益生菌與酶制劑對黃羽肉雞血液生化指標和免疫性能影響的協(xié)同效應研究

林 謙 戴求仲 賓石玉 蔣桂韜 張建華 王向榮 張 旭

(1.湖南省畜牧獸醫(yī)研究所，湖南長沙 410131；2.廣西師范大學生命科學學院，廣西桂林 541004；3.湖南農(nóng)業(yè)大學動物科學技術學院，湖南長沙 410128)

在畜牧養(yǎng)殖業(yè)迅猛發(fā)展的今天，抗生素在畜禽飼料生產(chǎn)中大量使用已成為常態(tài)，有數(shù)據(jù)顯示，全球抗生素總產(chǎn)量的一半左右被用于畜牧養(yǎng)殖行業(yè)。但抗生素使用所產(chǎn)生的在畜產(chǎn)品中殘留對人類健康的危害、過量排泄對環(huán)境的污染、長期使用導致耐藥菌株產(chǎn)生等問題也成為人們日益關注的焦點。很多國家已經(jīng)禁止或限制了抗生素在飼料中的應用，無抗畜禽產(chǎn)品將成為發(fā)展主流。目前，復合酶制劑及益生菌制劑作為安全、綠色的飼料添加劑引起了極大關注，本試驗即研究復合酶制劑、益生菌制劑和抗生素對黃羽肉雞血液生化指標、激素指標及免疫功能的影響，考察復合酶制劑與益生菌制劑合用是否具有協(xié)同效應及其替代抗生素飼料添加劑的可行性，尋求提高黃羽肉雞生產(chǎn)性能及改善其品質的最佳添加劑組合，為促進黃羽肉雞的科學養(yǎng)殖和提高該產(chǎn)業(yè)的綜合效益提供參考和技術支持。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

益生菌制劑為復合芽孢桿菌制劑，含枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌，由武漢市雄峰科技有限公司提供，有效活菌含量約為5×1010CFU/g。

酶制劑為固體復合酶，由上海尤特爾生化有限公司提供,主要成分為酸性纖維素酶(酶活≥2 000 IU/g)、木聚糖酶（酶活≥30 000 IU/g）。

抗生素采用抗敵素（硫酸粘桿菌素），由廣州興達動物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，純度為10%。

1.2 試驗動物與分組

選擇675羽遺傳背景相同、同批次、發(fā)育正常的5日齡健康雌性黃羽肉雞，隨機分為5個處理，每個處理設5個重復，每個重復為27羽雞。各組雞初始體重無明顯差異（P＞0.05）。試驗在湖南省畜牧獸醫(yī)研究所試驗雞場內進行，整個試驗期按試雞日齡分為5～28日齡和29～53日齡兩個階段，全期共48 d。

采用單因素隨機設計試驗,具體分組方案見表1。其中Ⅰ組飼喂基礎日糧,作為空白對照組,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組分別在基礎日糧中添加25 g/t益生菌制劑、150 g/t復合酶制劑、150 g/t復合酶制劑+25 g/t益生菌制劑以及300 g/t抗敵素。試雞前期采用粉料飼喂，后期采用顆粒料飼喂。

表1 試驗設計

1.3 試驗基礎日糧與營養(yǎng)水平

試驗基礎日糧參照NRC(1994)和《NY/T 33—2004雞飼養(yǎng)標準》中的黃羽肉雞營養(yǎng)需要，選用玉米、豆粕、次粉、油糠、菜粕等原料配制而成，由湖南光大牧業(yè)科技有限公司飼料廠加工生產(chǎn)。其組成及營養(yǎng)水平見表2。

1.4 飼養(yǎng)管理

試雞采用網(wǎng)上平養(yǎng)，人工持續(xù)光照，育雛時采用紅外燈供暖，保持正常溫度，第1周33～34℃，第2周27～31℃，其后視具體氣溫情況供暖；雞舍自然通風，定期打掃雞舍衛(wèi)生，相對濕度保持在55%～65%；自由飲水和采食（計量不限量），按常規(guī)免疫。

1.5 測試指標與方法

1.5.1 血液相關激素及生理生化指標

在未提前停飼的情況下于肉雞54日齡時上午8：00從每處理隨機抽取10羽肉雞（每重復2羽），翼靜脈采血8 ml左右，注入10 ml離心管傾斜放置，讓血液自然凝固。在血凝0.5 h后以3 000 r/min離心15 min分離血清，收集離心管上層血清，于-20℃下保存，以測定相關生理生化指標。

表2 試驗基礎日糧組成及營養(yǎng)水平（風干基礎）

血清中葡萄糖(GLU)含量采用葡萄糖氧化酶法測定,甘油三酯(TG)含量采用甘油氧化酶法測定,乳酸(LAC)含量采用乳酸脫氫酶法測定,總膽固醇(CHO)含量采用膽固醇氧化酶法測定,尿素氮(BUN)含量采用尿素酶法測定,天門冬氨酸轉氨酶(AST)含量采用酶動力學法測定,所有測定都在CX4 Pro全自動生化分析儀(美國,Beckman Coulter公司生產(chǎn))上進行；生長激素(GH)和胰島素(Ins)含量均采用放射性同位素免疫法(RIΑ),在 γ-放免儀上測定。

1.5.2 免疫功能

1.5.2.1 免疫器官指數(shù)

于54日齡早晨，從每處理隨機選取10只接近該處理平均體重的黃羽肉雞（每重復2羽），稱活重后屠宰，取其胸腺、脾臟、法氏囊稱重，并計算試雞胸腺、脾臟和法氏囊的免疫器官指數(shù)。

1.5.2.2 血液免疫指標

在步驟1.5.1獲得的試雞血清樣本基礎上，采用雙縮脲法及溴甲酚綠法在CX4 Pro全自動生化分析儀（美國，Beckman Coulter公司生產(chǎn)）上分別檢測血清中總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）含量，然后用測得的總蛋白（TP）及白蛋白（ALB）值計算血清球蛋白（GLO）含量，即血清球蛋白含量=總蛋白（TP）含量-白蛋白(ALB)含量，并計算分析白球比(A/G)=白蛋白（ALB）/球蛋白(GLO)。同時，血液中游離三碘甲腺原氨酸(FT3)、游離甲狀腺素(FT4)均采用放射性同位素免疫法(RIΑ)，在γ-放免儀上測定，并計算游離三碘甲腺原氨酸/游離甲狀腺素（FT3/FT4）值。

1.6 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用Excel 2003軟件進行初步處理后,采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析(ANOVA),若組間差異顯著,則采用Duncan's法進行多重比較,顯著水平為0.05。試驗結果以“平均數(shù)±標準差”表示。

2 結果與分析

2.1 益生菌與酶制劑及其組合添加對黃羽肉雞血液生化指標、激素指標的影響（見表3）

表3 各處理對黃羽肉雞血清生化指標的影響

由表3可見,抗生素(Ⅴ)組以及益生菌與酶制劑組合添加(Ⅳ)組較空白對照組(Ⅰ)組及酶制劑(Ⅲ)組或益生菌(Ⅱ)組有提高血清中葡萄糖(GLU)含量的趨勢,但各組間無明顯差異(P＞0.05)。試驗Ⅱ～Ⅴ組較空白對照Ⅰ組血清甘油三酯(TG)濃度均有不同程度下降,下降幅度分別為 18.96%(P＞0.05)、43.13%(P＜0.05)、39.81%(P＜0.05)、63.51%(P＜0.01)；同時,添加抗生素的Ⅴ組比單獨添加益生菌的Ⅱ組能明顯降低血清TG的含量(P＜0.05),Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組間血清TG含量差異不顯著(P＞0.05)。益生菌與酶制劑單獨添加的Ⅱ、Ⅲ組較組合添加的Ⅳ組和抗生素Ⅴ組分別極顯著(P＜0.01)與顯著(P＜0.05)地降低血清膽固醇(CHO)濃度,且與空白對照Ⅰ組相比血清CHO含量也有所下降(P＞0.05)；而Ⅳ、Ⅴ組間血清CHO含量差異不顯著(P＞0.05),并且均顯著高于空白對照Ⅰ組(P＜0.05)。Ⅳ組降低了血清中乳酸(LAC)的含量,較空白對照Ⅰ組下降了32.97%(P＜0.05),Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組間血清LAC含量差異不顯著(P＞0.05),較空白對照Ⅰ組也均有所降低。血清尿素氮(BUN)濃度各組間無明顯差異(P＞0.05),但單獨添加酶制劑以及酶與益生菌制劑的組合使用有降低血清BUN濃度的趨勢。各組間，Ⅳ組血清天門冬氨酸轉氨酶(AST)含量最高，且較空白對照Ⅰ組高出18.47%，差異顯著(P＜0.05),其余各組間血清AST含量無明顯差異(P＞0.05)。

對于血清生長激素(GH)含量，Ⅴ組最低，但Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組間血清GH含量差異不顯著（P＞0.05）；同時，空白對照Ⅰ組與Ⅱ組兩者間血液GH含量差異也不明顯（P＞0.05），但均極顯著高于Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組血清GH的含量（P＜0.01）。而對于血清胰島素（Ins）含量而言，Ⅰ、Ⅱ和Ⅴ組接近，且高于Ⅲ、Ⅳ兩組，但各組間胰島素含量差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 益生菌與酶制劑及其協(xié)同效應對黃羽肉雞免疫性能的影響(見表4)

表4的結果顯示,Ⅲ組的試雞胸腺指數(shù)最高,但各組間胸腺指數(shù)差異不顯著(P＞0.05)。Ⅲ組及Ⅴ組的法氏囊指數(shù)較其它組高，但各組間法氏囊指數(shù)也無明顯差異(P＞0.05)。脾臟指數(shù)酶制劑Ⅲ組最高,較空白對照Ⅰ組和Ⅴ組分別提高11.64%(P＞0.05)和26.35%(P＞0.05),Ⅳ組的脾臟指數(shù)也很高，且較Ⅴ組提高了13.77%(P＞0.05)，但各組間脾臟指數(shù)差異不明顯(P＞0.05)。

血清總蛋白（TP）含量以Ⅲ組最低，且顯著低于Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ 3 組（P＜0.05），Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ組間血清 TP含量差異不顯著（P＞0.05）。血清白蛋白（ALB）含量以Ⅳ組及Ⅴ組較高，且分別顯著（P＜0.05）和極顯著（P＜0.01）高于Ⅲ組，而Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ組間血清白蛋白含量無顯著差異（P＞0.05）。血清球蛋白（GLO）含量以空白對照Ⅰ組及Ⅳ組最高，且均顯著高于Ⅲ組，Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ組間血清球蛋白含量差異不顯著（P＞0.05）。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組間白球比較接近，但以Ⅲ組最高，且顯著高于空白對照Ⅰ組（P＜0.05）。

游離三碘甲腺原氨酸（FT3）濃度以Ⅱ組最高，空白對照Ⅰ組次之，但均顯著高于Ⅴ組(P＜0.05),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組間血清FT3濃度無顯著差異(P＞0.05)。血清游離甲狀腺素（FT4）含量Ⅴ組最高，為 6.85 fmol/ml，Ⅳ組和Ⅲ組次之，分別為6.60 fmol/ml和6.19 fmol/ml,3組間血清FT4含量無顯著差異(P＞0.05),同時,Ⅴ組FT4含量顯著高于Ⅰ、Ⅱ兩組(P＜0.05)。FT3/FT4空白對照Ⅰ組與Ⅱ組一致，且最高，分別極顯著高于Ⅴ組（P＜0.01）及顯著高于Ⅳ組（P＜0.05），Ⅲ組與其他各組間FT3/FT4均無顯著差異（P＞0.05）。

表4 各處理對黃羽肉雞免疫功能的影響

3 討論

3.1 益生菌與酶制劑及其協(xié)同效應對黃羽肉雞血液生化、激素指標的影響

動物機體的代謝過程是一個動態(tài)平衡的變化過程，血液中的許多生理生化參數(shù)受生長發(fā)育階段、日糧營養(yǎng)水平和自身內分泌狀況等因素的影響，因而它們也可以作為反映機體生理狀況的良好指征。

血清葡萄糖，主要是飼糧中的糖類被消化進入血液，以保障機體對葡萄糖的需要量，是機體主要的供能物質。本試驗結果顯示，雖然各組血清葡萄糖含量差異不顯著(P＞0.05),但是益生菌與酶制劑組合添加組的血糖濃度相對較高且與抗生素組的水平相當，說明益生菌與酶制劑兩者組合使用可增加由腸道吸收入血液的葡萄糖量，有提高機體能量代謝水平的趨勢。

血清甘油三酯水平可以反映機體脂類代謝水平，其含量升高可引發(fā)多種疾病，對機體健康不利，可當脂類消化吸收不良時，甘油三酯水平明顯下降，可能由于氧化反應，尤其是β-氧化過程的增強，血清三酰甘油含量升高，從而降低脂肪酸氧化供能途徑，增加脂肪酸合成三酰甘油，結果使血清總脂含量反而提高。本試驗中，飼喂基礎日糧組的血清甘油三酯含量明顯高于其他各組，飼糧添加抗生素的處理組甘油三酯含量低于其他各組，酶與益生菌制劑及兩者合用的Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ3組的血清甘油三酯濃度無明顯差異（P＞0.05），且處于中間水平，而過高、過低的血清甘油三酯濃度均不利于機體生長及健康，提示可能抗生素的添加不利于機體對脂類的消化吸收；而空白對照組有明顯升高血清甘油三酯濃度的趨勢，不利于動物體的健康，在飼糧中加入益生菌與酶制劑使機體甘油三酯維持在了一個適宜的水平，且兩者合用表現(xiàn)出了一定的協(xié)同效應。

膽固醇是動物細胞各種膜相結構及神經(jīng)髓鞘的重要組成部分,是膽汁酸、類固醇激素及VD3的前體,還是血液中脂類轉移系統(tǒng)的必需因子,具有重要的生理功能。血清膽固醇維持在相對較高的水平,對于飼養(yǎng)周期短、新陳代謝旺盛的動物來說,對其快速生長應該是有益的。本試驗中,單獨添加益生菌顯示有明顯降低血清總膽固醇含量的趨勢，這與前人研究結果基本一致,這可能與微生物對膽固醇的吸收及益生菌的添加提高了機體脂肪酶活性,并使游離膽酸鹽與膽固醇共沉淀,同時限制了內源性膽固醇的合成有關。而益生菌與酶制劑組合使用組的血清膽固醇含量明顯高于其他各組,有研究報道,血清膽固醇是反映日糧中脂肪或脂肪酸含量的重要指標,二者呈正相關,而高能量日糧脂肪含量更高。因酶與益生菌聯(lián)用可顯著提高日糧的能量水平及營養(yǎng)價值,從而可影響血清膽固醇含量,同時血清高膽固醇含量對本研究試驗動物(快長型黃羽肉雞)及飼養(yǎng)周期(全期飼養(yǎng)48 d)等條件來說表現(xiàn)出了較好的適應性，能夠滿足試雞快速生長及旺盛的新陳代謝需要。這與作者所做的飼養(yǎng)試驗及代謝試驗所得結果也基本吻合，不過益生菌與酶制劑合用提高肉雞血清膽固醇含量的機理有待進一步研究確定。

目前，關于肉雞血清乳酸含量與其生長性能之間關系的研究報道非常少。蔣桂韜報道，在小麥型日糧中添加木聚糖酶在一定程度上提高了黃羽肉仔雞血清乳酸含量，但差異不顯著（P＞0.05）。血乳酸濃度的變化可以反映出機體對葡萄糖的轉運和利用的動態(tài)平衡狀況及能量代謝水平。在代謝過程中乳酸脫氫酶將丙酮酸轉換為乳酸。在一般的新陳代謝過程中乳酸不斷被產(chǎn)生，但是其濃度維持一種動態(tài)平衡，一般不會上升，只有在乳酸產(chǎn)生加快，而又無法被及時運走時其濃度才會提高。若當組織所需的能量無法通過有氧呼吸得以滿足，及組織無法獲得足夠的氧或是無法足夠快地處理氧的情況下乳酸的濃度會上升。而有氧呼吸產(chǎn)生的供給機體的能量比生成乳酸的無氧呼吸過程高很多。在本試驗中，益生菌與酶制劑組合使用獲得了最低的血清乳酸濃度，且顯著低于飼喂基礎日糧的Ⅰ組（P＜0.05），說明益生菌與酶制劑的組合使用明顯提高了試雞有氧呼吸的水平，減少了機體的無氧呼吸，從而使機體的能量代謝水平提高，這與生產(chǎn)性能及真代謝能試驗結果相吻合。同時，單獨添加復合酶制劑未見使血清乳酸含量升高，這與蔣桂韜研究的結果不一致，可能是由于酶制劑類型、添加比例、日糧結構等不同所造成的差異。添加益生菌的Ⅱ組血清乳酸含量也較高，分析原因可能是芽孢桿菌可以產(chǎn)生乙酸、丙酸、丁酸等降低了消化道pH值，利于乳酸菌生長繁殖，而乳酸菌產(chǎn)生的乳酸被試雞機體吸收從而升高了血清乳酸濃度,但具體機理有待進一步研究。

尿素氮是體內氨基酸分解代謝的最終產(chǎn)物之一，有報道指出，機體蛋白質代謝良好時，血液尿素氮濃度降低，還有肉雞日糧中氨基酸總量和精氨酸比例適宜時，血清尿素氮最低，同時經(jīng)動物體腎臟排出的非蛋白氮50%是尿素氮，因此，血清尿素氮是反映機體內蛋白質代謝情況、日糧中氨基酸的平衡情況及動物體腎臟功能正常與否的重要標志。本試驗中，各組血清尿素氮濃度無顯著差異（P＞0.05），但Ⅲ組及Ⅳ組有降低血清尿素氮含量的趨勢，說明在兩組試雞體內氨基酸代謝旺盛，蛋白質分解減少而合成代謝加強，氮沉積增加，飼料中蛋白質利用率上升，這也與粗蛋白真代謝率的結果基本吻合。同時，血清尿素氮結果還說明肉雞日糧中的氨基酸總量與精氨酸的比例平衡沒有受到益生菌、酶制劑添加劑的破壞，且各處理對試雞腎臟功能也無不良影響。

天門冬氨酸轉氨酶在體內分布廣泛，但主要存在于肝臟、腎臟、心臟等組織器官細胞中，是參與肝臟氨基代謝的重要酶，在非必需氨基酸的合成中起重要的中介作用，其活性是反映肝臟、心臟等功能的重要且靈敏的指標。本試驗中，益生菌與酶制劑組合添加組的天門冬氨酸轉氨酶活性最高，且顯著高于空白對照組，說明益生菌與酶制劑組合使用能提高血清代謝酶酶活，增加肉雞肝臟合成蛋白的能力以及維持肝臟的正常功能，使機體內非必需氨基酸的轉化和生成增加，促進了蛋白質的沉積。

生長激素的功能主要有刺激骨骼生長，促進黏多糖及膠原的合成，還可影響蛋白質、糖類、脂類的代謝，最終影響動物的生產(chǎn)性能；胰島素可促進葡萄糖轉運進入細胞,使糖元的合成加強,亦可促進脂肪沉積和蛋白質、核酸的合成，有利于肌肉發(fā)育，加強了機體內的合成代謝，從而達到改善肉雞的胴體性狀，促進生長的效果。本試驗的結果顯示，空白組及益生菌組的血清生長激素濃度極顯著地高于其他3組(P＜0.01),血清胰島素濃度各組間無顯著差異（P＞0.05），但是空白組的胰島素濃度最高，這與劉燕強等、高峰等、艾曉杰等、宋凱等和羅定媛等報道的研究結果不一致，分析原因可能與試雞的日齡、所處生長階段及日糧營養(yǎng)結構有關。有研究指出，在大麥型或小麥型日糧中加入酶制劑能提高雛雞血液生長激素及胰島素水平，而本試驗飼喂的是玉米-豆粕-雜粕型日糧，且在飼養(yǎng)試驗結束后對試雞采血測定血液激素指標，結合參考本研究飼養(yǎng)試驗及血液常規(guī)生化指標結果分析，酶制劑及其與益生菌組合使用在本試驗條件下具有調節(jié)動物體的內分泌，迅速提升雛雞機體的基礎生長代謝水平的作用；而在生長后期，酶制劑及其與益生菌組合使用組試雞已處在一種同化作用與異化作用都較強的代謝水平下，即合成與分解代謝在一種新的較高的水平上達到了相對平衡的狀態(tài)，此時血液生長激素、胰島素含量也建立并保持在一種新的動態(tài)平衡內。同時，空白組與益生菌組血清較高含量的生長激素及胰島素從另一個側面說明兩組試雞后期機體養(yǎng)分吸收及代謝利用水平低，不能滿足機體生長需要，出現(xiàn)“供不應求”的現(xiàn)象，從而反饋調節(jié)使機體激素水平升高來促進對養(yǎng)分的同化吸收利用，使機體成長。

3.2 益生菌與酶制劑及其協(xié)同效應對黃羽肉雞免疫性能的影響

法氏囊是禽類特有的體液免疫中樞免疫器官，胸腺是細胞免疫中樞器官，兩者分別是B和T淋巴細胞分化成熟的場所,脾臟是禽類最大的外周免疫器官,參與全身的非特異性及特異性免疫,中樞及外周免疫系統(tǒng)器官的發(fā)育狀況直接決定著畜禽機體的免疫水平。免疫器官重量增加一般認為是其自身細胞生長發(fā)育和分裂增殖所致,為免疫增強的表現(xiàn),其指數(shù)的提高表明該器官成熟快。而Rivas等報道，胸腺、脾臟和法氏囊的重量可用于評價雛雞的免疫狀況。因此,免疫器官指數(shù)是反映機體免疫功能的一個重要指標。在本試驗中，各處理試雞胸腺、法氏囊、脾臟指數(shù)均無明顯差異(P＞0.05),說明在本試驗條件下益生菌、酶制劑及抗生素對免疫器官指數(shù)均無較大影響,不過添加復合酶制劑較其他各處理組更有改善免疫器官指數(shù)的趨勢。

血清蛋白質是血液的重要成分，可反映機體的營養(yǎng)狀況，維持體液的膠體滲透壓，保持機體的恒常性，并具有免疫、離子轉運、凝血抗凝血及修補組織等功能。血清總蛋白由白蛋白與球蛋白構成，總蛋白及白蛋白含量升高是蛋白質代謝旺盛的體現(xiàn)，表明氨基酸、蛋白質的吸收利用率提高，機體肝臟的蛋白質合成代謝及組織蛋白質的沉積作用增強，進而提高動物生產(chǎn)性能。血清白蛋白還可補充體內營養(yǎng)，有助于升高抗體水平，提高免疫力，防止白細胞減少及貧血等。球蛋白占血清總蛋白的比例較大，主要由單核巨噬細胞系統(tǒng)產(chǎn)生,機體循環(huán)抗體水平升高時,血清球蛋白數(shù)量也增加,其能與外來的特異性抗原起免疫反應而保護機體,其含量的高低可在一定程度上反映動物的免疫水平及生理狀況,它的含量升高也可引起總蛋白含量上升。白球比反映脾臟的功能狀況,同時也是衡量機體免疫水平的一項指標。白蛋白/球蛋白值的下降說明機體特異性免疫應答水平提升,抗病力在增強。已有很多研究報道,益生菌與酶制劑能提高動物機體血清蛋白含量,本試驗中,益生菌與酶制劑組合添加的Ⅳ組較其他組明顯提高了試雞血液總蛋白含量，Ⅳ組的白蛋白含量與添加抗生素的Ⅴ組相當，較空白對照Ⅰ組提高了7.79%(P＞0.05)，球蛋白含量較Ⅴ組提高了2.77%(P＞0.05),白球比Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ組間差異不顯著(P＞0.05),說明益生菌與酶制劑的協(xié)同效應具有提升血液總蛋白、白蛋白、球蛋白含量，增進機體免疫力的效果。值得一提的是Ⅲ組的總蛋白、白蛋白、球蛋白濃度明顯低于其他各組,白球比也最高，這與王佳麗等的研究結果存在差異,而與張金生等報道的結果類似,本試驗認為，造成這種差異的原因可能如White等的研究報道：血清蛋白的迅速轉換和長期限制蛋白質攝入量可引起血清白蛋白含量下降。本試驗中酶制劑的添加可能使得肉雞的蛋白質分解與合成代謝水平提高,血液蛋白的轉換速度加快,進而降低血清白蛋白、總蛋白含量；另一種原因可能是酶制劑的添加使得養(yǎng)分在前腸段就被充分分解,為動物機體吸收利用,而使得進入后腸段可供后腸微生物利用的營養(yǎng)物質減少,從而使腸道微生態(tài)平衡出現(xiàn)紊亂,腸道微生物的屏障保護作用消失,病原體及有害物質進入機體,進而影響肉雞血液蛋白含量及免疫水平。但具體原理需要進一步研究。

甲狀腺素對DNA和蛋白質的合成具有重要作用，主要促進器官和組織的分化。同時甲狀腺激素又能增強糖原、蛋白質、脂肪的分解，有利于機體的供能，還具有免疫增強作用，是調節(jié)機體代謝、生長發(fā)育和免疫功能不可或缺的內分泌激素。一般認為，三碘甲腺原氨酸（T3）是發(fā)揮生理功能的主要激素，其生理效價是甲狀腺素（T4）的數(shù)倍，是影響肉雞生長發(fā)育的重要因子，T3一部分由甲狀腺直接分泌，另一部分則來源于T4在5'-脫單碘酶的作用下轉變?yōu)門3。血循環(huán)中的T3、T4絕大部分為結合態(tài)，但真正發(fā)揮生理作用的卻是游離態(tài)的T3、T4。夏東等的研究表明，觀察雞的甲狀腺分泌功能除了看T3、T4的測定值外還需要觀察T3/T4值，該值的大小可反映出T4向T3的轉化能力，并且在一定程度上反映肉雞機體的蛋白質合成代謝水平和胴體增重情況。多項研究報道了益生菌與酶制劑添加于肉雞飼糧中均具有提升機體T3、T4水平，調節(jié)機體代謝及免疫的效應。在本試驗中，游離的T4濃度Ⅴ組及Ⅳ組較高,空白對照Ⅰ組及Ⅱ組較低,而游離的T3則是益生菌Ⅱ組、空白Ⅰ組明顯高于Ⅴ組(P＜0.05),Ⅳ組的FT3濃度也高于Ⅴ組及Ⅲ組。而FT3/FT4值Ⅰ、Ⅱ兩組一致且明顯高于組合添加Ⅳ組(P＜0.05)和Ⅴ組（P＜0.01），說明Ⅰ、Ⅱ兩組肉雞機體內T4向T3大量轉化。同時研究證實，T3、T4的含量與血清生長激素、胰島素水平密切相關，本研究中血清FT3、FT4的含量與之前測得的試雞血清生長激素、胰島素含量數(shù)據(jù)也基本吻合，即Ⅱ組與空白對照Ⅰ組的血清生長激素、胰島素、FT3、FT4以及FT3/FT4值均較高，這些表明空白對照Ⅰ組及Ⅱ組兩組試雞可能正處于生長發(fā)育旺盛期，合成代謝在增強，但是結合該兩組試雞生產(chǎn)性能水平并不比Ⅳ組好的結果，分析產(chǎn)生這種差異的原因可能是益生菌與酶制劑組合添加組試雞機體的基礎代謝水平在飼養(yǎng)試驗后期已達到比空白對照Ⅰ組及Ⅱ組高很多的水平，在這種新的較高的代謝水平上，酶與益生菌合用組試雞機體內分泌系統(tǒng)的激素產(chǎn)生也達到一種新的適宜的平衡狀態(tài)，這就可能使得益生菌與酶制劑組合添加組血清激素水平不如Ⅰ、Ⅱ兩組高而生產(chǎn)性能卻獲得較優(yōu)的結果，但是否真如猜想這般，還需要進一步研究證實。

4 結論

在黃羽肉雞飼糧中添加抗生素、益生菌、酶制劑以及酶與益生菌組合使用，對試雞血液生理生化指標及免疫功能均有不同程度的改善作用，但益生菌與酶制劑聯(lián)用的協(xié)同效應表現(xiàn)出了一定的優(yōu)勢，并表現(xiàn)出具有較強的替代抗生素飼料添加劑的潛能。

（參考文獻88篇，刊略，需者可函索）