牙源性干細(xì)胞的研究進(jìn)展

李 琨，安 瑩 綜述;陳發(fā)明，金 巖 審校

(第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院，陜西西安710032)

隨著近代細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的發(fā)展和間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells，MSC)的發(fā)現(xiàn)，為多種組織缺損修復(fù)再生治療策略提供了機(jī)遇。組織再生依賴于缺損區(qū)域細(xì)胞、生物材料和信號分子的共同作用，其中足夠的可供新組織形成或再生的干細(xì)胞、與缺損組織性能和成分相似的支架材料，以及促進(jìn)細(xì)胞增殖、分化和歸巢的誘導(dǎo)因子等都至關(guān)重要［1］。近幾年，醫(yī)學(xué)領(lǐng)域已經(jīng)開始探索利用合適的干細(xì)胞去實現(xiàn)人體組織和器官的修復(fù)和重建，并逐漸聚焦于解決臨床問題［2］。再生醫(yī)學(xué)已經(jīng)成為醫(yī)學(xué)研究的一個重要分支，在將來的臨床治療中必將發(fā)揮越來越重要的作用，而干細(xì)胞具有自我更新的能力和多向分化的潛能［3］，是再生醫(yī)學(xué)研究的重點和核心［4］。胚胎干細(xì)胞(embryonic stem cells，ESCs)是多能干細(xì)胞，可以分化為多種成體細(xì)胞［5］，但因受倫理和法律的限制而在其研究和應(yīng)用中存在爭議［6］。MSCs是一種多能成體干細(xì)胞，最初從人的骨髓中分離得來，隨后又在成人和胎兒的其他組織中發(fā)現(xiàn)［7］。成體干細(xì)胞(adult stem cells)通常依據(jù)其所處部位不同而命名為不同種類的干細(xì)胞，例如骨髓干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、牙源性干細(xì)胞等。近年來研究表明:來自同一種組織的干細(xì)胞也可以產(chǎn)生完全不同的其他組織細(xì)胞［3］。成體干細(xì)胞與ESCs不同可以用于臨床疾病的治療，如心肌缺血、組織缺損修復(fù)、糖尿病和帕金森病等［7］。目前研究表明，在腦、脊髓、外周血、血管、骨骼肌、上皮、視網(wǎng)膜、肝臟、胰腺等3個胚層來源的組織中都發(fā)現(xiàn)了成體干細(xì)胞，包括牙齒組織。近年來，牙源性干細(xì)胞作為組織工程學(xué)的候選細(xì)胞，越來越引起廣泛的重視和關(guān)注［8］，其不僅可用于口腔組織的再生，也適用于非口腔組織如骨和神經(jīng)等組織的再生［8-9］。本文就常見的牙源性干細(xì)胞的研究進(jìn)展及其在組織工程學(xué)中的應(yīng)用等作一綜述。

目前研究發(fā)現(xiàn)在口腔的不同組織中均分離出干細(xì)胞［10］。Gronthos等［11］(2000)報道了從人的牙髓組織中分離并培養(yǎng)干細(xì)胞的方法，這些干細(xì)胞可集落狀生長、體外可誘導(dǎo)分化為成牙本質(zhì)樣細(xì)胞并形成具有牙本質(zhì)樣結(jié)構(gòu)的組織，從而首次提出了牙髓干細(xì)胞(dental pulp stem cells，DPSCs)的概念。隨后，其他組織的牙源性干細(xì)胞也陸續(xù)被成功分離，包括牙周膜干細(xì)胞(periodontal ligament stem cells，PDLSCs)、乳牙牙髓干細(xì)胞(stem cells from human exfoliated deciduous teeth，SHED)、根尖乳頭干細(xì)胞(stem cells from the apical papilla，SCAP)和牙囊干細(xì)胞(dental follicle stem cells，DFSCs)等。目前認(rèn)為:牙源性干細(xì)胞均為存在于口腔組織中的未分化間充質(zhì)干細(xì)胞，具有自我增殖和多向分化的能力，與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cell，BMMSCs)相比，具有更強的多向分化潛能和更強的誘導(dǎo)成脂、成骨、成神經(jīng)組織等能力［7］。以下就牙源性干細(xì)胞的生物學(xué)特性、細(xì)胞表型、分化能力、臨床轉(zhuǎn)化等方面的研究概況進(jìn)行分述。

1 牙髓干細(xì)胞(DPSCs)

Gronthos［10］等(2000)利用酶消化法，將人健康的第三磨牙牙髓制成單細(xì)胞懸液進(jìn)行培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)牙髓細(xì)胞在體外培養(yǎng)時可自我更新并高度增殖和多向分化;將其移植到免疫缺陷的小鼠體內(nèi)能產(chǎn)生牙本質(zhì)-牙髓復(fù)合體，而且在一定因素誘導(dǎo)條件下，還能分化為多種細(xì)胞，與干細(xì)胞的定義相符。于是作者推測，牙髓中可能含有干細(xì)胞，并首次提出了牙髓干細(xì)胞(DPSCs)的概念［11］。

1.1 DPSCs的來源和細(xì)胞表型

Gronthos等［11］(2000)最初推測DPSCs可能來源于血管周圍的微環(huán)境;此后shi等［12］(2001)也發(fā)現(xiàn)DPSCs表達(dá)STRO-1和CD146兩種早期間充質(zhì)干細(xì)胞的表面標(biāo)志，認(rèn)為DPSCs與血管組織密切相關(guān)。我國學(xué)者通過對根髓和冠髓進(jìn)行比較時發(fā)現(xiàn):DPSCs存在于全部牙髓之中，在根髓中的密度更高［13］。但關(guān)于DPSCs的確切來源目前還不甚清楚，因而對其進(jìn)行確切定位、分離鑒定的研究仍在進(jìn)行。

關(guān)于DPSCs的細(xì)胞表型，組織化學(xué)染色顯示DPSCs除表達(dá)波形絲蛋白、成纖維細(xì)胞生長因子等成纖維細(xì)胞的標(biāo)志外，還表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)標(biāo)志如內(nèi)皮細(xì)胞粘附因子VCAM-1、第Ⅷ因子以及平滑肌的標(biāo)志如平滑肌肌動蛋白和骨標(biāo)志如Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原、骨橋素等;不表達(dá)軟骨標(biāo)志Ⅱ型膠原和上皮細(xì)胞的標(biāo)志EMA［14］。DPSCs細(xì)胞表型的多樣性和表達(dá)強弱的差異表明:DPSCs克隆株的不均一性，可能是由處于分化和發(fā)育不同階段的細(xì)胞組成。DPSCs表達(dá)平滑肌和內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)志，提示其有可能來源于發(fā)育的血管［15］。而DPSCs不表達(dá)成牙本質(zhì)細(xì)胞特征性蛋白DSP、DMP，則表明DPSCs尚處于未分化狀態(tài)［10］。

1.2 DPSCs的生物學(xué)特性

1.2.1 DPSCs有高度增殖和自我更新能力

Gronthos等［11］(2000)在體外培養(yǎng)的的第一代DPSCs和BMSSCs中加入Brdu后檢測細(xì)胞的增生率發(fā)現(xiàn):DPSCs的增生率高于BMSSCs，DPSCs約有72%陽性細(xì)胞，而BMSSCs約有46%陽性細(xì)胞;同時還發(fā)現(xiàn)DPSCs的克隆形成率為0.22%～0.70%，遠(yuǎn)高于BMSSCs的0.024%～0.031%。

1.2.2 DPSCs的多向分化能力

DPSCs具有成體干細(xì)胞的可塑性(plasticity)，能夠分化為成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等多種不同細(xì)胞［16］。成骨誘導(dǎo)分化實驗顯示:體外礦化誘導(dǎo)DPSCs 40 d后，骨涎蛋白(bone sialoprotein，BSP)和骨鈣素(osteocalcin，OCN)免疫熒光染色陽性，可見骨小梁結(jié)構(gòu);隨后將此骨樣組織回植入免疫缺陷小鼠背部皮下，4周后形成發(fā)育良好的板狀骨，表明DPSCs在特定礦化條件下有成骨能力［17］。成脂誘導(dǎo)分化實驗顯示:用含0.5mmol/L異丁基甲基黃嘌呤、0.5(nlU)mmol/L氫化可的松、60(nlU)mmol/L消炎痛的成骨成脂誘導(dǎo)液對DPSCs進(jìn)行成脂誘導(dǎo)5周后，可見油紅O染色陽性的脂滴;進(jìn)一步RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)，脂肪細(xì)胞所具有的兩種特異性轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)上調(diào)，表明體外培養(yǎng)的DPSCs具有向脂肪細(xì)胞分化的潛能［18］。成神經(jīng)誘導(dǎo)分化實驗顯示:DPSCs在mRNA和蛋白質(zhì)水平分別表達(dá)神經(jīng)巢蛋白(nestin)和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acid protein，GFAP)［18］;DPSCs能為多巴胺能的神經(jīng)元提供營養(yǎng)支持，而且在體外可分化為神經(jīng)元，表明DPSCs具有向神經(jīng)細(xì)胞分化的潛能［19］。此外，有研究證實:DPSCs經(jīng)條件培養(yǎng)基的誘導(dǎo)還可分化為肌細(xì)胞、軟骨細(xì)胞等，進(jìn)一步豐富了DPSCs可分化的細(xì)胞譜系［20］。

生長因子具有促進(jìn)或抑制細(xì)胞分裂增殖、遷移和基因表達(dá)的作用。在成年牙髓組織再生、損傷修復(fù)過程中，存在于髓周牙本質(zhì)中的生長因子、特殊的牙髓胞外基質(zhì)分子以及由修復(fù)中的牙髓細(xì)胞合成的生長因子和胞外基質(zhì)分子等細(xì)胞因子都對DPSCs的增殖分化起著重要作用，共同形成DPSCs生存、增殖和分化的微環(huán)境。如:轉(zhuǎn)移生長因子家族(TGF-β superfamily)的主要成員TGF-β1可以促進(jìn)DPSCs堿性磷酸酶的表達(dá)，參與修復(fù)性牙本質(zhì)的形成;骨形成蛋白(bonemorphogenetic protein 2，BMP 2)能夠刺激DPSCs分化表達(dá)DSPP的成牙本質(zhì)細(xì)胞［21］。牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白-1(dentin matrixprotein 1，DMP-1)也可促進(jìn)DPSCs的增殖，對DPSCs堿性磷酸酶活性的促進(jìn)作用呈濃度依賴性。另有許多研究結(jié)果表明:胰島素樣生長因子Ⅰ、腫瘤壞死因子α、表皮生長因子(EGF)等細(xì)胞生長因子亦參與DPSCs向成牙本質(zhì)細(xì)胞分化過程的調(diào)節(jié)［22］。

1.3 DPSCs的應(yīng)用展望

隨著DPSCs研究的進(jìn)一步深入和組織工程學(xué)的進(jìn)一步發(fā)展，DPSCs為促進(jìn)牙髓組織再生、牙體修復(fù)、自體牙的再造、甚至骨組織的修復(fù)重建等開辟廣闊的前景。但牙髓干細(xì)胞的研究目前仍面臨很多問題，如DPSCs特異性標(biāo)志尚不明確，在牙髓組織中的確切定位還不明了，要實現(xiàn)精確的定位分離純化還有一定困難;以及DPSCs數(shù)量少、易老化、體外培養(yǎng)擴(kuò)增難度大、周期長;而且對于干細(xì)胞的分裂、分化的具體調(diào)節(jié)機(jī)制尚不清楚，相關(guān)的信號分子的作用也還需進(jìn)一步研究探索等。這些問題均說明:DPSCs還有很大的研究空間，要把DPSCs應(yīng)用于臨床還需要細(xì)胞研究的進(jìn)一步完善以及組織工程學(xué)技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展。

2 牙周膜干細(xì)胞(PDLSCs)

PDLSCs是近來發(fā)現(xiàn)的來源于牙周韌帶組織的成體干細(xì)胞。Byoung-Moo等［23］(2004)用酶消化法將健康成年人的牙周膜組織制成單細(xì)胞懸液進(jìn)行體外培養(yǎng)，通過克隆篩選和磁珠分離得到了具有形成細(xì)胞克隆能力和高度增殖能力的細(xì)胞，從而提出了牙周膜干細(xì)胞(PDLSCs)的概念。正常情況下，牙周膜細(xì)胞可通過增殖和分化使其本身以及與之相連的牙骨質(zhì)和牙槽骨處于不斷更新和改建的狀態(tài)。而當(dāng)受到疾病或外界刺激時，則可通過牙周膜中干細(xì)胞的不斷增殖和分化使組織再生［24］。

2.1 PDLSCs的來源和細(xì)胞表型

研究發(fā)現(xiàn):牙周組織發(fā)育完成后存在于牙周膜中的未分化的間充質(zhì)細(xì)胞具有自我更新和多向分化等特點，不少學(xué)者認(rèn)為牙周膜是一個能自我更新的系統(tǒng)，存在原始的能產(chǎn)生不同表型的干細(xì)胞或稱為牙周膜前體細(xì)胞，這些能導(dǎo)致牙周組織再生的前體細(xì)胞主要來源于牙周膜和牙槽骨［25］。

關(guān)于PDLSCs的細(xì)胞表型，免疫組化結(jié)果顯示PDLSC表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)志物，而這些標(biāo)記物是鑒定PDLSC的基礎(chǔ)［26］。包括:間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)志物:SRTO-1、CD146/MUC18;腱細(xì)胞標(biāo)志物:堿性螺旋-環(huán)-螺旋轉(zhuǎn)錄因子(Scleraxis);骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志物:CD90、CD29、CD44、CD166、CD105、CD13等［27］。

2.2 PDLSCs的功能研究

PDLSCs具有成體干細(xì)胞的基本特性，即具有自我更新和多向分化的潛能，可產(chǎn)生不同種類的具有特定表型和功能的成熟細(xì)胞，以維持牙周膜功能的穩(wěn)定，發(fā)揮生理性細(xì)胞更新和修復(fù)組織損傷的作用。具有自我更新能力，可以通過分裂維持自身群體的穩(wěn)定，并能在體外克隆性生長［28］;具有不定向分化潛能，在不同的生長因子微環(huán)境條件下，可以誘導(dǎo)向脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、成牙骨質(zhì)細(xì)胞、軟骨細(xì)胞和神經(jīng)元樣細(xì)胞分化，還可形成牙骨質(zhì)、牙周膜和牙槽骨等，是牙周組織再生最直接、最可靠的種子細(xì)胞，也是牙周缺損細(xì)胞治療和基因治療重要的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)［29］。

2.3 PDLSCs的展望

利用干細(xì)胞使病變破壞的牙周組織再生已研究多年［30］，PDLSC在體內(nèi)能使破壞的牙周組織形成新的附著，是牙周組織工程學(xué)和牙周組織再生術(shù)的重大進(jìn)步，為以干細(xì)胞為基礎(chǔ)的組織工程提供了基礎(chǔ)，在牙周生理功能維持、病理損傷修復(fù)中的重要作用和牙周再生方面存在的巨大潛能，必將為口腔基礎(chǔ)和臨床研究打開新的突破口，具有重要的臨床意義和廣闊的應(yīng)用前景。但因其存在來源有限，培養(yǎng)分離純化擴(kuò)增過程復(fù)雜、周期較長等實際問題，要應(yīng)用于臨床治療中仍需進(jìn)一步研究。

3 乳牙牙髓干細(xì)胞(SHED)

Miura等［31］(2003)研究發(fā)現(xiàn)，正常脫落的乳牙牙髓中的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)會表現(xiàn)出成纖維細(xì)胞樣生長，其增殖率和群體倍增數(shù)均比骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(BMMSC)、DPSCs高，于是首次提出了SHED的概念。這種細(xì)胞在一定的體外誘導(dǎo)條件下具有成骨、成牙本質(zhì)，以及分化為其他非牙源性間質(zhì)細(xì)胞的能力。

3.1 SHED的來源和細(xì)胞表型

對SHED進(jìn)行表型研究和蛋白組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，其可表達(dá)多種間充質(zhì)干細(xì)胞的特異性分子標(biāo)志，包括CD73、CD90、CD105、CD146、STRO-1，但是不表達(dá)造血干細(xì)胞的標(biāo)志，如CD14、CD34、CD45等，提示SHED很可能來源于間充質(zhì)［31-32］。Miura等［31］將體外擴(kuò)增的SHED移植到免疫缺陷小鼠體內(nèi)，觀察到類牙本質(zhì)樣結(jié)構(gòu)形成，進(jìn)一步免疫組化檢測顯示其牙本質(zhì)特異性蛋白—牙本質(zhì)涎磷蛋白(DSPP)陽性，表明其可以分化為成牙本質(zhì)細(xì)胞。盡管Miura等證明SHED在體內(nèi)無法向成骨細(xì)胞分化，但Shen YY等［33］(2010)發(fā)現(xiàn)SHED在體外培養(yǎng)過程中可以表達(dá)成骨細(xì)胞的標(biāo)志，如RUNX-2、OCN、BSP，表明SHED在體外可以分化為成骨細(xì)胞;同時Miura等［31］還發(fā)現(xiàn)SHED經(jīng)神經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)后表達(dá)多種神經(jīng)細(xì)胞的標(biāo)志，如巢蛋白、GAD、βⅢ-tubulin、NeuN、GFAP、NFM、CNPase等;經(jīng)成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)，SHED呈現(xiàn)出油紅-O染色陽性的特征，并且半定量RT-PCR檢測顯示過氧化物酶體增殖子活化受體-γ2和脂蛋白脂酶這兩種脂肪細(xì)胞特異性的轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)上調(diào)，提示SHED可以分化為脂肪細(xì)胞［33］。

3.2 SHED的功能研究

相關(guān)研究表明，SHED具有多向分化功能，Miura等［31］通過將體外擴(kuò)增的SHED移植到免疫缺陷的動物體內(nèi)，可觀察到類牙本質(zhì)樣結(jié)構(gòu);將SHED接種于支架材料并植入免疫缺陷小鼠皮下，可觀察到牙髓樣結(jié)構(gòu)形成［34］;將SHED與人類牙齒切片復(fù)合后，在體外培養(yǎng)或是植入免疫缺陷小鼠皮下，均表達(dá)成牙本質(zhì)細(xì)胞分化的標(biāo)志(DSPP，DMP-1，MEPE)［35］。

有研究發(fā)現(xiàn):SHED移植到裸鼠體內(nèi)后，雖不能直接分化形成成骨細(xì)胞，但可以誘導(dǎo)宿主細(xì)胞分化為成骨細(xì)胞，提示SHED具有骨誘導(dǎo)功能，而這種功能是DPSCs(甚至其他牙源性干細(xì)胞)所不具備的［34］。雖然一系列實驗表明SHED在體內(nèi)只能誘導(dǎo)宿主細(xì)胞分化為成骨細(xì)胞［36］，而其自身無法分化為成骨細(xì)胞，但在體外培養(yǎng)過程中卻可以分化為成骨細(xì)胞，究竟是何種原因?qū)е碌倪@一有趣現(xiàn)象，至今尚未得到解答。此外，在一定的誘導(dǎo)條件下SHED還可以分化為多巴胺能神經(jīng)元樣細(xì)胞;可以向血管內(nèi)皮細(xì)胞分化，同時形成可與宿主脈管系統(tǒng)相吻合的微血管;可以在一定條件下被誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化為人工誘導(dǎo)的多能干細(xì)胞(induced pluripotent stem cells，iPS)［7］;SHED可能還具有參與機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)等功能［37］。

3.3 SHED展望

SHED自被成功分離以來已被證實具有較強的增殖能力和多向分化的潛能，尤其具有顯著的誘導(dǎo)成骨能力，并且可能參與機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)過程，具有廣闊的研究空間。但還有許多具體分子作用機(jī)制仍不明確，尚需大量試驗研究去探索。

4 根尖乳頭干細(xì)胞(SCAP)

SCAP存在于未完全發(fā)育成形的恒牙根尖周組織中，是一種具有高度增生、自我更新能力和多向分化潛能的成體干細(xì)胞。Sonoyama等［38］(2006)研究發(fā)現(xiàn):雖然根尖周牙乳頭組織中的血管和細(xì)胞成分均較牙髓組織少，但在根髓組織與根尖周牙乳頭組織交界處有一個非常明顯的細(xì)胞富集區(qū)，而且根尖周乳頭狀組織陽性表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞表面分子STRO-1，從而推測該區(qū)域可能存在干細(xì)胞或前體細(xì)胞。為了證實這種假定的細(xì)胞，Abe等［39］(2007)從人年輕第三磨牙根末端分離根尖周牙乳頭，并采用酶消化法從中分離出細(xì)胞進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)這種細(xì)胞在低密度下培養(yǎng)時，能夠像其他間充質(zhì)干細(xì)胞一樣形成貼壁生長的克隆原細(xì)胞聚集，并具有成骨、成牙本質(zhì)和成脂等多向分化潛能，因而作者將這種細(xì)胞命名為SCAP。SCAP是牙根發(fā)育時成牙本質(zhì)細(xì)胞的重要來源，在牙根的形成和發(fā)育中起著重要的作用，具有強于DPSCs的群體倍增能力以及增殖率、端粒酶活性和細(xì)胞遷移率，是一種極具潛力的成體干細(xì)胞［40］。SCAP獨特的功能和特點決定了其不僅僅是一種研究牙根發(fā)育時成牙本質(zhì)細(xì)胞分化機(jī)制的體外細(xì)胞，而且是一種很好的牙組織工程種子細(xì)胞，可用于牙髓、牙本質(zhì)的再生和生物學(xué)牙根的再生，具有極其良好且廣闊的臨床應(yīng)用前景。

5 牙囊干細(xì)胞(DFPC)

牙囊(dental follicle，DF)是包繞發(fā)育牙齒的疏松結(jié)締組織［41］，其組織來源于外胚間充質(zhì)，是牙骨質(zhì)、牙槽骨和牙周膜的起源組織，含有干細(xì)胞和形成牙周組織的前體細(xì)胞亞群，在一定誘導(dǎo)條件下進(jìn)行體外培養(yǎng)時可分化為成骨樣或成牙骨質(zhì)樣細(xì)胞［42］。DFPC可從特定的組織中分離、培養(yǎng)得到，這類干細(xì)胞的特點使其在組織工程學(xué)研究中具有很大的潛能，可應(yīng)用于牙周和骨的再生研究。Honda等［41］(2010)從小牛牙根形成階段的恒切牙牙胚中分離出牛DF細(xì)胞，進(jìn)行了一系列試驗，證明DF細(xì)胞中含有牙周膜細(xì)胞及牙骨質(zhì)細(xì)胞的前體細(xì)胞;Luan等［43］(2006)在形態(tài)、增殖能力、礦化特征等方面進(jìn)行了試驗，證實DF前體細(xì)胞具有異質(zhì)性。上述研究結(jié)果表明:牙囊中存在具有多向分化潛能的干細(xì)胞，在一定誘導(dǎo)條件下可誘導(dǎo)分化為成牙骨質(zhì)細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和神經(jīng)元樣細(xì)胞。因此，在牙周組織再生的研究中，DF細(xì)胞被視為可能的種子細(xì)胞，研究前景值得關(guān)注。

6 小結(jié)

盡管牙源性干細(xì)胞的研究和臨床應(yīng)用雖已取得了許多突破，但其仍處于起步階段，若要成功應(yīng)用于臨床，實現(xiàn)真正意義上的組織再生，仍有許多理論機(jī)制尚待研究，許多技術(shù)操作問題尚待克服。然而，因牙源性干細(xì)胞本身具備其他組織工程種子細(xì)胞所無法比擬的優(yōu)點，如:自我更新能力強，多向分化潛能大，易于獲得，自體移植免疫排異反應(yīng)小，不存在倫理上的爭議等，使其在牙齒組織工程學(xué)的應(yīng)用上具有廣闊的前景。有理由相信，隨著牙源性干細(xì)胞研究的不斷深入和組織工程技術(shù)的不斷發(fā)展，將給醫(yī)學(xué)的理論研究和臨床應(yīng)用帶來革命性的進(jìn)展。

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