紫錐菊提取物對彭澤鯽生長和抗氧化反應的影響

唐雪蓮 付京花 李志華 鄒記興

(華南農業(yè)大學動物科學學院，廣東廣州 510642)

目前，水產養(yǎng)殖中抗生素等化學藥物的耐藥性和藥物殘留等問題給養(yǎng)殖業(yè)和人類健康帶來了嚴重危害。在“回歸自然、綠色消費”成為時尚的今天，天然植物藥物理所當然地成為現(xiàn)代醫(yī)療保健的良好選擇，天然植物提取物作為免疫增強劑在水產養(yǎng)殖中得到廣泛應用和研究。

紫錐菊（Echiunacea purpurea）是原產于美洲的一類菊科植物，在美洲民間擁有悠久的使用歷史。目前，紫錐菊作為免疫調節(jié)劑在國際上受到普遍重視。在我國，自20世紀70年代引種成功后，其各方面的應用得到廣泛研究。

但目前，國內外關于紫錐菊在水產養(yǎng)殖方面作用的研究較少。本試驗旨在研究紫錐菊提取物對鯽魚生長和抗氧化反應的影響，為紫錐菊在水產養(yǎng)殖中的研究與應用提供依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

本試驗采用清遠市北江水產科學研究所提供的彭澤鯽（Carassius auratus var.pengze），體重為（7.50±0.15）g，健康狀況良好。試驗魚隨機分為4個試驗組(EP1組、EP2組、EP4組、EP8組)和對照組，每組設3個重復，每個重復30尾。試驗組分別投喂添加0.1%、0.2%、0.4%、0.8%紫錐菊提取物的飼料，對照組投喂基礎飼料（見表1）。紫錐菊提取物購于西安天一生物技術有限公司（多酚含量4%）。

表1 試驗飼料配方（%）

1.2 試驗動物管理

養(yǎng)殖試驗于華南農業(yè)大學循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中進行。試驗前，先將魚馴養(yǎng)兩周，期間飼喂對照組飼料。2周后，進行隨機分組開始投喂試驗飼料。每天定量投喂2次，投飼率為4%～5%，前2周按魚體重的理論增重量調整投飼量，第3周對魚進行稱重，調整投飼量。投飼時間分別為9:00和16:00。每天早上清除箱內糞便，3 d換水1/3，每天記錄飼料投喂量，記錄死亡魚的體重,養(yǎng)殖周期為60 d。試驗期間水溫為(26.6±1.2)℃，pH 值為 7.40～7.80，溶解氧濃度＞5.0 mg/l，氨氮濃度＜0.3 mg/l。

1.3 樣品采集與分析

飼養(yǎng)試驗結束后魚禁食1 d，稱各組魚重。取魚血液，抗凝分離血清，-20℃保存?zhèn)溆谩Ｈ「闻K稱重。根據公式計算各組魚的相對增重率、飼料效率、成活率。

相對增重率(%)=100×(末平均體重-初平均體重)/初平均體重；

飼料效率(%)=100×總體重增加量/總飼料投喂量；

肝體比（%）=100×肝重（g）/體重（g）；

成活率（%）=100×終末尾數(shù)/初始尾數(shù)。

血清中羥自由基（·OH）、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、谷胱甘肽還原酶（GR）活力和丙二醛（MDA）含量等采用南京建成試劑盒檢測。

1.4 數(shù)據處理

本試驗結果以“平均值±標準誤差”（Mean±SE）表示，采用Excel軟件和SPSS 17.0軟件處理試驗所得數(shù)據。對組間平均值之間的差異顯著性通過單因素方差分析后利用Duncan's法檢驗進行多重比較，顯著水平采用0.05。

2 結果與討論

2.1 紫錐菊提取物對鯽魚生長的影響（見表2）

從表2可以看出，飼料中添加紫錐菊提取物后，各試驗組相對增重率與對照組相比均有增加的趨勢，其中EP4組與對照組相比差異顯著（P＜0.05），其他組與對照組相比差異不顯著（P＞0.05）。各試驗組飼料效率和肝體比與對照組相比均有增加的趨勢，但各組之間差異不顯著(P＞0.05)。各組之間鯽魚的成活率差異不顯著（P＞0.05）。

表2 紫錐菊提取物對彭澤鯽生長的影響（%）

任永林（2008）報道，紫錐菊提取物對鯉魚生長有一定的影響，表現(xiàn)為各試驗處理組除對鯉魚成活率和攝食量的影響不大，對增重和相對生長率有不同程度的促進作用，對餌料系數(shù)有降低作用，且0.2%添加量效果最佳。Aly等（2010）報道了紫錐菊對尼羅羅非魚生長的影響，結果發(fā)現(xiàn)，在夏季，紫錐菊可顯著增加羅非魚的體增重和特定生長率，并能顯著提高魚的成活率。Oskoii等（2011）研究了在虹鱒日糧中添加紫錐菊對其生長等指標的影響，結果表明，紫錐菊各添加組均能提高虹鱒的體增重、特定生長率，降低餌料系數(shù)，且0.5%添加量效果最佳。本研究中，0.4%紫錐菊提取物能提高鯽魚的相對增重率，與上述研究結果一致。

2.2 紫錐菊提取物對鯽魚血清抗氧化反應的影響

羥自由基(·OH)是最活躍的自由基,主要會造成體內脂質過氧化而破壞細胞，也會和糖類、氨基酸、磷脂質、核酸和有機酸等生物體內的物質反應，導致細胞死亡或突變。紫錐菊提取物對鯽魚血清中·OH含量的影響如表3所示，各試驗組較對照組血清中·OH的含量均有顯著的下降(P＜0.05),且當紫錐菊濃度達0.2%時·OH含量最低，說明紫錐菊提取物可降低鯽魚血清中的·OH含量。

表3 紫錐菊提取物對彭澤鯽血清抗氧化能力的影響

超氧化物歧化酶（SOD）廣泛存在于各種生物體內，是機體防御超氧自由基損傷的主要防御性酶。鯽魚血清中SOD活力結果表明（見表3），在添加了紫錐菊提取物后,各組中的SOD活力均出現(xiàn)了不同程度的提高,并且SOD的活力隨紫錐菊提取物濃度的提高呈上升趨勢，其中以紫錐菊添加量為0.4%時SOD活力最高，且與對照組相比差異顯著（P＜0.05），該研究結果與任永林的研究結果一致。試驗結果表明，添加紫錐菊提取物后可增加鯽魚血清中的SOD活力，促進血清超氧自由基清除能力，增強對機體的保護作用。

過氧化氫酶（CAT）是一種酶類清除劑，它可促使機體過氧化氫分解，清除體內的過氧化氫，從而使細胞免于遭受其害，是生物防御體系的關鍵酶之一。紫錐菊提取物對鯽魚血清中CAT活力的影響結果表明（見表3），血清中4個試驗組中的CAT活力都高于對照組。EP2和EP4組CAT的活力顯著高于對照組（P＜0.05），其中以紫錐菊添加量為0.4%時CAT活力達到最高，為（50.82±2.22）U/ml；當紫錐菊提取物的添加量達到0.8%時，鯽魚血清中的CAT活力反而下降，但與對照組相比差異不顯著（P＞0.05），說明添加紫錐菊提取物后可增加鯽魚血清中的CAT活力，促進血清過氧化氫酶的清除能力。

谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)可以清除由活性氧和·OH誘發(fā)的脂質過氧化物，保護細胞膜結構和功能的完整性。但試驗結果發(fā)現(xiàn)，紫錐菊提取物降低鯽魚血清中GSH-Px活力。CAT和GSH-Px在降解過氧化氫過程中具有互補作用，高水平的過氧化氫可誘導CAT活力升高,但卻抑制GSH-Px的活力,反之亦然，這可能是本研究中GSH-Px活力降低的原因。

谷胱甘肽還原酶（GR）可將氧化型谷胱甘肽（GSSG）催化反應成還原型（GSH）。而谷胱甘肽（GSH）是一種重要的細胞抗氧化劑，缺失谷胱甘肽還原酶會使細胞對氧化劑更為敏感。紫錐菊提取物對彭澤鯽血清中GR活力的影響結果（見表3）說明添加紫錐菊提取物后，血清中4個試驗組中的GR活力都高于對照組，且添加量為0.4%和0.8%時，與對照組相比差異顯著（P＜0.05）。

丙二醛（MDA）是自由基作用于脂質發(fā)生過氧化反應的終產物，會引起蛋白質、核酸等生命大分子的交聯(lián)聚合，且具有細胞毒性，能誘導細胞凋亡。隨著紫錐菊添加量的增加，血清中MDA含量總體上呈下降趨勢（見表3），且當紫錐菊提取物濃度達0.4%時MDA含量最低，與對照組相比差異顯著（P＜0.05），紫錐菊提取物濃度為0.1%、0.2%時血清中MDA含量相對于對照組有所下降，但差異并不顯著(P＞0.05)，該研究結果與任永林的研究結果一致。說明添加紫錐菊提取物可降低鯽魚血清中MDA含量，減少脂質過氧化。

3 結論

飼料中添加紫錐菊提取物，可提高鯽魚的相對增重率，顯著降低鯽魚血清中的·OH含量（P＜0.05），降低MDA含量，提高其血清中的SOD、CAT和GR活力，同時降低GSH-Px活力，增強彭澤鯽血清的抗氧化反應，本研究為紫錐菊在水產養(yǎng)殖中的研究與應用提供了基礎數(shù)據。關于紫錐菊提取物影響魚體生長和抗氧化反應的機理還有待于進一步探討。