關(guān)系緊密，所以在2009年通過誘導(dǎo)糖尿病大鼠模型進(jìn)一步對(duì)PEDF的抗血栓形成進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)［15］：①PEDF或者磷酸吡多醛(AGE形成的抑制劑)可通過抑制NADPH氧化酶源性過氧化物的形成而抑制血小板P選擇蛋白的表達(dá)與聚集，從而使糖尿病大鼠尾靜脈出血時(shí)間縮短。②靜脈給予正常大鼠注射AGE可模擬糖尿病對(duì)血小板活化及出血時(shí)間的影響，并且也可被外源性PEDF阻斷。由此更加肯定了PEDF實(shí)際上是通過其抗氧化應(yīng)激性抑制NADPH活化，進(jìn)而減少ROS的生成實(shí)現(xiàn)其抗血小板聚集及血栓形成作用的。此外，經(jīng)典的促炎因子(腫瘤壞死因子α、白細(xì)胞介素6)都是血栓形成的誘導(dǎo)因素，PEDF可通過其抗氧化應(yīng)激功能抑制其基因表達(dá)，從而間接達(dá)到抑制血栓形成的目的。

4 PEDF的抗凋亡作用

Amano等［16］研究視網(wǎng)膜周細(xì)胞中 PEDF對(duì)氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡、功能損傷的保護(hù)作用，采用高糖和H2O2誘導(dǎo)視網(wǎng)膜周細(xì)胞氧化應(yīng)激模型發(fā)現(xiàn)：①PEDF或者抗氧化劑可顯著地阻滯高糖誘導(dǎo)的周細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制。②一定劑量的PEDF可完全阻滯H2O2誘導(dǎo)的周細(xì)胞生存率的降低及其DNA合成的減少。③H2O2可增加周細(xì)胞內(nèi)促凋亡分子Bax的mRNA水平，降低其抗凋亡分子Bcl-2 mRNA水平，PEDF完全的阻滯了H2O2誘導(dǎo)的這兩種分子mRNA的變化，維持其在周細(xì)胞內(nèi)的正常水平，并且單獨(dú)應(yīng)用PEDF、Bcl-2及Bax mRNA水平無變化。④caspase-3負(fù)責(zé)細(xì)胞組件的斷裂、崩解，在細(xì)胞凋亡中發(fā)揮重要的作用。在高糖或者H2O2誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激狀態(tài)下，在視網(wǎng)膜周細(xì)胞中其活化明顯增加，此效應(yīng)可被PEDF完全阻滯。

由此可見，氧化應(yīng)激狀態(tài)下，細(xì)胞內(nèi)促凋亡分子Bax mRNA水平被上調(diào)，抗凋亡分子Bcl-2 mRNA水平下調(diào)，進(jìn)而活化caspase-3，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。PEDF通過其抗氧化應(yīng)激性能抑制這一過程。但是，PEDF完成這一性能的具體機(jī)制并沒有明確。谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)是哺乳動(dòng)物中過氧化物解毒的主要抗氧化酶，其有一定的抗氧化作用。Amano等［16］試探性地研究GPx與PEDF抗氧化應(yīng)激的內(nèi)在聯(lián)系，發(fā)現(xiàn)PEDF可顯著上調(diào)高糖或者H2O2暴露下周細(xì)胞中GPx mRNA的水平并增強(qiáng)其活性。同樣劑量下，PEDF單獨(dú)使用并不影響周細(xì)胞中GPx表達(dá)及其活性。因此可以明確，PEDF通過上調(diào)GPx mRNA的水平并增加其活性而上調(diào)抗氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的Bax mRNA水平、降低Bcl-2 mRNA水平，活化及其下游的caspase-3，最終達(dá)到抗凋亡的作用。近來研究發(fā)現(xiàn)，PEDF在氧化應(yīng)激狀態(tài)下還可通過上調(diào)過氧化物歧化酶和谷胱甘肽的水平達(dá)到抗氧化應(yīng)激的效果［17］。

另外，細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase 1/2，ERK1/2)通路也是PEDF抗凋亡的另一途徑。Tsao等［18］研究發(fā)現(xiàn)，PEDF以劑量依賴形式抑制H2O2誘導(dǎo)的RPE細(xì)胞凋亡損傷;PEDF刺激ERK1/2蛋白的磷酸化使其活化;當(dāng)用PD98059(ERK1/2抑制劑)抑制PEDF對(duì)ERK1/2的磷酸化作用時(shí)，PEDF的保護(hù)作用明顯減弱。由此可見，PEDF可通過誘導(dǎo)ERK1/2的活化而對(duì)氧化應(yīng)激狀態(tài)下的RPE發(fā)揮保護(hù)作用。

5 PEDF的營(yíng)養(yǎng)保護(hù)神經(jīng)作用

作為一個(gè)多功能的糖蛋白，PEDF的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)作用已被發(fā)現(xiàn)［19］。氧化應(yīng)激在帕金森病等神經(jīng)變性疾病中扮演的使動(dòng)角色也日益受到關(guān)注［20-22］?，F(xiàn)已有研究顯示［23］，PEDF可以對(duì)抗魚藤酮及6羥基多巴胺的神經(jīng)毒性作用從而保護(hù)多巴胺神經(jīng)元，這兩種藥物是通過氧化應(yīng)激的機(jī)制發(fā)揮毒性作用的，證明了PEDF可部分通過其抗氧化應(yīng)激性能發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。然而，其具體作用靶點(diǎn)尚不明確。Sanchez等［24］通過皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞的體外實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步研究顯示，過氧化氫處理皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞時(shí)引起劑量依賴式的內(nèi)源性PEDF降低，非活化形式caspase-3的降低及活化形式caspase-3的升高;預(yù)先給予PEDF孵育可明顯抑制H2O2誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)下調(diào);ERK1/2抑制劑可以顯著阻抑H2O2誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激狀態(tài)下PEDF對(duì)神經(jīng)元的保護(hù)作用，并且在PEDF存在的條件下細(xì)胞內(nèi)的抗凋亡蛋白Bcl-2顯著升高，而ERK1/2抑制劑可顯著削弱這種作用。因此PEDF通過ERK1/2途徑穩(wěn)定氧化應(yīng)激狀態(tài)下Bcl-2的水平以抑制caspase-3的活化，從而抑制氧化應(yīng)激引起的神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡，完成其神經(jīng)保護(hù)作用。這與上述PEDF的抗凋亡途徑是吻合的。

6 小結(jié)

PEDF是一種有效的內(nèi)源性多功能因子，具有抗氧化應(yīng)激，抗血管新生、保護(hù)血管、抑制其在外界刺激下血管通透性的增高、抗炎、抗血小板活化、聚集抑制血栓形成、抗細(xì)胞凋亡等作用，而抗氧化應(yīng)激作用是其眾多性能的作用樞紐。在錯(cuò)綜復(fù)雜的作用機(jī)制中，PEDF主要通過 NADPH氧化酶(p22phox/Nox4、gp91phox/Nox2 及 Rac-1、ERK1/2 通路、JAK2/STAT3通路)和線粒體(PPARγ及UCP-2)途徑抑制ROS的生成減弱氧化應(yīng)激的狀態(tài)，從起始階段對(duì)抗氧化應(yīng)激誘導(dǎo)一系列機(jī)體損傷反應(yīng)。在氧化應(yīng)激過程中，PEDF可通過抑制氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的一些損傷因子的表達(dá)而對(duì)抗其損傷作用。PEDF還可以通過上調(diào)谷胱甘肽過氧化物酶、過氧化物岐化酶、谷胱甘肽等緩解氧化應(yīng)激環(huán)境?？傊?，PEDF可從起始、過程、終末3個(gè)階段對(duì)抗氧化應(yīng)激及其引起的炎癥等一系列損傷反應(yīng)。

［1］Tombran-Tink J，Johnson LV.Neuronal differentiation of retinoblastoma cells induced by medium conditioned by human RPE cells［J］.Invest Ophthalmol Vis Sci，1989，30(8)：1700-1707.

［2］Patricia BS.Focus on molecules：pigment epithelium-derived factor(PEDF)［J］.Exp Eye Res，2006，82(5)：739-740.

［3］Ferrara N.Vascular endothelial growth factor［J］.Arterioscler thromb Vasc Biol，2009，29(6)：789-791.

［4］Zheng Z，Chen H，Ke G，et al.Protective effect of perindopril on diabetic retinopathy is associated with decreased vascular endothelial growth factor-to-pigment epithelium-derived factor ratio：involvement of a mitochondria-reactive oxygen species pathway［J］.Diabetes，2009，58(4)：954-964.

［5］Zheng Z，Chen H，Zhao H，et al.Inhibition of JAK2/STAT3-mediated VEGF upregulation under high glucose conditions by PEDF through a mitochondrial ROS pathway in vitro［J］.Invest Ophthalmol Vis Sci，2010，51(1)：64-71.

［6］Yamagishi S，Nakamura K，Matsui T，et al.Pigment epithelium-derived factor inhibits advanced glycation end product-induced retinal vascular hyperpermeability by blocking reactive oxygen species-mediated vascular endothelial growth factor expression［J］.J Biol Chem，2006，281(29)：20213-20220.

［7］Matsui T，Yamagishi S，Takeuchi M，et al.Nifedipine inhibits advanced glycation end products(AGEs)and their receptor(RAGE)interaction-mediated proximal tubular cell injury via peroxisome proliferator-activated receptor-gamma activation［J］.Biochem Biophys Res Commun，2010，398(2)：326-330.

［8］Ho TC，Chen SL，Yang YC，et al.PEDF induces p53-mediated apoptosis through PPAR gamma signaling in human umbilical vein endothelial cells［J］.Cardiovasc Res，2007，76(2)：213-223.

［9］Ho TC，Yang YC，Chen SL，et al.Pigment epithelium-derived factor induces THP-1 macrophage apoptosis and necrosis by the induction of the peroxisome proliferator-activated receptor gamma［J］.Mol Immunol，2008，45(4)：898-909.

［10］Yamagishi S，Imaizumi T.Diabetic vascular complications：pathophysiology，biochemical basis and potential therapeutic strategy［J］.Curr Pharm Des，2005，11(18)：2279-2299.

［11］Yamagishi S，F(xiàn)ukami K，Ueda S，et al.Molecular mechanisms of diabetic nephropathy and its therapeutic intervention［J］.Curr Drug Targets，2007，8(8)：952-959.

［12］Ide Y，Matsui T，Ishibashi Y，et al.Pigment epithelium-derived factor inhibits advanced glycation end product-elicited mesangial cell damage by blocking NF-kappaB activation［J］.Microvasc Res，2010，80(2)：227-232.

［13］Yamagishi S，Inagaki Y，Nakamura K，et al.Pigment epitheliumderived factor inhibits TNF-alpha-induced interleukin-6 expression in endothelial cells by suppressing NADPH oxidase-mediated reactive oxygen species generation［J］.J Mol Cell Cardiol，2004，37(2)：497-506.

［14］Takenaka K，Yamagishi S，Matsui T，et al.Pigment epithelium-derived factor(PEDF)administration inhibits occlusive thrombus formation in rats：a possible participation of reduced intraplatelet PEDF in thrombosis of acute coronary syndromes［J］.Atherosclerosis，2008，197(1)：25-33.

［15］Yamagishi S，Matsui T，Takenaka K，et al.Pigment epithelium-derived factor(PEDF)prevents platelet activation and aggregation in diabetic rats by blocking deleterious effects of advanced glycation end products(AGEs)［J］.Diabetes Metab Res Rev，2009，25(3)：266-271.

［16］Amano S，Yamagishi S，Inagaki Y，et al.Pigment epithelium-derived factor inhibits oxidative stress-induced apoptosis and dysfunction of cultured retinal pericytes［J］.Microvasc Res，2005，69(1/2)：45-55.

［17］Banumathi E，Sheikpranbabu S，Haribalaganesh R，et al.PEDF prevents reactive oxygen species generation and retinal endothelial cell damage at high glucose levels［J］.Exp Eye Res，2010，90(1)：89-96.

［18］Tsao YP，Ho TC，Chen SL，et al.Pigment epithelium-derived factor inhibits oxidative stress-induced cell death by activation of extracellular signal-regulated kinases in cultured retinal pigment epithelial cells［J］.Life Sci，2006，79(6)：545-550.

［19］Yabe T，Sanagi T，Yamada H.The neuroprotective role of PEDF：implication for the therapy of neurological disorders［J］.Curr Mol Med，2010，10(3)：259-266.

［20］Taupin P.A dual activity of ROS and oxidative stress on adult neurogenesis and Alzheimer's disease［J］.Cent Nerv Syst Agents Med Chem，2010，10(1)：16-21.

［21］Wang X，Michaelis EK.Selective neuronal vulnerability to oxidative stress in the brain［J］.Front Aging Neurosci，2010，2：12.

［22］Eghwrudjakpor PO，Allison AB.Oxidative stress following traumatic brain injury：enhancement of endogenous antioxidant defense systems and the promise of improved outcome［J］.Niger J Med，2010，19(1)：14-21.

［23］Falk T，Zhang S，Sherman SJ.Pigment epithelium derived factor(PEDF)is neuroprotective in two in vitro models of Parkinson's disease［J］.Neurosci Lett，2009，458(2)：49-52.

［24］Sanchez A，Tripathy D，Yin X，et al.Pigment epithelium-derived factor(PEDF)protects cortical neurons in vitro from oxidant injury by activation of extracellular signal-regulated kinase(ERK)1/2 and induction of Bcl-2［J］.Neurosci Res，2012，72(1)：1-8.

Pigment Epithelium-derived Factor and Oxidative Stress

LI Rui-xia，CHEN Hai-bing.(Department of Endocrinology＆Metabolism，Shanghai Jiaotong University Affiliated Sixth People's Hospital，Shanghai Institute for Diabetes，Shanghai Key Laboratory of Diabetes，Shanghai Clinical Medical Center of Diabetes，Shanghai200233，China)

Pigment epithelium-derived factor(PEDF)is a glycoprotein which belongs to the super-family of serine protease inhibitors，first purified from the conditioned media of human retinal pigment epithelial cells as a factor which possessing potent neuronal differentiating activity.After that，some other properties of PEDF had been found successively including anti-oxidation，anti-angiogenesis，anti-inflammation，anti-platelet activation，inhibiting platelet aggregation，anti-apoptosis，and neurotrophic function.And all of these properties of PEDF are almost invariably involved the performance of its anti-oxidative stress.Here is to summarize the interaction between PEDF and oxidative stress and its specific mechanisms.

Pigment epithelium-derived factor;Oxidative stress;Inflammation;Apoptosis;Thrombosis

R58;R34

A

1006-2084(2012)13-1968-03

國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(30871204)

2011-12-06

2012-01-30 編輯：伊姍